標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 27644-2011 禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測(cè)方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，主要針對(duì)禽類(lèi)皰疹病毒2型（通常指馬立克氏病病毒）的檢測(cè)，采用熒光定量PCR技術(shù)。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了從樣品采集到結(jié)果分析的一系列操作流程和技術(shù)參數(shù)，旨在提供一個(gè)準(zhǔn)確、快速且可重復(fù)性強(qiáng)的檢測(cè)方案。

在樣品處理方面，標(biāo)準(zhǔn)介紹了如何正確地收集和保存待測(cè)樣本，包括但不限于血液、組織等，并強(qiáng)調(diào)了避免交叉污染的重要性。對(duì)于核酸提取過(guò)程，給出了推薦使用的試劑盒以及具體的操作步驟，確保能夠高效提取出足夠純度與量的DNA用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

關(guān)于熒光PCR反應(yīng)體系的建立，標(biāo)準(zhǔn)明確了所需的各種成分及其濃度比例，如引物序列、探針設(shè)計(jì)原則及使用條件等關(guān)鍵信息。此外，還特別指出了循環(huán)條件設(shè)置，包括預(yù)變性溫度與時(shí)長(zhǎng)、擴(kuò)增階段各步驟的溫度控制及時(shí)序安排等細(xì)節(jié)，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和一致性。


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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2011-12-30 頒布
  • 2012-04-01 實(shí)施
?正版授權(quán)
GB/T 27644-2011禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測(cè)方法_第1頁(yè)
GB/T 27644-2011禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測(cè)方法_第2頁(yè)
GB/T 27644-2011禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測(cè)方法_第3頁(yè)
GB/T 27644-2011禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測(cè)方法_第4頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T27644—2011

禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測(cè)方法

Protocolofreal-timePCRfordetectingGallidHepersVirus2

2011-12-30發(fā)布2012-04-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測(cè)方法

GB/T27644—2011

*

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽(yáng)區(qū)和平里西街甲號(hào)

2(100013)

北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

/p>

年月第一版

20123

*

書(shū)號(hào)

:155066·1-44332

版權(quán)專(zhuān)有侵權(quán)必究

GB/T27644—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國(guó)深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局揚(yáng)州大學(xué)河南農(nóng)業(yè)大學(xué)

:、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人詹愛(ài)軍劉文博王新衛(wèi)盧體康花群義陳書(shū)琨秦智鋒陳兵高小博

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T27644—2011

禽皰疹病毒2型熒光PCR檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了禽皰疹病毒型熒光檢測(cè)的操作方法

2PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于禽皰疹病毒型的鑒定及其流行病學(xué)調(diào)查診斷檢疫和監(jiān)測(cè)

2、、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

Ct值每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)量達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

:。

DNA脫氧核糖核酸

:deoxyribonucleicacid。

dNTP三磷酸脫氧核糖核苷含有

:deoxy-ribonucleosidetriphosphate。dCTP、dGTP、dATP、

四種脫氧核糖核苷

dTTP。

EDTA乙二胺四乙酸

:ethylenediaminetetraaceticacid。

GHV2禽皰疹病毒型馬立克氏病病毒血清型

:GallidHepersVirus22(1)。

MD馬立克氏病

:Marek’sDisease。

PBS磷酸鹽緩沖生理鹽水

:phosphatebelancedsolution。

PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

:polymerasechainreaction。

Real-timePCR實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)

:Real-timepolymerasechainreaction。

Taq酶耐熱聚合酶

:ThermusaquaticuspolymeraseDNA。

4試劑

41試劑級(jí)別除另有規(guī)定本方法試驗(yàn)用水應(yīng)符合規(guī)定的二級(jí)水所用化學(xué)試劑均為分

.:,GB/T6682,

析純

。

42禽皰疹病毒型熒光檢測(cè)試劑盒保存組成及使用注意事項(xiàng)參見(jiàn)附錄

.2PCR,-20℃,A。

43引物和探針序列產(chǎn)物長(zhǎng)度

.(142bp)

上游引物

:5’CCACCACCTCCCATCTGTAC3’

下游引物

:5’GACAAGGCTGAGCGTAAACC3’

探針其端和端分別標(biāo)記

TaqMan:5’ACACGGCTCGGTAACAGGACACAATG3’,5’3’FAM

和或或

BHQ(Ta

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