標(biāo)準(zhǔn)解讀

《NY/T 556-2002 雞傳染性喉氣管炎診斷技術(shù)》是一項(xiàng)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，主要針對(duì)雞傳染性喉氣管炎（ILT）的診斷方法進(jìn)行了規(guī)范。該標(biāo)準(zhǔn)適用于獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室、疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)以及相關(guān)科研單位在進(jìn)行ILT診斷時(shí)參照使用。以下是該標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容：

  1. 術(shù)語(yǔ)與定義：首先明確了“雞傳染性喉氣管炎”等專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)的具體含義，為后續(xù)的技術(shù)操作提供了一致的理解基礎(chǔ)。

  2. 病原學(xué)特征：介紹了引起雞傳染性喉氣管炎的病毒——即雞傳染性喉氣管炎病毒（ILTV）的基本特性，包括其分類(lèi)地位、形態(tài)結(jié)構(gòu)及生物學(xué)特性等信息。

  3. 臨床癥狀：描述了感染雞只可能出現(xiàn)的癥狀表現(xiàn)，如呼吸困難、咳嗽、咳血絲狀物或黃色液體等典型體征，有助于初步判斷是否疑似患病。

  4. 病理變化：詳細(xì)列舉了死亡或被宰殺后患雞體內(nèi)器官組織上可見(jiàn)的病變情況，特別是氣管和喉頭部位的炎癥反應(yīng)及其特點(diǎn)。

  5. 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法：

    • 直接熒光抗體試驗(yàn)（FA）：利用特異性熒光標(biāo)記抗體對(duì)樣本中的病毒抗原進(jìn)行快速定位。
    • 病毒分離培養(yǎng)：通過(guò)接種易感細(xì)胞系來(lái)擴(kuò)增病毒，并結(jié)合其他鑒定手段確認(rèn)是否為ILTV。
    • 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）：用于檢測(cè)血液中針對(duì)ILTV的特異性抗體水平，評(píng)估個(gè)體或群體免疫狀態(tài)。
    • 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）：采用分子生物學(xué)技術(shù)直接從待檢材料中擴(kuò)增特定核酸片段以識(shí)別病原體存在與否。

  6. 結(jié)果判定：根據(jù)上述各項(xiàng)檢測(cè)的結(jié)果綜合分析，給出最終的確診意見(jiàn)。同時(shí)強(qiáng)調(diào)了陽(yáng)性結(jié)果需要進(jìn)一步驗(yàn)證的重要性，確保診斷準(zhǔn)確性。

  7. 注意事項(xiàng)：提醒實(shí)驗(yàn)人員在操作過(guò)程中應(yīng)注意個(gè)人防護(hù)措施，防止交叉污染；并對(duì)樣品采集、保存及運(yùn)輸條件提出了具體要求，保證檢測(cè)質(zhì)量。

該標(biāo)準(zhǔn)為科學(xué)有效地開(kāi)展雞傳染性喉氣管炎防控工作提供了技術(shù)支持和指導(dǎo)依據(jù)。


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  • 正在執(zhí)行有效
  • 2002-08-27 頒布
  • 2002-12-01 實(shí)施
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SC9.11220B41NY中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T556-2002雞傳染性喉氣管炎診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforavianinfectiousiaryngotracheitis2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T556—2002雞傳染性喉氣管炎是雞的重要疫病之，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織World（rganizationforAnimalHealth(英）fficeInternationaldesEpizooties(法）,IE將本病定為B類(lèi)動(dòng)物疾病，我國(guó)定為二類(lèi)動(dòng)物疫病。本標(biāo)準(zhǔn)主要參照（)E推薦的雞傳染性喉氣管炎(IL.T)診斷方法制定。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄八、附錄3為規(guī)范性附錄本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜收售醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：農(nóng)業(yè)部動(dòng)物檢疫所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：范根成、王永玲、劉相蛾、王紅。

NY/T556-2002雞傳染性喉氣管炎診斷技術(shù)1范圓本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了雞傳染性喉氣管炎病毒分離及瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的病毒分離技術(shù)，適用于本病的確診。瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)，適用于傳染性喉氣管炎的血清學(xué)診斷及用傳染性喉氣管炎疫苗免疫后的抗體檢測(cè)。喜分離鑒定技術(shù)2.1材料準(zhǔn)備2.1.1病料的準(zhǔn)備2.1.1.1活體采樣：用滅菌棉執(zhí)子伸入口咽或氣管采集分泌物，放人含青露素4000IU/ml.鏈猴素4000g/mL的無(wú)菌生理鹽水中。也可用棉拔子刮取眼分泌物，處理方法同上。2.1.1.2尸體采樣：無(wú)菌采取病死雞喉頭和氣管，放人尤菌的平血或燒杯中.飾封，2.1.2樣品的運(yùn)送采集的樣品應(yīng)立即放人4℃冰箱保存.24h內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室；不能在24h內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室時(shí)，應(yīng)將所采樣品冷凍保存和運(yùn)輸、2.1.3樣品處理2.1.3.1收到棉基子樣品后，先經(jīng)凍融兩次，并充分振動(dòng)、擠干棉執(zhí)子，將樣品液經(jīng)10000r/min離心10min.取上清液，加入青群素4000IU/ml..鏈莓素4000Pg/ml..于37℃作用30min.作為接種材料，2.1.3.2組織樣品：無(wú)的條件下將組織剪碎。按1：4加人生理鹽水后用研器研磨制成20%的勾漿懸浮液，再經(jīng)10000/min離心10min,取上清液，加人青霉素40001U/ml鏈雅素40002g/ml.于37℃作用30mim，作為接種材料。2.2操作方法2.2.1樣品接種取經(jīng)處理過(guò)的樣品，接種9～12日齡的雞胚絨毛尿囊膜。每枚0.2ml.,接種后的雞豚在37℃孵育每天觀察雞豚2次，連續(xù)觀察7d棄去24h內(nèi)死亡的雞胚，24h～120h內(nèi)死亡的雞胚，放4℃冷卻石觀察雞胚絨毛尿囊膜上有無(wú)痘斑形成：120h仍不死亡的雞胚，亦取出，置4C冷卻后，觀察雞胚絨毛尿套膜上有無(wú)痘斑形成。有痘斑者，取出雞胚絨毛尿囊膜和尿囊液，無(wú)菌研磨后，置－20℃凍存?zhèn)溆?；無(wú)痘斑者，亦取出雞胚絨毛尿囊膜和尿囊液，無(wú)菌研磨，反復(fù)凍融，離心后，接種9～12日齡的雞胚絨毛尿囊膜盲傳。如此盲傳3代以上，如仍無(wú)病變·則判為雞傳染性喉氣管炎陰性。2.2.2病毒鑒定病毒分離物的鑒定：用雞傳染性喉氣管炎標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清(效價(jià)在1：32以上)和標(biāo)準(zhǔn)陰性血清與分離物作雞胚中和試驗(yàn)，固定血清，稀釋病毒法中和試驗(yàn)操作方法。血清處理：將傳染性喉氣管炎標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清和標(biāo)準(zhǔn)陰

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