市公開(kāi)課動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體彭金剛第5稿

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廣州市鐵一中學(xué)！熒光標(biāo)志的小鼠細(xì)胞和人細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)示意圖2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體選修3專(zhuān)題2細(xì)胞工程執(zhí)教廣州市鐵一中學(xué)彭金剛1.1概念

動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交。是指_________動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱(chēng)為_(kāi)_______。一、動(dòng)物細(xì)胞融合兩個(gè)或多個(gè)雜交細(xì)胞1.3融合過(guò)程融合的原理？滅活的含義？?jī)蓛扇诤虾罂僧a(chǎn)生幾種雜交細(xì)胞？1.2融合手段________(PEG)、________、電激等聚乙二醇滅活的病毒突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。

其中最有價(jià)值的應(yīng)用是制備單克隆抗體。1.4

意義與應(yīng)用《藍(lán)貓單克隆抗體及生物導(dǎo)彈》

思考：制備單克隆抗體運(yùn)用了什么技術(shù)？單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)？抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生的？獲得抗體的傳統(tǒng)方法是什么？有何缺陷？二、單克隆抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差問(wèn)題2問(wèn)題1抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生的？獲得抗體的傳統(tǒng)方法是什么？有何缺陷？二、單克隆抗體如何才能讓B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生單一大量抗體？產(chǎn)量低、純度低、特異性差→細(xì)胞群?jiǎn)栴}2問(wèn)題3問(wèn)題1單克隆抗體一個(gè)B淋巴細(xì)胞

克隆→抗體什么細(xì)胞可以無(wú)限增殖？如何才能將兩種細(xì)胞的特點(diǎn)結(jié)合起來(lái)？1975年，米爾斯坦和柯勒1984年，諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。問(wèn)題4問(wèn)題5骨髓瘤細(xì)胞模擬單克隆抗體的制備過(guò)程每4人一組利用細(xì)胞模型，完成模擬制備流程。小組探究活動(dòng)B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞分泌抗紅細(xì)胞抗體的B淋巴細(xì)胞分泌抗紅細(xì)胞抗體的雜交瘤細(xì)胞其他雜交瘤細(xì)胞注射羊紅細(xì)胞為什么注射羊紅細(xì)胞？獲到的B淋巴細(xì)胞有哪些類(lèi)型？細(xì)胞兩兩融合后，產(chǎn)生幾種融合細(xì)胞？如何把雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái)？雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？如何選出分泌抗紅細(xì)胞抗體的細(xì)胞群？如何得到大量單克隆抗體？（第二次篩選）如何得到大量雜交瘤細(xì)胞？（第一次篩選）二、單克隆抗體的應(yīng)用歡迎兩位學(xué)生為我們分享單克隆抗體的應(yīng)用！單克隆抗體有何特點(diǎn)？特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備。（傳統(tǒng)抗體）特異性差、純度低、產(chǎn)量低。課堂小結(jié)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B_____細(xì)胞

細(xì)胞___________法誘導(dǎo)

雜種培養(yǎng)物理化學(xué)生物植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合理論基礎(chǔ)相同細(xì)胞膜的流動(dòng)性不同植物細(xì)胞的______性細(xì)胞的_______誘導(dǎo)手段相同物理法(離心振動(dòng)電激等)化學(xué)法(_______)不同生物法(_________)處理方法不同用纖維素酶

和_______去除細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或_________處理使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合結(jié)果不同雜種細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)后獲得_________培養(yǎng)雜交細(xì)胞，生產(chǎn)_________相同改變_________，產(chǎn)生新性狀

動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較全能增殖聚乙二醇PEG滅活的病毒果膠酶膠原蛋白酶細(xì)胞產(chǎn)品雜種植物遺傳物質(zhì)課堂小結(jié)二單克隆抗體已免疫的B淋巴細(xì)胞

______細(xì)胞B-B細(xì)胞融合_____細(xì)胞_____細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞______克隆化培養(yǎng)和_______分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞________或_________大量單克隆抗體