GB/T 34745-2017豬圓環(huán)病毒2型病毒SYBR Green Ⅰ實(shí)時熒光定量PCR檢測方法

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T34745—2017

豬圓環(huán)病毒2型病毒SYBRGreenⅠ實(shí)時

熒光定量PCR檢測方法

Porcinecircovirustype2—MethodofdetectingvirusbySYBR

GreenⅠreal-timePCR

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T34745—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位河南農(nóng)業(yè)大學(xué)中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人魏戰(zhàn)勇鄭蘭蘭邵衛(wèi)星胡慧陳紅英王亞賓王學(xué)兵崔保安寇亞楠

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34745—2017

豬圓環(huán)病毒2型病毒SYBRGreenⅠ實(shí)時

熒光定量PCR檢測方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了實(shí)時熒光定量檢測豬圓環(huán)病毒型的技術(shù)要求

SYBRGreenⅠPCR2。

本標(biāo)準(zhǔn)用于檢測豬圓環(huán)病毒型核酸適用于臨床樣品中豬圓環(huán)病毒型的快速檢測

2,2。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

值循環(huán)閾值

Ct:(CycleThreshold)

脫氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

乙二胺四乙酸

EDTA:(EthylenediaminetetraaceticAcid)

磷酸鹽緩沖溶液

PBS:(PhosphateBufferSaline)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:(PolymeraseChainReaction)

豬圓環(huán)病毒型

PCV2:2(PorcineCircovirusType2)

仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征

PMWS:(PostweaningMultisystemicWastingSyndrome)

酶聚合酶

Taq:TaqDNA(TaqDNAPolymerase)

t值解鏈溫度

m:(MeltingTemperature)

4試劑

除非另有規(guī)定僅使用分析純試劑所有試劑均用無酶污染的容器用水處理后高壓

,。RNA(DEPC

滅菌分裝

)。

41蛋白酶配制見附錄保存

.K(A):-20℃。

42裂解緩沖液配制見附錄保存

.(A):4℃。

43異硫氰酸胍裂解液配制見附錄保存

.(A):4℃。

44平衡酚配制見附錄保存

.(A):4℃。

45酚氯仿異戊醇混合液配制見附錄保存

.--(25∶24∶1)(A):4℃。

46氯仿異戊醇配制見附錄保存

.-(24∶1)(A):4℃。

47氯仿常溫保存

.:。

48異丙醇常溫保存

.:。

49乙醇用新開啟的無水乙醇和滅菌去離子水配制符合