GB/T 35912-2018豬繁殖與呼吸綜合征病毒熒光RT-PCR檢測(cè)方法

ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T35912—2018

豬繁殖與呼吸綜合征病毒

熒光RT-PCR檢測(cè)方法

Real-timeRT-PCRmethodfordetectionofporcinereproductive

andrespiratorysyndromevirus

2018-02-06發(fā)布2018-09-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T35912—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國(guó)上海出入境檢驗(yàn)檢疫局中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所中華

:、、

人民共和國(guó)深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局湖南圣湘生物科技有限公司中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人張強(qiáng)李健熊煒童光志趙和平李樹(shù)清花群義楊忠蘋(píng)李國(guó)新王巧全

:、、、、、、、、、、

王艷林穎崢蔡開(kāi)妹喻正軍林祥梅吳紹強(qiáng)

、、、、、。

Ⅰ

GB/T35912—2018

豬繁殖與呼吸綜合征病毒

熒光RT-PCR檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬繁殖與呼吸綜合征病毒熒光檢測(cè)的操作方法

RT-PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬繁殖與呼吸道綜合征病毒美洲型毒株核酸檢測(cè)

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

豬常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)范

GB/T25172

3縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

Real-timeRT-PCR:(real-timereversetranscriptpolymerasechainre-

action)

Ct值每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)量達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

:(cyclethreshold)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNApolymerase)

緩沖液緩沖液

TE:Tris-EDTA(Tris-EDTAbuffer)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethylpyrocarbonate)

豬繁殖與呼吸綜合征病毒

PRRSV:(porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(phosphatebufferedsolution)

4儀器

41熒光檢測(cè)儀

.PCR。

42高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)可控溫至離心速度可達(dá)以上

.:4℃、12000r/min。

43組織研磨器或者研缽

.。

44普通冰箱

.:2℃~8℃。

45超低溫冰箱可控溫至以下

.:-70℃。

46微量移液器并

.:0.2μL~2μL、1μL~10μL、