農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的測定課件

農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的測定農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心（杭州）農(nóng)藥研究分析，高人云集杭州，出自浙江國家環(huán)保局南京環(huán)境科學研究所——蔡道基院士中國農(nóng)科院茶葉科學研究所——陳宗懋研究員浙江農(nóng)業(yè)大學植保系環(huán)境毒理研究所——樊德方、劉乾開教授浙江省農(nóng)科院——葉興祥、于志光研究員中國農(nóng)科院水稻研究所——梁天錫研究員浙江大學環(huán)資學院副院長——劉維屏教授副院長——朱利中教授副院長——徐建明教授浙江大學農(nóng)學院植保系——朱國念教授中國農(nóng)科院副院長——王運浩研究員安徽農(nóng)業(yè)大學副校長——岳永德教授吉林農(nóng)大食品系分析中心主任——范志先教授浙江省現(xiàn)在的幾家從事農(nóng)殘檢測的部門（杭州市）農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試檢中心（杭州）農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥質(zhì)量與殘留檢測中心（杭州）農(nóng)業(yè)部稻米及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測中心農(nóng)業(yè)部茶葉質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心中國農(nóng)科院茶葉研究所浙江省出入境檢驗檢疫局浙江省技術(shù)監(jiān)督局中國土畜產(chǎn)浙江茶葉進出口公司農(nóng)藥殘留測定面臨的挑戰(zhàn)農(nóng)藥的多殘留分析

———一個樣品中要求檢測40-80種不同的農(nóng)藥殘留組份快速

———盡量縮短分析時間，快速告知檢測結(jié)果靈敏度高

———隨著國內(nèi)外“食品安全性”檢測標準的提高，要求的檢測限愈來愈低，要求檢測儀器及方法有足夠高的靈敏度。準確度

———要求方法的準確度能符合標準的要求檢測實例樣品名稱：烏龍茶，普洱茶樣品編號：2002-F-357-358背景材料2002年5月底，廣州某單位一批出口茶葉，依照日本客戶要求檢測有機氯，有機磷及菊酯類共33種農(nóng)殘組份，由農(nóng)業(yè)部介紹，承擔該項任務(wù)。農(nóng)殘檢測中的幾個基本概念靈敏度準確度精確度最低檢測量CCTB/T5009.1-1996）

最小檢出量（ng）×樣本 溶液定容體積（ml）最低的檢出濃度（mg/kg）＝樣本溶液進樣體積（ul）×稱樣重量（g）色譜儀最低響應(yīng)值為S=3N準確度-回收率測得的試樣中農(nóng)藥殘留量與試樣中實際含量的符合度在農(nóng)藥殘留量檢測工作中待測試樣中農(nóng)藥殘留量真實值是未知的，因此，無法判斷所采用方法的準確度，通常采用模擬的方法，在空白樣本中添加一定量的待測農(nóng)藥標準樣品，制成已知含量的樣本，然后按擬定的方法對樣本進行提取、凈化和測定，所得到的實測值與已知值比較，實測值對已知值的百分率即為方法添加回收率。它是衡量農(nóng)藥殘留量檢測方法準確度的重要指標。添加回收率應(yīng)以接近100％為最佳，但是，由于試樣種類和農(nóng)藥品種多，以及雜質(zhì)干擾、操作誤差等原因，則要求添加回收率為70－110％，平均回收率＞80％，即符合要求。精密度－變異系數(shù)同一種檢測方法對同一組試樣進行多次重復測定，其測定結(jié)果之間的偏差程度即為方法的精確度或精密度。不同添加回收率濃度范圍，要求允許變異系數(shù)大致如下：添加濃度（mg/kg)變異系數(shù)1-1010-250.1-125-500.01-0.150-1000.001-0.01100-2001、茶葉2、水果3、甘藍類蔬菜4、茄果類蔬菜5、白菜類蔬菜7、稻米浙江省綠色農(nóng)產(chǎn)品認定產(chǎn)品安全性檢測收費標準浙江水產(chǎn)品上海推薦會和綠色產(chǎn)品檢測項目農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品監(jiān)督檢驗測試中心（杭州）獸藥檢測項目磺胺甲惡唑、甲氧芐啶、磺胺嘧啶、已烯雌酚、甲睪酮、氯霉素、鏈霉素、慶大霉素、甲砜霉素、土霉素、鹽酸四環(huán)素、鹽酸金霉素、磺胺嘧啶、諾氟沙星、鹽酸克倫特羅、呋喃唑酮、伊維菌素、喹乙醇2002年8-9月農(nóng)業(yè)部“省會城市-杭州市蔬菜定點有機磷農(nóng)藥殘留和硝酸鹽污染情況監(jiān)督抽查”總經(jīng)費：16萬總樣品數(shù)：約200個抽樣：基地、批發(fā)市場、農(nóng)貿(mào)市場有機磷品種：敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、樂果、毒死蜱、馬拉硫磷、對硫磷本實驗室完成情況1、采用方法：美國加州食品農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥多殘留快速掃描方法（MRSM）2、方法概述：

30克樣品于250ml錐形瓶中，加入50ml乙腈（視樣品量加適量水），勻漿機中高速勻漿2分鐘。布氏漏斗抽濾

100ml具塞量筒內(nèi)放入5-7.5克NaCl,倒人濾液，蓋上塞子，劇烈震蕩1分鐘，在室溫下靜置約10分鐘，分層。取出25ml于平底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)濃縮蒸發(fā)器上濃縮近干，3ml丙酮定容，VarianCP-3800氣相色譜PFPD測定30克樣品于250ml錐形瓶中，加入50ml乙腈（視樣品量加適量水），勻漿機中高速勻漿2分鐘。布氏漏斗抽濾。100ml具塞量筒內(nèi)放入5-7.5克NaC1，倒入濾液，蓋上塞子，劇烈振蕩1分鐘，在室溫下靜置約10分鐘，分層。取出25ml于平底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)濃縮蒸發(fā)器上濃縮近干，3ml丙酮定容，VarianCP-3800氣相色譜PFPD測定儀器配置

1.瓦里安CP3800全氣路電子流量控制獨立三通道的氣相色譜儀2.2個1177分流/不分流毛細柱進樣口3.1個1079程序升溫PTV進樣口4.脈沖火焰光度檢測器PFPD5.電子捕俘檢測器ECD6.氮磷檢測器TSD7.CP841021位自動進樣器8.化學工作站回收率說明：敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、樂果、毒死蜱，馬拉硫磷、對硫磷、9個有機磷農(nóng)殘混合標樣PFPD測定結(jié)果，標樣濃度0.1－0.2ppm說明：上述9種有機磷農(nóng)殘標樣（0.1-0.2ppm），加入黃瓜基質(zhì)中，PFPD的測定結(jié)果。（樣品編號：1050-1）說明：濃度為0.1-0.2ppm的敵敵畏，甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、樂果、毒死蜱，馬拉硫磷、對硫磷等9種農(nóng)殘標樣加入黃瓜基質(zhì)中后PFPD測定結(jié)果。樣品編號：1111-1色譜柱型號

VarianCP-SIL-24CB（MS）30mx0.25mmIDx0.5umSPB-608:30mx0.25mmIDx0.25umSPB-50:30mx0.32mmIDx0.25um程序升溫TRateHoldTotal(C0)(ml/min)(min)(min)801.001.0013050.02.004.0018050.03.008.002205.08.0024.0026020.04.0030.00國家標準與國際組織和部分國家、地區(qū)標準比較2003年蔬菜農(nóng)藥殘留定點監(jiān)測1.抽檢時間：1、4、7、9、11月2.抽檢項目：甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、毒死蜱、對硫磷、甲基對硫磷、克百威、抗蚜威、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰酯3.抽檢地點：杭州市集貿(mào)市場及主要蔬菜生產(chǎn)基地采用方法1。NY/T448-2001“蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法”2。有機磷、氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留按GB/T5009.20方法規(guī)定的程序進行操作。3。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留按GB/T14929.4方法規(guī)定的程序進行操作。用農(nóng)殘快速測定儀進行快速篩選，再用氣相色譜方法進行分析有機磷、氨基甲酸酯農(nóng)藥快速檢測原理有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性，造成神經(jīng)傳導介質(zhì)乙酰膽堿的積累，影響正常傳導，使昆蟲中毒致死，根據(jù)這一昆蟲毒理學原理，用在對農(nóng)藥殘留的檢測中。加入反應(yīng)試劑后，用分光光度計測定吸光值隨時間的變化值，計算出抑制率，判斷蔬菜中含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘毒情況。即乙酰膽堿酯酶+有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥——酶活性被抑制活性被抑制樣本中含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，乙酰膽堿酯酶+樣本提取液活性正常，中不含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥如以乙酰硫代膽堿（AsCh)為底物，在乙酰膽堿酯酶（AChE)的作用下乙酰硫代膽堿（AsCh)水解成硫代膽堿和乙酸，硫代膽堿和二硫雙對硝基苯甲酸（DTNB）產(chǎn)生顯色反應(yīng)，使反應(yīng)液呈黃色，在分光光度計410nm處有最大吸收峰，用分光光度計可測得酶活性被抑制程度。（用抑制率表示）優(yōu)點：快速缺點：不夠靈敏農(nóng)藥殘留快速檢測最低檢出濃度國家標準與國際組織和部分國家標準比較表注：如果沒有限量值，參見CAC標準。其它蔬菜按最低限量值判定。檢測條件VarianCP-SIL-24CB（MS）30mx0.25mmIDx0.5umTSDSPB-50:30mx0.32mmIDx0.25umPFPD自動進樣器：8410甲胺磷檢出樣品的確證TSD：11只TSD-MSD2/11=18.2%TSD-PFPD3 只TSD-PFPD-MSD2/3=66.7%StagesofPFPDOperationPFPDEmissionReactions:SandPvs.HydrocarbonsHCemission(gatedat1-3ms)OH*+C2

?CH*+CO

Sulfuremission(gatedat6-26ms)H+H+S2

?S2*+H2S+S?S2*(second-orderorquadraticresponse)Phosphorusemission(gatedat4-14ms)H+PO?HPO*(firstorderorlinearresponse)PFPDSelectivitybyEmissionDelay(Gating)HydrocarbonandsulfuremissionprofilesasafunctionoftimeSemissionoccurs6msafterignitionandlastsover20ms,whereasHCrelatedemissionoccursquicklyandisoverwithin4msPFPDSelectivitybyWavelength(Filters)Hydrocarbonandsulfuremissionprofilesasafunctionofwavelength.

VarianPFPDusesa340-460nmfilter.SulfurComponentsinDieselFuel1077Injector,200:1Split,1μLinjection,DB-1,30m,0.32mmID,1μmdf,HeCarrierGasat50cm/secat230°C,Detector:200°C,Range10,Attn400PFPDFPD樣品：普洱茶，正已烷提取檢測器：ECD分析方法的質(zhì)量控制1、分析方法必須經(jīng)過認可或周密的驗證。2、分析程序作出明確的規(guī)定，經(jīng)考核核準的人員才能進行分析、測試，分析結(jié)果計算和記錄、校核等工作。3、使用質(zhì)量控制樣品。包括經(jīng)用有證標準物質(zhì)或其它國際上公認的標準物質(zhì)校準的實驗室參考物質(zhì)。推薦以下幾種質(zhì)量控制樣品：a.不含有待測物質(zhì)的空白樣品b.待測物含量等于最高殘留限量或略大于檢測限或分析方法測定低限的實際樣品。c.待測物含量高于最高殘留限量或高檢測限或分析方法測定低限的實際樣品4、每一次測試應(yīng)同時檢測質(zhì)量控制樣品，包括上述的a.b.c三個樣品，在條件不允許的情況下，可以只包括a.b樣或a.c樣品。5、用添加樣品檢查回收率、響應(yīng)線性和制作校正曲線。6、主要儀器設(shè)備，應(yīng)能滿足檢測方法的要求，并要經(jīng)常進行校準和維護。7、計算結(jié)果必須詳細說明，其結(jié)果必須符合統(tǒng)計分析的質(zhì)量要求。農(nóng)藥殘留實驗室規(guī)范農(nóng)藥殘留量檢測是較復雜的檢測技術(shù)。由于待測樣本中農(nóng)藥含量往往很低，幫要求各檢測步驟者應(yīng)科學、嚴密，方法靈敏度要高；由于待測農(nóng)藥品種和樣本種類多，故需要采用不同的樣本前處理和測定方法；由于檢測步驟多，流程長，故要求操作人員應(yīng)具有熟練的技術(shù)和豐富的經(jīng)驗。農(nóng)藥殘留量檢測工作特點決定了農(nóng)藥殘留實驗室的特點：具在較豐富經(jīng)驗和較高技術(shù)水平的專家；具有先進的檢測儀器和配套設(shè)備；具在最大安全性和最小污染機會的條件。技術(shù)人員必須是經(jīng)過嚴格培訓的分析化學家，不但要有該領(lǐng)域的專業(yè)知識，還要具有能勝任該項工作的技能和經(jīng)驗，經(jīng)考核合格。1.明確采用的檢測方法原理及進行每一