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  • 2014-07-24 頒布
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文檔簡介

ICS07080

B30.

中華人民共和國國家標準

GB/T30988—2014

多酚類植物基因組DNA提取純化

及測試方法

MethodsofgenomicDNAextractionfromplantswithhighlevelsofpolyphenols

2014-07-24發(fā)布2015-03-01實施

中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T30988—2014

目次

前言

…………………………Ⅲ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

縮略語

3……………………1

原理

4………………………1

實驗室通用要求

5…………………………2

試劑與溶液

6………………2

儀器和設備

7………………2

提取步驟

8…………………3

純度濃度測試

9DNA、……………………4

GB/T30988—2014

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中國測試技術研究院提出

。

本標準由全國生化檢測標準化技術委員會歸口

(SAC/TC387)。

本標準起草單位中國測試技術研究院中測測試科技有限公司

:、。

本標準主要起草人譚和平沈興中唐祥凱周李華孫登峰

:、、、、。

GB/T30988—2014

多酚類植物基因組DNA提取純化

及測試方法

1范圍

本標準規(guī)定了以茶樹為代表的多酚類植物基因組提取純化方法以及純度濃度測試

DNADNA、

方法

。

本標準適用于茶樹馬鈴薯櫻桃葡萄以及其他富含多酚類的植物的植物基因組提取及

、、、DNA

純化

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法

GB/T6682—2008

轉基因產品檢測核酸提取純化方法

GB/T19495.3—2004

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

三羥甲基氨基甲烷

Tris:()

十二烷基磺酸鈉

SDS:

聚乙烯吡咯烷酮

PVP:

核糖核酸酶

RNaseA:A

二甲苯青

FF:

乙二胺四乙酸

EDTA:

三羥甲基氨基甲烷–乙二胺四乙酸

TE:()

4原理

41提取純化

.

在液氮條件中通過物理研磨方法破碎多酚類植物葉片的細胞利用抗氧化劑防止多酚類化合物氧

,,

化褐變同時利用聚乙烯吡咯烷酮的粘接性去除多酚類化合物及其他次生代謝物等雜質然后利

,(PVP),

用化學方法使從植物細胞中釋放出來再棄除中的蛋白質等雜質以及提取過程中

DNA,DNA,DNA

加入的異戊醇異丙醇乙醇等有機溶劑最后得到純的

、、,DNA。

42純度測試

.

在下根據在處有吸收高峰蛋白質在處有吸收高峰硫氰酸鹽

pH7~8.5,DNA260nm,280nm,、

碳水化合物糖類在處有吸

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