LI-6400-40熒光葉室講解

熒光葉室講解姚軍朋基因有限公司農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)部北京力高泰科技有限公司2010年基本原理熒光與光合作用的關(guān)系葉綠素?zé)晒饽茏鍪裁矗?、葉綠素?zé)晒饪梢匝芯恐参锕夂仙頎顩r2、葉綠素?zé)晒馐茄芯恐参锱c逆境脅迫關(guān)系的理想探針3、葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)能夠快速靈敏、無損傷地反映光系統(tǒng)II對光能的吸收、傳遞、耗散、分配等方面的狀況4、光合氣體交換的指標(biāo)反應(yīng)植物光合生理“表觀性”，而葉綠素?zé)晒鈪?shù)更具有反映植物光合機(jī)構(gòu)的“內(nèi)在性”。葉綠體結(jié)構(gòu)之被膜CO2、O2、H2OCO2、O2、H2O外膜內(nèi)膜CO2、O2、H2ORuBPRubiscoNADP+碳同化場所蔗糖（淀粉粒）、磷酸丙糖磷酸丙糖磷酸丙糖類囊體類囊體膜間隙膜間隙基質(zhì)chloroplast葉綠體結(jié)構(gòu)之類囊體一葉綠體基質(zhì)基粒類囊體基質(zhì)類囊體葉綠體被膜encephaloid葉綠體結(jié)構(gòu)之類囊體二光系統(tǒng)II光系統(tǒng)IATP合成酶細(xì)胞色素Cytb6/f堆疊區(qū)非堆疊區(qū)encephaloid光合電子傳遞鏈（Z鏈）遠(yuǎn)紅光3ps250-300ps100-200us秒s，毫秒ms，微秒us，納秒ns，皮秒ps熒光發(fā)射的基本原理PSII反應(yīng)中心基態(tài)三線態(tài)1單線2單線葉綠素分子吸收紅光或藍(lán)光后，其電子被激發(fā)熒光1、光能：使基態(tài)Chl變成激發(fā)態(tài)2、一些電子從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)（S1,S2）3、電子從第一激發(fā)態(tài)落回基態(tài)熱耗散熱耗散開放的反應(yīng)中心和關(guān)閉的反應(yīng)中心“關(guān)閉”RC：當(dāng)反應(yīng)中心的初級醌受體（QA）接受電子，全部處于還原狀態(tài)時，不能再接受電子，我們稱之為關(guān)閉的RC?！伴_放”RC：如果QA的電子傳出，RC的電子可以完全傳遞給QA，則此時RC稱為開放的RC。

葉綠素?zé)晒鈪?shù)測定時間熒光FoFmFm’Fo’Fs暗適應(yīng)光活化后測量光飽和閃光活化光飽和閃光遠(yuǎn)紅光用來計算NPQ計算φPSII和qP熒光參數(shù)LI–6400光合熒光儀測定的參數(shù)直接測定熒光參數(shù)（一）F0：最小初始熒光，又稱基底熒光或暗熒光。指經(jīng)過充分暗適應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)光系統(tǒng)II（PSII）反應(yīng)中心全部開放時的葉綠素（Chl）熒光發(fā)射強(qiáng)度。Fm：最大熒光。指經(jīng)過充分暗適應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)PSII反應(yīng)中心完全關(guān)閉時的Chl熒光發(fā)射強(qiáng)度。LI–6400光合熒光儀測定的參數(shù)直接測定熒光參數(shù)（二）F0`：光下最小熒光。在光適應(yīng)狀態(tài)下PSII反應(yīng)中心完全開放時的Chl熒光發(fā)射強(qiáng)度。為了使照光后所有的PSII反應(yīng)中心迅速達(dá)到最大開放程度，在測定前先用遠(yuǎn)紅光進(jìn)行照射。Fm`：光下最大熒光。在光適應(yīng)狀態(tài)下PSII反應(yīng)中心完全關(guān)閉時的熒光發(fā)射強(qiáng)度。Fs：穩(wěn)態(tài)熒光。又稱Ft。LI–6400光合熒光儀測定的參數(shù)間接計算熒光參數(shù)（一）Fv/Fm：光化學(xué)量子效率，指沒有遭受任何環(huán)境脅迫并經(jīng)過充分暗適應(yīng)葉片，其PSII最大的（潛在）光化學(xué)量子效率。一般植物恒定在0.75~0.85。也被稱為開放的PSII反應(yīng)中心的能量捕獲效率。Fv/Fm=（Fm–F0）/FmFv`/Fm`：光下開放的PSII反應(yīng)中心的激發(fā)能捕獲效率。Fv`/Fm`=（Fm`-F0`）/Fm`Fv`/Fm`LI–6400光合熒光儀測定的參數(shù)間接計算熒光參數(shù)（二）ΦPSII：作用光存在時PSII實(shí)際的光化學(xué)量子效率，即PSII反應(yīng)中心電荷分離實(shí)際量子效率，反映了被用于光化學(xué)途徑激發(fā)能占進(jìn)入PSII總激發(fā)能的比例，植物光合能力的一個重要指標(biāo)。

ΦPSII=（Fm`-Fs）/Fm`ETR：電子傳遞速率。ETR=PPFD×ΦPSII×0.84×0.5LI–6400光合熒光儀測定的參數(shù)間接計算熒光參數(shù)（三）qP：光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了PSII反應(yīng)中心中開放程度，1–qP則反映了反應(yīng)中心關(guān)閉程度，反映了QA的還原程度。

qP=（Fm`-Fs）/（Fm`-F0`）NPQ：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了植物熱耗散的能力的變化,數(shù)值范圍在0~n(1,2,3,4,5……)。

NPQ=（Fm–Fm`）/Fm`=Fm/Fm`-1qN：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。與NPQ相同，現(xiàn)在使用較少。數(shù)值范圍為0~1。qN=(Fm–Fm`)/(Fm–F0`)熒光葉室的安裝使用鑷子取下內(nèi)置光量子傳感器連接線。排氣管和熱偶電極。卸下四個螺絲，六個O形密封圈。更換上下蓋。連接熒光葉室與分析器之間的電源連接線。連接輔助連線。白色密封圈的更換。暗適應(yīng)夾子的使用方法。配置軟件的安裝。軟件介紹標(biāo)記含

義g行Prss_KPa

ParIn_μm%BlueParOutμm%Blue藍(lán)色光化學(xué)光在內(nèi)部ParIn_μm中所占的百分比m行FdF/dt

FlrCV_%FlrEvent

F熒光強(qiáng)度dF/dt熒光強(qiáng)度變化率FlrCV_%熒光強(qiáng)度變異系數(shù)FlrEvent熒光事件n行F0FmFv/FmF0充分暗適應(yīng)條件下的最小熒光Fm充分暗適應(yīng)條件下的最大熒光Fv/Fm充分暗適應(yīng)條件下光化學(xué)量子效率o行Fo1Fm1Fv1/Fm1FsFo1光照下的最小熒光Fm1光照下的最大熒光Fv1/Fm1開放的PSII反應(yīng)中心的激發(fā)能捕獲效率Fs穩(wěn)態(tài)熒光p行PhiPS2ETRqP

qNPhiPS2（ΦPSII）作用光存在時PSII實(shí)際的光化學(xué)量子效率ETR電子傳遞速率qP光化學(xué)猝滅系數(shù)qN非光化學(xué)猝滅系數(shù)新增參數(shù)行介紹功能行F1F2F3F4F58Flr

QuikPik選擇熒光設(shè)置文件FlrEditor編輯熒光設(shè)置DefineActinic定義作用光FlrAdjust設(shè)置熒光RcrdingON/OFF記錄熒光9MeasisON/OFF測量光開/關(guān)Flash飽和閃光DarkPulse暗脈沖Actinic光化學(xué)光開/關(guān)FarRedIsON/OFF遠(yuǎn)紅光開/關(guān)0DoFo測量最小熒光DoFm測量最大熒光DoFoFm測量最小熒光和最大熒光ViewFsh/Drk查看強(qiáng)閃光或暗脈沖0DoFo1測定Fo1DoFs測定FsDoFsFm1測定Fs和Fm1DoFsFm1Fo1測定Fs，F(xiàn)m1和Fo1ViewFsh/Drk查看強(qiáng)閃光或暗脈沖新增功能行介紹基本實(shí)驗(yàn)1、測量F0&Fm。2、測量F0`、Fm`&Fs

。3、測量ΦPSII、qP&qN&NPQ。4、熒光和氣體交換參數(shù)同時測量。熒光測量的基本步驟實(shí)驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)2實(shí)驗(yàn)3實(shí)驗(yàn)1：

植物暗適應(yīng)狀態(tài)的F0、Fm、

Fv/Fm打開一個文件（1，f1），輸入文件名，添加備注。設(shè)置測量光、飽和閃光（8，f2），保存設(shè)置。夾好葉片。等待dF/dt

絕對值<5或FlrCV%<1。記錄數(shù)據(jù)（按0，f1/f2/f3/f4）。查看數(shù)據(jù)（1，f2）。關(guān)閉文件（1，f3）。傳輸文件（同光合操作）。實(shí)驗(yàn)2：

植物光適應(yīng)狀態(tài)的F0`、Fm`、Fs、

Fv`/Fm`打開一個文件（1，f1），輸入文件名，添加備注。設(shè)置測量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光（8，f2），保存設(shè)置。設(shè)置活化光強(qiáng)度（8，f3）。打開活化光（9，f4）夾好葉片。等待dF/dt

絕對值<5或FlrCV%<1。記錄數(shù)據(jù)（按0，f1/f2/f3/f4）。查看數(shù)據(jù)（1，f2）。關(guān)閉文件（1，f3）。傳輸文件（同光合操作）。實(shí)驗(yàn)3：

猝滅研究，測量ΦPSII、qP&qN&NPQ1、打開一個文件（1，f1），輸入文件名，添加備注。2、設(shè)置測量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光（8，f2），保存設(shè)置。3、設(shè)置活化光強(qiáng)度（8，f3）。4、夾好暗適應(yīng)好的葉片。5、等待dF/dt

絕對值<5或FlrCV%<1。記錄數(shù)據(jù)（按0，f1/f2/f3/f4）。6、打開活化光（9，f4），等待植物適應(yīng)光環(huán)境。7、等待dF/dt

絕對值<5或FlrCV%<1。記錄數(shù)據(jù)（按0，f1/f2/f3/f4）。8、查看數(shù)據(jù)（1，f2），關(guān)閉文件（1，f3）。9、傳輸文件（同光合操作）。測量光的設(shè)置（8，f2）Intensity：1/0.8;Modulation:0.25;Filter:1;Gain:10.飽和閃光的設(shè)置（8，f2）Duration:0.8;Intensity:7/8;Blu:Nochange;Modulation:20;Filter:50.遠(yuǎn)紅光的設(shè)置（8，f2）測量光、光化光和遠(yuǎn)紅光的設(shè)置

FlrEditor與FlrAdjust的區(qū)別按8,f2，進(jìn)入FlrEditor（編輯熒光設(shè)置）按8,f4，進(jìn)入FlrAdjust（設(shè)置熒光）區(qū)別和聯(lián)系：第一種，修改完后，執(zhí)行；第二