高中生物蘇教版生物技術(shù)實(shí)踐第一章無菌操作技術(shù)實(shí)踐 第1章第1節(jié)

第一章第一節(jié)一、選擇題1．對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是()①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤解析：培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速徹底的滅菌效果；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒；牛奶為不破壞其營養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法。答案：A2．有關(guān)平板劃線操作的敘述不正確的是()A．第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B．每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上的菌種C．在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液D．劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者解析：在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種來源于第一次劃線的末端。答案：C3．關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，敘述錯(cuò)誤的是()A．操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50D．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置解析：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，不能顛倒。牛肉膏容易吸潮，所以當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙。待培養(yǎng)基冷卻至50答案：A4．為了保持菌種的純凈需要進(jìn)行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述不正確的是()A．對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法B．臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上C．臨時(shí)保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D．對(duì)于需要長期保存的菌種，可以采用－4解析：對(duì)于需要長期保存的菌種，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20答案：D5．發(fā)酵工程的第一個(gè)重要工作是從混雜的微生物群體中選擇優(yōu)良的單一純種，獲得純種的方法不包括()A．根據(jù)微生物對(duì)碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基B．根據(jù)微生物缺乏生長因子的種類，在培養(yǎng)基中增減不同的生長因子C．利用高溫高壓消滅不需要的雜菌D．根據(jù)微生物對(duì)抗生素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素解析：高溫高壓能殺滅一切微生物，故不能用于從混雜的微生物群體中選擇優(yōu)良的單一純種。答案：C6．獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是()A．將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌B．接種純種細(xì)菌C．適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D．防止外來雜菌的入侵解析：防止雜菌入侵，是獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，一方面要為培養(yǎng)的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件，另一方面要保證其他微生物無法混入。答案：D7．下列有關(guān)平板劃線接種法的操作錯(cuò)誤的是()A．將接種環(huán)放在火焰上灼燒B．將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液C．蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行D．劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連答案：D8．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入瓊脂這一理想的凝固劑，下列關(guān)于瓊脂的說法不正確的是()A．不被所培養(yǎng)的微生物分解利用，對(duì)所培養(yǎng)的微生物無毒害作用B．在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)C．瓊脂凝固點(diǎn)低，利于微生物的生長D．瓊脂在滅菌過程中不會(huì)被破壞，透明度好，凝固力強(qiáng)解析：瓊脂作為一種理想的凝固劑，是由其本身的性質(zhì)決定的，瓊脂不會(huì)被微生物利用且對(duì)其無毒害作用，在滅菌過程中不會(huì)被破壞，透明度好。答案：C9．將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37℃A．對(duì)比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用B．對(duì)比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌C．沒必要放入未接種的培養(yǎng)基D．為了下次接種時(shí)再使用解析：對(duì)照說明培養(yǎng)基是否被雜菌所污染。答案：B10．采用干熱滅菌、灼熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、紫外線照射等幾種方法，可分別殺死哪些部位的雜菌()A．接種環(huán)、吸管、培養(yǎng)基、接種室B．吸管、接種環(huán)、培養(yǎng)基、接種箱C．培養(yǎng)基、接種環(huán)、吸管、接種箱D．培養(yǎng)皿、吸管、培養(yǎng)基、雙手答案：B11．若大腸桿菌和圓褐固氮菌混合在一起采用下列哪組培養(yǎng)基可將它們分離()A．加食鹽的培養(yǎng)基和蛋白胨培養(yǎng)基B．伊紅——美藍(lán)培養(yǎng)基和無氮培養(yǎng)基C．斜面培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基D．加青毒素的培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基解析：大腸桿菌的代謝產(chǎn)物可與伊紅和美藍(lán)結(jié)合，使菌落呈綠色，并帶金屬光澤，圓褐固氮菌能自行固氮，可用無氮培養(yǎng)基選擇。答案：B12．下列與微生物相關(guān)的各項(xiàng)敘述中，正確的是()A．無機(jī)氮源可以為某些微生物提供能量B．欲獲得大腸桿菌原生質(zhì)體，需用纖維素酶處理細(xì)胞壁C．控制大腸桿菌抗藥性的基因位于擬核中的DNA上D．流感病毒雖含有簡單的細(xì)胞器，但必須在宿主細(xì)胞內(nèi)才能合成多種蛋白質(zhì)解析：無機(jī)氮源如NH3，在氧化成HNO3中釋放的能量，可以作為硝化細(xì)菌的能源。大腸桿菌細(xì)胞壁中無纖維素；細(xì)菌抗藥性基因位于質(zhì)粒上；病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)。答案：A13．下列關(guān)于配制培養(yǎng)基的有關(guān)敘述中，正確的是()A．制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂B．發(fā)酵工程中一般用液體培養(yǎng)基C．氮源主要是為微生物提供能量D．牛肉膏只為微生物提供氮元素解析：制作固體培養(yǎng)基時(shí)必須加入凝固劑。瓊脂是常用的凝固劑，但不是唯一的凝固劑，例如明膠也可作為凝固劑；發(fā)酵工程一般都是用液體培養(yǎng)基，原因是液體培養(yǎng)基便于調(diào)節(jié)pH、溫度、溶氧等，而且液體培養(yǎng)基還能有利于微生物充分利用營養(yǎng)物質(zhì)；氮源主要是作為微生物合成蛋白質(zhì)和核酸的原料；牛肉膏主要為微生物提供糖類、有機(jī)氮化合物、磷酸鹽和維生素等。答案：B14．關(guān)于滅菌和消毒的不正確理解是()A．滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B．消毒和滅菌的實(shí)質(zhì)是相同的C．接種環(huán)用灼燒法滅菌D．常用的消毒方法有煮沸消毒法、紫外線法、化學(xué)藥劑法解析：滅菌與消毒是兩個(gè)概念。滅菌是指殺滅一定環(huán)境中的所有微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子。根據(jù)不同的材料選用不同的滅菌方法，如接種環(huán)用火焰燒灼法，培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法等。消毒是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。答案：B15．實(shí)驗(yàn)室用于分離出與大腸桿菌混雜的酵母菌，培養(yǎng)基的要求是(多選)()A．添加瓊脂 B．不加氮源C．添加青霉素 D．pH調(diào)節(jié)到7．0～8．0答案：AC二、非選擇題16．某自來水可能受到生活污水的污染(國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每升飲用水中大腸桿菌不超過3個(gè))，可用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基檢測自來水中大腸桿菌的數(shù)量。在此培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落呈深紫色。(1)配制伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基時(shí)，除蛋白胨、乳糖、伊紅、美藍(lán)等原料外，還需要____________________。在這些成分中，能為大腸桿菌提供氮源的是________。(2)培養(yǎng)基最常用的滅菌方法是________________。滅菌和消毒的區(qū)別在于滅菌殺死了全部的____________________。(3)在上圖的系列稀釋操作中，依次將1mL液體移入下一個(gè)盛有________mL蒸餾水的試管中。稀釋的目的是________________________________________________________________。(4)過程a所用的接種方法為____________。通過培養(yǎng)，各培養(yǎng)皿中的紫色菌落如上圖所示，則自來水樣本中大腸桿菌超標(biāo)____________萬倍。答案：(1)水、無機(jī)鹽和瓊脂(不答瓊脂不給分)蛋白胨(2)高壓蒸汽滅菌法微生物及其芽孢、孢子(3)9將微生物(大腸桿菌)稀釋成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基上形成單個(gè)菌落(4)(稀釋)涂布平板法100017．為了獲得純度高的大腸桿菌，需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏—蛋白胨—瓊脂培養(yǎng)基。(1)培養(yǎng)大腸桿菌，配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是：計(jì)算→稱量→________→________→倒平板。(2)稱量時(shí)，由于牛肉膏比較黏稠，可以用________挑取，放在________上稱量。由于牛肉膏和蛋白胨________，稱量時(shí)動(dòng)作要迅速，稱后要及時(shí)蓋上瓶蓋。(3)在牛肉膏—蛋白胨—瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌能生長，說明培養(yǎng)基含有________________等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。(4)微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法如______________和________________等，使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)________，從而獲得純菌株。解析：考查微生物純化培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識(shí)。配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基本步驟是：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。稱量時(shí)，可用玻璃棒挑取，放在稱量紙上稱量，稱量時(shí)動(dòng)作要迅速。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中含有大腸桿菌所需要的碳源、氮源、無機(jī)鹽、水等營養(yǎng)要素，所以常用來培養(yǎng)大腸桿菌。微生物純化培養(yǎng)的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，可使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)菌落，從而獲得純菌株。答案：(1)溶化滅菌(2)玻璃棒稱量紙容易吸潮(3)碳源、氮源、無機(jī)鹽、水(4)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落18．為驗(yàn)證某種中藥牙膏是否像其廣告宣傳的一樣具有較強(qiáng)的抑菌功效，老師帶領(lǐng)生物興趣小組的同學(xué)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)(實(shí)驗(yàn)過程符合無菌操作要求)：①用無菌水漱口，向漱口液中加入適量的該中藥牙膏；②配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基；③將上述樣品接種到培養(yǎng)基上，在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)；④一段時(shí)間后，對(duì)培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行觀察并進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。請(qǐng)分析上述實(shí)驗(yàn)過程并回答下列問題：(1)培養(yǎng)基中牛肉膏的作用主要是為微生物生長提供____________________等營養(yǎng)物質(zhì)；培養(yǎng)基滅菌常用的方法是______________________________________。(2)如何證明所用培養(yǎng)基已經(jīng)徹底滅菌？________________________________。(3)本實(shí)驗(yàn)樣品接種時(shí)最好采用______________________法。培養(yǎng)一段時(shí)間后，培養(yǎng)基表面長出菌落，每一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)菌落來源于樣品中的________。(4)請(qǐng)指出本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中的一個(gè)明顯的錯(cuò)誤，并加以改正。________________________________。解析：該實(shí)驗(yàn)的目的是檢驗(yàn)?zāi)撤N中藥牙膏是否有抑菌功效。從實(shí)驗(yàn)的操作中可以看出，該實(shí)驗(yàn)缺乏對(duì)照，應(yīng)該將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏作為對(duì)照，其他操作相同。(1)、(2)牛肉膏既是碳源也是氮源，還能為細(xì)菌生長提供維生素。