GB/T 36845-2018柑橘頑固病螺原體檢疫鑒定方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T36845—2018

柑橘頑固病螺原體檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofSpiroplasmacitriSaglioetal

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T36845—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位中華人民共和國(guó)南海出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)廣東出入境檢驗(yàn)檢

:、

疫局中華人民共和國(guó)山東出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)煙臺(tái)出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和

、、、

國(guó)湖南出入境檢驗(yàn)檢疫局

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人談珺李凱兵劉海軍張京宣李金慶周慧平劉曉紅李賀

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T36845—2018

柑橘頑固病螺原體檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)境植物檢疫中柑橘頑固病螺原體Spiroplasmacitri的檢疫鑒定方法

Saglioetal。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出境中的葡萄柚檸檬橘子橙和酸性橙等柑橘屬植物種果苗木及昆蟲(chóng)介體等柑

、、、,

橘頑固病螺原體的檢疫鑒定

。

2基本信息

中文名柑橘頑固病螺原體

:

學(xué)名Spiroplasmacitri

:Saglioetal

英文名

:Critusstubborndisease,Littleleafdiseaseofcitrus,Stubborndiseaseofcitrus

英文縮寫

:CSD

分類地位屬植物支原體類病原細(xì)菌域柔壁菌門柔膜菌綱蟲(chóng)

:,(Bacteria),(Tenericutes),(Mollicutes),

原體目螺原體科螺原體屬Spiroplasma

(Entomoplasmatales),(Spiroplasmataceae),()。

柑橘頑固病螺原體的其他信息參見(jiàn)附錄

A。

3方法原理

根據(jù)柑橘頑固病螺原體的生物學(xué)特性特異性引物擴(kuò)增及序列測(cè)定結(jié)果熒光定量檢測(cè)

、PCR,PCR

結(jié)果確定病原物種類

。

4儀器設(shè)備和主要試劑

41主要儀器設(shè)備

.

普通儀熒光儀超凈工作臺(tái)滅菌鍋制冰機(jī)核酸蛋白分析儀高速冷凍離心機(jī)臺(tái)式

PCR、PCR、、、、、、

小型離心機(jī)超低溫冰箱常規(guī)冰箱旋渦震蕩器微量進(jìn)樣器電泳儀凝膠成像系統(tǒng)顯微鏡

、、、、、、、。

42主要試劑和培養(yǎng)基

.

除另有規(guī)定外所有試劑均為分析純緩沖液GoTaq

,。PCR、dNTPs(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)、

聚合酶引物和探針

DNA、。

檢驗(yàn)中用到的培養(yǎng)基配制方法見(jiàn)附錄

LD8D。

5檢測(cè)鑒定方法

51癥狀觀察

.

仔細(xì)觀察