第五章 轉(zhuǎn)錄(下)(轉(zhuǎn)錄后加工,剪接,編輯)

第四節(jié)

RNA的剪接PrimarytranscriptRNA的剪接生物體內(nèi)內(nèi)含子的主要類型：

1.核基因mRNA的內(nèi)含子

2,Ⅰ類內(nèi)含子

3.Ⅱ類內(nèi)含子剪接方式：1.剪接體完成的剪接2.自我剪接3.由蛋白酶完成的剪接

一、核基因mRNA的剪接1.參與RNA剪接的物質(zhì)：

snRNA（核內(nèi)小分子RNA）snRNP（與snRNA結(jié)合的核蛋白）hnRNA和snRNA核內(nèi)的初級mRNA稱為雜化核RNA

（hetero-nuclearRNA,hnRNA)

snRNA

(smallnuclearRNA)（并接體）核內(nèi)的蛋白質(zhì)核糖核酸蛋白體snRNA2、識(shí)別信號：GU……..AG100%保守分支點(diǎn)A3、過程——除去hnRNA中的內(nèi)含子，將外顯子連接并接體UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U2UACUACA-AGUGU6E1E2U1、U4、U51.A的3’-OH攻擊5’-剪接點(diǎn)，E1釋放，形成套環(huán)結(jié)構(gòu)2.E1的3’-OH攻擊3’-剪接點(diǎn)，E1和E2連接，釋放套環(huán)3.套環(huán)結(jié)構(gòu)切斷，降解核基因mRNA的剪接過程剪接體二、Ⅰ類內(nèi)含子的自我剪接1、識(shí)別信號：5’-U

3’-GI類內(nèi)含子的剪接過程

----四膜蟲rRNA為例1.G-OH攻擊5’-剪接點(diǎn)釋放5’端的外顯子E1-OH，G-I-E22.E1的3’-OH攻擊3’-剪接點(diǎn)，E1和E2連接，釋放I3.線形I經(jīng)多次磷酸酯轉(zhuǎn)移反應(yīng)，釋放15個(gè)核苷酸，4個(gè)核苷酸，最后成為穩(wěn)定的線形產(chǎn)物L(fēng)19.(ppG,pppG)

pGoHU-OHGpUpAG-OHpAUpU第一次轉(zhuǎn)酯反應(yīng)第二次轉(zhuǎn)酯反應(yīng)UpAGpU外顯子內(nèi)含子外顯子GOH3’G5’OH5’3’GOH414G3995’3’3955’3’E1E2I四膜蟲RNA的自我剪接5’3’L19RNA具有催化活性的片段三、Ⅱ類內(nèi)含子的自我剪接套索結(jié)構(gòu)美國科學(xué)家，因發(fā)現(xiàn)mRNA的剪接于1993年獲諾貝爾獎(jiǎng)RNA的編輯編輯（editing）是指轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、加入或丟失等現(xiàn)象。C變?yōu)閁堿基的突變本章重點(diǎn)和難點(diǎn)1.基本概念：編碼鏈,模板鏈,啟動(dòng)子,轉(zhuǎn)錄單元2.啟動(dòng)子的特點(diǎn)（原核+真核）3.RNA聚合酶的特點(diǎn)（原核+真核）4.轉(zhuǎn)錄的起始、延伸和終止，抗終止作用5.轉(zhuǎn)錄后的加工,RNA的剪接4、機(jī)制尿苷酸的缺失和添加1986.R.Benne在研究錐蟲線粒體mRNA轉(zhuǎn)錄加工時(shí)發(fā)現(xiàn)mRNA的多個(gè)編碼位置上加入或丟失尿苷酸，1990年在高等動(dòng)物和病毒中也發(fā)現(xiàn)了編輯現(xiàn)象。三、酵母tRNA的剪接英國科學(xué)家，因發(fā)現(xiàn)斷裂基因于1993年獲諾貝爾獎(jiǎng)錐蟲coxII基因的編輯3、DNA模板鏈為5’-ATTCAG-3’,其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是:A.5’-GACTTA-3’