標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 31789-2015 冬生疫霉菌檢疫鑒定方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),旨在規(guī)范冬生疫霉菌(Phytophthora infestans)的檢疫與鑒定流程。該標(biāo)準(zhǔn)適用于植物檢疫機(jī)構(gòu)對(duì)疑似感染冬生疫霉菌的植物樣本進(jìn)行檢測(cè)時(shí)使用的技術(shù)方法。冬生疫霉菌是引起馬鈴薯晚疫病和番茄晚疫病的重要病原體之一,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來嚴(yán)重威脅。
標(biāo)準(zhǔn)首先明確了適用范圍,并對(duì)術(shù)語進(jìn)行了定義,如“冬生疫霉菌”、“培養(yǎng)基”等關(guān)鍵概念。接著詳細(xì)描述了樣品采集、處理以及保存的具體要求,確保從源頭上保證實(shí)驗(yàn)材料的質(zhì)量與代表性。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室條件也有明確的規(guī)定,包括但不限于溫度、濕度控制及無菌操作環(huán)境等方面。
在具體的操作步驟方面,《GB/T 31789-2015》提供了多種鑒定技術(shù)方案,包括傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)觀察法、生理生化反應(yīng)測(cè)試以及現(xiàn)代分子生物學(xué)手段如PCR擴(kuò)增技術(shù)。每種方法都附有詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)流程說明,包括試劑配制、儀器設(shè)備準(zhǔn)備、操作步驟及結(jié)果判斷依據(jù)等信息。此外,還特別強(qiáng)調(diào)了質(zhì)量控制的重要性,通過設(shè)置陽性對(duì)照與陰性對(duì)照來驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的有效性和準(zhǔn)確性。
針對(duì)不同類型的樣本(如葉片、莖稈或塊莖),標(biāo)準(zhǔn)給出了相應(yīng)的預(yù)處理建議,以提高病原菌分離的成功率。同時(shí),也指出了可能出現(xiàn)的問題及其解決辦法,幫助使用者更好地應(yīng)對(duì)實(shí)際工作中遇到的各種情況。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2015-07-03 頒布
- 2015-11-27 實(shí)施



文檔簡(jiǎn)介
ICS6502001
B16..
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T31789—2015
冬生疫霉菌檢疫鑒定方法
DetectionandidentificationofPhytophthorahibernalisCarne
2015-07-03發(fā)布2015-11-27實(shí)施
中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
GB/T31789—2015
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任
。。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口
(SAC/TC271)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國(guó)廈門出入境檢驗(yàn)檢疫局
:、。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人杜洪忠吳品珊王宏毅嚴(yán)進(jìn)張秋娥
:、、、、。
Ⅰ
GB/T31789—2015
冬生疫霉菌檢疫鑒定方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了冬生疫霉菌的檢疫鑒定方法
。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于針對(duì)冬生疫霉菌寄主的苗木枝條枝葉果實(shí)以及夾帶土壤和介質(zhì)中冬生疫霉菌的
、、、
鑒定
。
2儀器和用具
21儀器
.
生物顯微鏡超凈工作臺(tái)光照培養(yǎng)箱電子天平高壓滅菌鍋冰箱擴(kuò)增儀熒光
、、、(1/1000g)、、、PCR、
擴(kuò)增儀電泳儀凝膠成像儀高速冷凍離心機(jī)恒溫水浴鍋
PCR、、、、。
22用具
.
燒杯三角瓶量筒試管培養(yǎng)皿酒精燈鑷子剪刀解剖刀接種針載玻片蓋玻片塑料研杵
、、、、、、、、、、、、、
移液器移液器吸頭離心管液氮罐
、、、。
3試劑材料和培養(yǎng)基
、
31試劑
.
匹馬霉素氨芐青霉素鈉鹽利福平鈉鹽五氯硝基苯
(pimaricin),(ampicillin),(rifampicin),(penta-
碳酸鈣β谷甾醇β色氨酸硫氨
chloronitrobenzene),(CaCO3),-(-sitosterol),(tryptophan),(thiamine),
氯化鈣次氯酸鈉
(CaCl2·H2O),(NaClO)。
瓊脂糖乙二胺四乙酸四鈉鹽
,Tris-HCl,MgCl2,HCl,EDTA(),NaOH,NaOAc,KCl,Tris,CTAB
十六烷基三甲基溴化銨無水乙醇三氯甲烷異丙醇異
(),TAE,(Ethanol),(Chloroform),(Isopropanol),
戊醇核酸染料蛋白酶Taq聚合酶相對(duì)分子
(Isoamylalcohol),SYBRGreenI,K,DNA,dNTPs,DNA
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物引物和實(shí)時(shí)熒光引物和及探針
,PCRPHIB1PHIB2,PCRPH-FPH-RTaqMan-MGB
PH-Pr。
32材料
.
瓊脂粉汁雪松松針Cedrusdeodara柑橘葉片Citrus胡蘿卜玉米油
、V8、()、(spp.)、、。
33培養(yǎng)基
.
培養(yǎng)基胡蘿卜絲培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基和卵孢子培養(yǎng)基具體配方參見附
V8、CPA、PARP-V8,
錄
B。
4檢疫鑒定方法
41癥狀檢查
.
重點(diǎn)觀察柑橘果實(shí)是否有褐色病變?nèi)~和小枝是否枯萎杜鵑屬植物
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