標準解讀
《GB/T 30988-2014 多酚類植物基因組DNA提取純化及測試方法》是一項國家標準,旨在為從富含多酚的植物材料中高效提取、純化并測試高質(zhì)量的基因組DNA提供一套標準化的操作流程。該標準適用于科學(xué)研究、分子生物學(xué)實驗等領(lǐng)域內(nèi)需要處理含有多酚化合物植物樣本的情況。
標準首先定義了適用范圍,明確了其主要針對的對象是那些含有較高濃度多酚物質(zhì)的植物組織。接著,對術(shù)語和定義進行了規(guī)范說明,確保使用者對于文中提到的專業(yè)詞匯有一致的理解。
在材料準備部分,《GB/T 30988-2014》列出了實驗所需的各種試劑與耗材,并指定了它們的具體規(guī)格要求。此外,還介紹了實驗前準備工作的重要性,包括但不限于樣品的選擇與保存條件等。
關(guān)于操作步驟,《GB/T 30988-2014》詳細描述了從植物材料破碎開始直到最終獲得純凈DNA樣品為止的整個過程。這其中包括了如何有效地去除多酚干擾物質(zhì)的方法,以及推薦使用的特定緩沖液配方來優(yōu)化DNA產(chǎn)量和質(zhì)量。同時,也提供了幾種不同的DNA純化技術(shù)供選擇使用。
為了保證所提取得到了高質(zhì)量的DNA,《GB/T 30988-2014》還規(guī)定了一系列的質(zhì)量控制措施,如通過瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA完整性、紫外分光光度計測定A260/A280比值評估純度等手段來進行驗證。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2014-07-24 頒布
- 2015-03-01 實施
文檔簡介
ICS07080
B30.
中華人民共和國國家標準
GB/T30988—2014
多酚類植物基因組DNA提取純化
及測試方法
MethodsofgenomicDNAextractionfromplantswithhighlevelsofpolyphenols
2014-07-24發(fā)布2015-03-01實施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布
中國國家標準化管理委員會
GB/T30988—2014
目次
前言
…………………………Ⅲ
范圍
1………………………1
規(guī)范性引用文件
2…………………………1
縮略語
3……………………1
原理
4………………………1
實驗室通用要求
5…………………………2
試劑與溶液
6………………2
儀器和設(shè)備
7………………2
提取步驟
8…………………3
純度濃度測試
9DNA、……………………4
Ⅰ
GB/T30988—2014
前言
本標準按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標準由中國測試技術(shù)研究院提出
。
本標準由全國生化檢測標準化技術(shù)委員會歸口
(SAC/TC387)。
本標準起草單位中國測試技術(shù)研究院中測測試科技有限公司
:、。
本標準主要起草人譚和平沈興中唐祥凱周李華孫登峰
:、、、、。
Ⅲ
GB/T30988—2014
多酚類植物基因組DNA提取純化
及測試方法
1范圍
本標準規(guī)定了以茶樹為代表的多酚類植物基因組提取純化方法以及純度濃度測試
DNADNA、
方法
。
本標準適用于茶樹馬鈴薯櫻桃葡萄以及其他富含多酚類的植物的植物基因組提取及
、、、DNA
純化
。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法
GB/T6682—2008
轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸提取純化方法
GB/T19495.3—2004
3縮略語
下列縮略語適用于本文件
。
三羥甲基氨基甲烷
Tris:()
十二烷基磺酸鈉
SDS:
聚乙烯吡咯烷酮
PVP:
核糖核酸酶
RNaseA:A
二甲苯青
FF:
乙二胺四乙酸
EDTA:
三羥甲基氨基甲烷–乙二胺四乙酸
TE:()
4原理
41提取純化
.
在液氮條件中通過物理研磨方法破碎多酚類植物葉片的細胞利用抗氧化劑防止多酚類化合物氧
,,
化褐變同時利用聚乙烯吡咯烷酮的粘接性去除多酚類化合物及其他次生代謝物等雜質(zhì)然后利
,(PVP),
用化學(xué)方法使從植物細胞中釋放出來再棄除中的蛋白質(zhì)等雜質(zhì)以及提取過程中
DNA,DNA,DNA
加入的異戊醇異丙醇乙醇等有機溶劑最后得到純的
、、,DNA。
42純度測試
.
在下根據(jù)在處有吸收高峰蛋白質(zhì)在處有吸收高峰硫氰酸鹽
pH7~8.5,DNA260nm,280nm,、
碳水化合物糖類在處有吸
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