復方金錢草顆粒的二次開發(fā)研究進展-

復方金錢草顆粒的二次開發(fā)研究進展*邱宏聰，劉布鳴**，張華，馬軍花，吳文華

(1.廣西中醫(yī)藥研究院，廣西南寧530022；2.廣西中藥質(zhì)量標準研究重點實驗室，廣西南寧530022；3.廣西萬通制藥有限責任公司，廣西南寧530003)

泌尿系統(tǒng)結石是一種常見的泌尿系統(tǒng)疾病，是晶體物質(zhì)在膀胱與腎內(nèi)形成并下移所導致的病癥，在泌尿系統(tǒng)疾病中發(fā)病率高居第三位，以30-50歲群體為高發(fā)人群，再發(fā)率可達50%[1]。尿路感染也是一種常見的感染性疾病，是病原體在尿路中生長繁殖，并侵犯泌尿道黏膜或組織而引起的炎癥，感染主要發(fā)生于膀胱、尿道中[2]。泌尿系統(tǒng)結石和尿路感染是日常生活中多發(fā)的疾病，藥品需求量巨大。中草藥及其制劑在促進結石排泄方面歷史悠久，對直徑不超過1cm的結石可獲得73%-98%的排石總有效率[3]。中草藥植物活性成分通過協(xié)同作用，可能會提高對尿路感染的治療效果，降低病原菌的耐藥性[2]。

復方金錢草顆粒是全國獨家生產(chǎn)的用于治療泌尿系統(tǒng)疾病的純中成藥制劑，獲國家授權發(fā)明多件，收入《中成藥臨床應用指南——外科疾病分冊》[4]，為國家醫(yī)保2022年藥品目錄品種，列為尿石癥濕熱蘊結證首選用藥，藥品標準收載于《中華人民共和國藥典(一部)》[5]，具有清熱利濕、通淋排石的功效，用于濕熱下注所致的熱淋、石淋，癥見尿頻、尿急、尿痛、腰痛；泌尿系統(tǒng)結石、尿路感染見上述證候者。處方由廣金錢草、車前草、光石韋、玉米須組成，其中廣金錢草、車前草、光石韋為廣西壯藥材[6,7]，產(chǎn)品具有明顯的廣西優(yōu)勢和特色?，F(xiàn)代研究表明，復方金錢草顆粒在排石、利尿、解痙和抗炎等方面具有較好的療效。項目組通過產(chǎn)學研聯(lián)合攻關，開展優(yōu)勢特色品種的二次開發(fā)，進行復方金錢草顆粒的質(zhì)量標準與產(chǎn)業(yè)化提升，培育廣西大品種，完成了產(chǎn)品的質(zhì)量控制研究與技術升級改造，建立了完整的生產(chǎn)質(zhì)量控制體系，藥品標準于2022年首次收入《中華人民共和國藥典(2022年版第二增補本)》[8]，之后先后載入各版中國藥典。本文綜述了復方金錢草顆粒的主要成分、質(zhì)量控制方法、作用機制及臨床療效等情況，為中成藥的深入開發(fā)及臨床推廣應用提供參考。

1復方金錢草顆粒處方及工藝

復方金錢草顆粒處方來源于廣西壯族民間驗方，1979年開始挖掘整理與研制，1982年獲批并正式投放市場。品種原標準收載于中華人民共和國衛(wèi)生部頒布的標準《中藥成方制劑》第十八冊(標準編號：WS3-B-3445-98)[9]，項目組在原產(chǎn)品處方、工藝的基礎上，按照中醫(yī)藥與壯醫(yī)藥理論，結合處方來源及壯族地區(qū)民間的用藥習慣，進一步明確了復方金錢草顆粒治療泌尿系統(tǒng)疾病的最優(yōu)處方為廣金錢草、車前草、光石韋、玉米須。組方藥物均為廣西道地藥材，為壯族民間長期使用。中醫(yī)：處方中廣金錢草味甘性涼，具有清熱祛濕、利尿通淋、消腫排石的功效，為君藥；車前草清熱解毒、利水通淋；光石韋利水通淋、涼血止血；玉米須淡滲利濕、利水消腫，三藥合則清熱通淋，皆為臣藥，諸藥合用，共奏清熱利濕、通淋排石之功。壯醫(yī)：本方是治療肉扭(淋證)的專用藥劑，肉扭(淋證)多為機體水道感染熱毒、濕毒而成；方中廣金錢草(壯語名稱：曠金淺)味甜、淡，性寒，長于清熱毒、除濕毒、利水道，是為主藥；車前草(壯語名稱：牙底馬)、光石韋(壯語名稱：棵盟泯)、玉米須等藥均為性寒通利水道之品，可增強主藥通利水道的功效，共為幫藥，諸藥合用，濕毒、熱毒全消，水道通暢，尿痛、尿血諸證遂除。原產(chǎn)品處方中石韋藥材為多基源，為了保證產(chǎn)品質(zhì)量，項目組明確采用廣西特色藥材光石韋，保障了藥材來源的唯一性，從源頭控制產(chǎn)品品質(zhì)，并使產(chǎn)品更具“民族性、傳統(tǒng)性、地域性”的壯藥特色。

項目組優(yōu)化了復方金錢草顆粒生產(chǎn)工藝，以制劑中主要原料的有效化學成分為跟蹤指標，建立從收購藥材、提取清膏到成品中有效成分的含量測定標準，從而實現(xiàn)對該產(chǎn)品生產(chǎn)全過程定量控制的目的。經(jīng)過不斷優(yōu)化，《中華人民共和國藥典(一部)》[5]收載的制法明確為廣金錢草、車前草、玉米須加水煎煮2次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.16-1.22(70℃)的清膏；光石韋加水煎煮2次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.16-1.22(70℃)的清膏，放冷，加1.5倍量體積乙醇，攪勻，靜置24h，取上清液，回收乙醇，濃縮至適量，與上述清膏混勻，加蔗糖約975g，制成顆粒，干燥，制成1000g；或與上述清膏混勻，繼續(xù)濃縮至適量，加入糊精、乳糖各約137g及甜菊素適量，制成顆粒，干燥，制成300g，即得。

2復方金錢草顆粒的藥材標準與主要成分及活性

復方金錢草顆粒處方中廣金錢草、車前草、光石韋、玉米須4味藥材均有明確的收載標準，從源頭保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

廣金錢草收載于《中華人民共和國藥典(一部)》[5]，為豆科植物廣金錢草Desmodiumstyracifolium(Osb.)Merr.的干燥地上部分，用于黃疸尿赤、熱淋、石淋、小便澀痛、水腫尿少。現(xiàn)代研究表明其主要化學成分為黃酮類、生物堿、酚類、多糖、揮發(fā)油類等，其中夏佛塔苷、異夏佛塔苷和異牡荊素等黃酮類物質(zhì)為主要活性成分[10-12]，具有利膽利尿、抗結石、抗炎以及抗氧化等藥理作用[13-15]。

車前草收載于《中華人民共和國藥典(一部)》[5]，為車前科植物車前PlantagoasiaticaL.或平車前PlantagodepressaWilld.的干燥全草，用于熱淋澀痛、水腫尿少、暑濕泄瀉、痰熱咳嗽、吐血衄血、癰腫瘡毒?，F(xiàn)代研究表明其主要化學成分為黃酮類、多糖類、環(huán)烯醚萜類、三萜皂苷類、揮發(fā)油等，其中車前子苷、車前苷和木犀草素等黃酮類物質(zhì)為主要活性成分[16-18]，具有利尿、抗菌、抗氧化等藥理作用[19-21]。

光石韋收載于《廣西壯族自治區(qū)壯藥質(zhì)量標準(第二卷)》[7]，為水龍骨科植物光石韋Pyrrosiacalvata(Bak.)Ching的干燥葉，用于熱淋、血淋、石淋、小便不通、淋瀝澀痛、吐血、衄血、尿血、崩漏、肺熱咳喘?，F(xiàn)代研究表明其主要化學成分為三萜、甾體、脂肪酸和黃酮類化合物等，其中芒果苷、異芒果苷、齊墩果酸為主要活性成分[22-24]，具有抗菌、抗凝血、止咳等藥理作用[25,26]。

玉米須收載于《廣東省中藥材標準(第三冊)》[27]，為禾本科植物玉蜀黍ZeamaysL.的干燥花柱，用于腎性水腫、小便不利、濕熱黃痘、高血壓癥、糖尿病。現(xiàn)代研究表明其主要化學成分為多糖、黃酮類、有機酸、生物堿等，其中玉米須多糖、木犀草素、芹菜素為主要活性成分[28,29]，具有護腎利尿、抗菌、抗氧化等藥理作用[30-32]。

3復方金錢草顆粒的質(zhì)量控制方法

復方金錢草顆粒為獨家品種，原標準技術水平偏低且無含量測定，為完善質(zhì)量控制體系，提升中藥的質(zhì)量控制水平，確保均一和穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量和療效，項目組開展有效成分、指標性成分和含量測定方法研究。

復方金錢草顆粒的鑒別以是否含有特定的有效成分為依據(jù)，質(zhì)量控制以有效成分是否達到中國藥典規(guī)定含量為準則。馬軍花等[33]采用薄層色譜法(TLC)進行定性鑒別，采用高效液相色譜法(HPLC)進行定量測定，建立復方金錢草顆粒的質(zhì)量控制方法，為制劑規(guī)范化生產(chǎn)、質(zhì)量評價提供依據(jù)。

復方金錢草顆粒的主要化學成分為黃酮類化合物。鹽酸鎂粉反應是檢查中藥中是否有黃酮類化合物的常用方法之一，該法靈敏、簡便，可用于定性鑒別?！吨腥A人民共和國藥典(一部)》[5]中還收載了廣金錢草對照藥材和芒果苷對照品的薄層鑒別方法，用于方中廣金錢草、光石韋2味藥材的鑒別。此外，廣金錢草中的夏佛塔苷、車前草中的大車前苷，以及玉米須對照藥材的TLC鑒別方法，均已收載在相關藥材標準中，是否能夠作為復方金錢草顆粒的鑒別方法，可開展實驗進一步探索。

芒果苷是光石韋的主要活性成分之一，具有抗炎和抗菌作用，并常用作含量測定的指標物質(zhì)，李文琪等[34]建立了光石韋定性定量分析方法，采用HPLC測定16批光石韋樣品中芒果苷(C19H18O11)的含量，其最高可達7.32%。采用芒果苷作為制劑的含量測定指標，保證了原料與產(chǎn)品的一致性控制，《中華人民共和國藥典(一部)》[5]規(guī)定，復方金錢草顆粒含量測定采用高效液相色譜法，每袋含光石韋以芒果苷(C19H18O11)計，不得少于1.2mg。經(jīng)查閱相關文獻，芹菜素、木犀草素、大豆皂苷Ⅰ、夏佛塔苷、大車前苷等處方中藥材的主要活性成分也可作為該藥的質(zhì)量控制指標。邱宏聰?shù)萚35]采用HPLC梯度洗脫，以芒果苷為參照峰，夏佛塔苷為已知成分，建立復方金錢草顆粒指紋圖譜，10批制劑的HPLC指紋圖譜相似度為0.961-0.997，標示出20個共有色譜峰，其中19個歸屬到各處方藥材，該方法可作為制劑質(zhì)量評價的方法，特征圖譜的構建大大提升了產(chǎn)品質(zhì)量控制水平。潘鵬超等[36]采用超高壓液相-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用方法(UPLC-TOF/MS)同時測定芹菜素、木犀草素、大豆皂苷Ⅰ含量，其精密度、重復性和穩(wěn)定性良好，3個成分的平均回收率分別為99.58%、101.07%、100.58%，同時選取方中藥材所含的14個指標性有效成分的峰面積之和為評價指標，優(yōu)化了提取工藝參數(shù)，可用于復方金錢草顆粒代表性成分的提取以及后續(xù)的藥學研究。

4復方金錢草顆粒的作用機制

復方金錢草顆粒具有良好的抗結石、利尿、抗炎和抗菌作用，可通過多靶點、多途徑防治尿路結石，具有良好的防治作用。鄧芳等[37]研究發(fā)現(xiàn)復方金錢草顆?？稍黾硬菟徕}亞穩(wěn)溶液中的可溶性鈣離子濃度,使一水草酸鈣晶體生長抑制指數(shù)增大,表明復方金錢草顆?？蓽p少草酸鈣沉積。周軍等[38]研究發(fā)現(xiàn)復方金錢草顆粒能夠抑制大鼠的成石率，提高腎結石大鼠腎臟系數(shù)，降低腎鈣含量、血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平；能增加大鼠的水負荷尿量，稀釋尿液中草酸離子等負離子和鈣離子濃度，降低結石發(fā)生的概率；能減輕由乙酰膽堿(Ach)引起的兔離體輸尿管痙攣，有利于管道通暢和緩解痙攣性疼痛，同時加上強烈的利尿作用，可促使結石隨尿液排出；同時還具有抗炎作用，避免損傷因子直接或間接破壞組織和細胞。溫幼敏等[39]研究發(fā)現(xiàn)復方金錢草顆?？娠@著提高大鼠的膽汁流量和膽汁中膽紅素濃度；可顯著抑制由乙酰膽堿引起的豚鼠膽囊痙攣，表明其具有利膽作用，可緩解乙酰膽堿引起的膽囊痙攣。趙慧[40]研究發(fā)現(xiàn)復方金錢草顆粒作用于單側(cè)輸尿管梗阻模型(UUO)大鼠后，可顯著抑制轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)和Ⅲ型膠原水平的表達；可顯著抑制大鼠血清中血肌酐、血尿酸水平，表明其在改善UUO大鼠中腎組織纖維化及改善腎功能有一定作用。吳超偉等[41]研究發(fā)現(xiàn)復方金錢草顆粒在體外對具有代表性的革蘭氏陽性菌和陰性菌都有顯著的抗菌作用，且大劑量服用比較安全。

5復方金錢草顆粒的臨床療效

復方金錢草顆粒作為國家醫(yī)保藥品目錄品種，臨床廣泛用于治療泌尿系統(tǒng)結石和尿路感染，還可鞏固西藥和手術的治療效果，療效顯著且無明顯不良反應。

5.1治療泌尿系統(tǒng)結石

陳麗霞等[42]采用復方金錢草顆粒治療尿石癥，有效率為76.92%。李運秀等[43]定量定時沖服復方金錢草顆粒劑治療輸尿管結石，6d總治愈率為73.2%。甘星等[44]采用復方金錢草顆粒輔助左氧氟沙星、山莨菪堿治療急性輸尿管結石，總體療效有效率為90.74%，結石完全排出率為72.22%，腎絞痛復發(fā)率降為9.26%，視覺模擬評分(VAS)低至3.85分，住院時間、臨床癥狀消失時間、實驗室檢查恢復正常時間明顯縮短。吳敦鋒[45]在常規(guī)西醫(yī)治療和防止感染的基礎上，使用復方金錢草顆粒治療腎結石，利尿水平顯著提高，平均尿量恢復至1600mL；腎絞痛發(fā)生率降低至15.38%，VAS評分低至2.64分，平滑肌收縮恢復率高達94.23%，證明其對腎結石患者利尿解痙抗炎作用顯著。李政[46]采用復方金錢草顆粒結合西醫(yī)治療泌尿系統(tǒng)結石，總體療效有效率為86%，證明其對利尿、排石、減輕腎積水、緩解尿路梗阻有明顯療效。焦偉等[47]采用贇式排石療法聯(lián)合復方金錢草顆粒藥物治療輸尿管結石，排石效率(82.5%)較單用排石藥物明顯提高，適用于泌尿系統(tǒng)結石保守治療的輔助治療。

5.2術后結石防治

汪靜娜[48]采用復方金錢草顆粒防治留置雙J管患者結石的形成，結果發(fā)現(xiàn)結石形成率降低至11.11%(對照組38.78%)，并發(fā)癥發(fā)生率降低至31.31%(對照組45.92%)。曾筱江[49]采用鹽酸坦洛新緩釋片聯(lián)合復方金錢草顆粒對輸尿管雙J管留置術進行觀察，結果發(fā)現(xiàn)患者的尿急癥狀、國際前列腺癥狀(IPSS)、膀胱過度活動癥癥狀(OABSS)評分均顯著低于單獨治療組，術后并發(fā)癥發(fā)生率降低至30.0%，顯著低于單獨治療組(45.0%)。黃霆等[50]采用甲磺酸多沙唑嗪控釋片聯(lián)合復方金錢草顆粒治療女性患者雙J支架管相關癥狀，結果顯示可明顯緩解尿急、尿頻、夜尿增多等排尿癥狀及身體疼痛癥狀，可減少尿鹽和繼發(fā)結石形成。宋旻等[51]采用體外沖擊波碎石術后給予患者復方金錢草顆粒內(nèi)服，總體療效有效率為91.86%，提示復方金錢草顆粒可預防碎石后尿路感染，緩解排石過程中疼痛發(fā)作，加強輸尿管蠕動促排石。何麗萍[52]采用復方金錢草顆粒促進輸尿管鏡下鈥激光碎石術后患者結石的排出，結果一次性結石排凈率達100%，術后感染、腎絞痛等并發(fā)癥發(fā)生率為1.15%，平均住院時間明顯縮短。諶珩[53]采用體外沖擊波碎石術聯(lián)合復方金錢草顆粒治療泌尿結石，總體療效有效率為91.67%，同時減少了碎石次數(shù)，縮短了結石排出時間。陳昆等[54]采用復方金錢草顆粒治療體外沖擊波碎石術后輸尿管結石，總體療效有效率為92.00%，碎石次數(shù)、結石排出時間均明顯小于對照組，術后發(fā)生腎絞痛1例，不良反應發(fā)生率為2%(對照組14%)。李金貴等[55]采用復方金錢草顆粒聯(lián)合枸櫞酸氫鉀鈉顆粒治療上尿路結石患者體外沖擊波碎石術后殘留結石，治療臨床總有效率為86.7%，結石首次排出時間、結石排凈時間、腎絞痛發(fā)生率均顯著降低，VAS評分為2.43分，治療12個月后的總復發(fā)率為3.33%，聯(lián)合用藥可增強治療效果，有效促進結石排出，減輕疼痛，降低術后結石復發(fā)率。

5.3治療尿路感染

薛萍[56]通過觀察復方金錢草顆粒治療146例兒童泌尿道感染疾病的療效，得出復方金錢草顆粒是治療小兒泌尿道感染安全、有效的純中藥制劑的結論，治愈率為82.2%，膀胱及尿道刺激癥狀平均消失天數(shù)為5d，明顯優(yōu)于三金膠囊對照組(120例，治愈率69.2%，膀胱及尿道刺激癥狀平均消失天數(shù)為7d)，且無一例出現(xiàn)過敏反應和毒副作用。宋萬雄[57]研究復方金錢草顆粒治療急性下尿路感染的臨床療效，并與對照組常規(guī)抗生素阿莫西林膠囊治療相比，結果發(fā)現(xiàn)復方金錢草顆粒觀察組患者治療總有效率為95.55%，明顯高于對照組(總有效率為71.11%)，因此認為與常規(guī)抗生素治療相比，復方金錢草顆粒治療急性下尿路感染臨床效果更佳，值得推廣使用。

6結語

復方金錢草顆粒為廣西萬通制藥有限公司原創(chuàng)產(chǎn)品，療效顯著。項目組多年來開展聯(lián)合攻關，對其進行二次