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文檔簡介
實(shí)驗(yàn)五血型鑒定與配血實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)對象與器材實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)鑒別血型的方法觀察紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象,掌握ABO血型和Rh血型鑒定的原理熟悉交叉配血的方法和輸血的一般原則二、實(shí)驗(yàn)原理
在紅細(xì)胞膜的外表面上存在某些特異性的抗原(凝集原),而在血清中存在特異性的抗體(凝集素)。血清中的抗體可與紅細(xì)胞膜上的相應(yīng)抗原結(jié)合,產(chǎn)生凝集反應(yīng),最后發(fā)生紅細(xì)胞溶解。由于這種現(xiàn)象,臨床上據(jù)此進(jìn)行血型鑒定。在血型系統(tǒng)中最重要的是ABO血型系統(tǒng),其次是Rh系統(tǒng)。血型鑒定二、實(shí)驗(yàn)原理血型紅細(xì)胞抗原(凝集原)血清中抗體(凝集素)AA抗BBB抗AABAB無抗A或抗BO無A和B抗A和抗B紅細(xì)胞抗原的ABO系統(tǒng)ABO血型鑒定
二、實(shí)驗(yàn)原理Rh血型鑒定
目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的Rh因子有8種,其中C、D、E因子是普遍存在的。在Rh因子中,D因子的抗原性最強(qiáng),因此通常將紅細(xì)胞膜上含有D抗原的,稱為Rh陽性;反之則為Rh陰性。
實(shí)驗(yàn)中常用抗D標(biāo)準(zhǔn)血清與待測者的紅細(xì)胞相混合,發(fā)生凝集反應(yīng)的即為Rh陽性,不發(fā)生凝集反應(yīng)的為Rh陰性二、實(shí)驗(yàn)原理交叉配血試驗(yàn)
血型紅細(xì)胞抗原(凝集原)血清中抗體(凝集素)AA抗BBB抗AABAB無抗A或抗BO無A和B抗A和抗B
O型紅細(xì)胞膜上不含A和B兩種抗原,所以不會(huì)被受血者血漿中的抗體所凝集,因而理論上,O型血的人可以成為所有血型人的供血者。然而實(shí)際上這種輸血方法并不科學(xué),因?yàn)镺型血的血清中含有抗A和抗B抗體,它們能和受血者的紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)。二、實(shí)驗(yàn)原理交叉配血試驗(yàn)
供血者受血者紅細(xì)胞紅細(xì)胞血清
血清三、實(shí)驗(yàn)的對象與器材實(shí)驗(yàn)對象
正常人實(shí)驗(yàn)器材顯微鏡雙凹玻片/三凹玻片(載玻片、白瓷磚片)一次性采血針消毒牙簽記號筆滴管75%酒精棉球、干棉球抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清四、實(shí)驗(yàn)步驟1、ABO血型鑒定
ABO血型鑒定是將受試者紅細(xì)胞分別加入抗A(含足量的抗A抗體)、抗B(含足量的抗B抗體)標(biāo)準(zhǔn)血清中,然后觀察是否出現(xiàn)凝集反應(yīng)。四、實(shí)驗(yàn)步驟在雙凹玻片上左、右兩個(gè)凹陷處用記號筆依次標(biāo)上A、B字樣。從兩種標(biāo)準(zhǔn)血清試劑瓶中分別擠出抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清各一滴,分別滴在雙凹玻片注有A、B字樣的相對應(yīng)的凹陷處。
1、ABO血型鑒定四、實(shí)驗(yàn)步驟制備5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液取試管1支,加生理鹽水1ml。常規(guī)消毒,穿刺采血部位(手指或耳垂),向試管中加入受檢者血液1~2滴,輕輕混合均勻即可。在雙凹玻片的A、B兩處分別加入5%紅細(xì)胞懸液1滴,慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)雙凹玻片,也可用牙簽攪拌(牙簽不可混用),使抗血清和紅細(xì)胞懸液充分混合。在室溫下靜止10~15分鐘,觀察凝集結(jié)果。
四、實(shí)驗(yàn)步驟同上法制備5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液取小試管1支,滴加抗D標(biāo)準(zhǔn)血清及受檢者5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液各1滴,混勻,置37℃水浴1h后,手持試管傾斜轉(zhuǎn)動(dòng)以觀察凝集結(jié)果。凝集者為Rh陽性,不凝集者為Rh陰性。制備供血者、受血者5%紅細(xì)胞懸液和血清。在玻片兩側(cè)分別注上“主”、“次”字樣。在主側(cè)分別滴加受血者血清和供血者紅細(xì)胞懸液各一滴,于次側(cè)分別滴加受血者的紅細(xì)胞懸液及供血者的血清各一滴,混勻。靜置15分鐘,觀察凝集現(xiàn)象2、Rh血型鑒定3、交叉配血試驗(yàn)五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果預(yù)測ABO血型的鑒定抗B標(biāo)準(zhǔn)血清抗A標(biāo)準(zhǔn)血清O型A型B型AB型右側(cè)圖示顯示受檢者的血液與抗A、B標(biāo)準(zhǔn)血清混合后呈現(xiàn)的凝集現(xiàn)象六、注意事項(xiàng)指尖或耳垂、采血針、牙簽和滴管務(wù)必做好消毒準(zhǔn)備。做到一人一套,不能混用。使用過的物品(包括牙簽)均應(yīng)放入污物桶,不得再次重復(fù)使用。經(jīng)過消毒的部位宜自然風(fēng)干后再采血,這樣血液容易聚集成滴,便于取血。取血不宜過少,以免影響觀察。采血后要迅速與生理鹽水混勻,以防血液凝固。七、本次實(shí)驗(yàn)報(bào)告的內(nèi)容按照如下格式匯報(bào)受檢者血型姓名性別凝集反應(yīng)現(xiàn)象血型診斷受檢者血液與標(biāo)準(zhǔn)血清發(fā)生了凝集反應(yīng)回答下列問題ABO血型分類標(biāo)準(zhǔn)是什么?除了ABO血型外還有什么血型系統(tǒng)?分類標(biāo)準(zhǔn)是什么?七、本次實(shí)驗(yàn)報(bào)告的內(nèi)容回答下列問題根據(jù)自己的血型,說明你能接受何種血型的血液和如何輸血給何種血型的人,為什么?無標(biāo)準(zhǔn)血清時(shí),用已知A型或B型人的血能進(jìn)行血型的粗略分析嗎?為什么?對有反復(fù)輸血史或同時(shí)輸入多名獻(xiàn)血員的血液的受血者,應(yīng)該注意什么問題?實(shí)驗(yàn)五血型鑒定與配血實(shí)驗(yàn)補(bǔ)充內(nèi)容Rh陰性的特殊性
Rh陰性個(gè)體的血漿中不存在天然的抗Rh因子
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