NY/T 561-2002動(dòng)物炭疽診斷技術(shù)

565.11.220NY中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/r561-2002動(dòng)物炭疽診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforanimalanthrax2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T561-2002麗F炭疽是由炭殖桿菌所致的人畜共患烈性傳染病,對(duì)反動(dòng)物危害尤為嚴(yán)重。本病分布于世界各地目前很多國(guó)家和地區(qū)仍有本病的發(fā)生·我國(guó)個(gè)別地區(qū)也有散發(fā)。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織[WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OffieeintentionaldesEpizootic(法），IE將該病列為B類(lèi)動(dòng)物傳染病，我國(guó)農(nóng)業(yè)部將其規(guī)定為二類(lèi)動(dòng)物傳染病。本標(biāo)準(zhǔn)與（IE編著《哺乳動(dòng)物、禽和蜜蜂A和B類(lèi)疾病診斷試驗(yàn)和疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)》2000)中有關(guān)炭殖抗原的診斷技術(shù)基本一致。但該于冊(cè)介紹的血清學(xué)試驗(yàn)，由于特異性和敏感性較差而術(shù)采用。本標(biāo)準(zhǔn)吸收了農(nóng)業(yè)部1979年頒布的《皮張?zhí)烤页恋矸磻?yīng)技術(shù)操作規(guī)程》和《熒光抗體檢驗(yàn)景、毛、絨類(lèi)炭痘桿菌操作規(guī)程》等部分內(nèi)容，因此，在本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施之后，上述規(guī)程將白動(dòng)廢止。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B為規(guī)范性附錄，本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國(guó)人民解放軍軍需大學(xué)、本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王世若、王興龍、沈廣、韓文瑜、梁煥春

NY/T561-2002動(dòng)物炭疽診斷技術(shù)1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物炭疽桿菌分離培養(yǎng)鑒定及血清學(xué)試驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各種動(dòng)物炭痘病的診斷及檢疫新鮮疑似炭痘病料標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查2.1顯微鏡檢查2.1.1材料準(zhǔn)備2.1.1.1器材恒溫箱、顯微鏡、高壓滅菌器、煮沸消毒器、漏斗、15mm×150mm試管、最小反應(yīng)管、移液管、帶膠乳頭的毛細(xì)吸管(或血清加樣器)、乳缽、中性石棉、5ml.注射器、外科刀、攝、鐘金耳、酒精燈等。2.1.1.2培養(yǎng)基戊燒脹多帖蘭索血液瓊脂平板、碳酸氫鈉瓊脂平板、快速增殖肉湯、普通營(yíng)養(yǎng)肉湯、普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、2%綿羊血液瓊脂平板、2%兔血清瓊脂平板等，配制方法見(jiàn)附錄A。2.1.1.3試劑炭痘沉淀素血清、陰性血清、標(biāo)準(zhǔn)炭疽桿菌抗原、炭疽熒光抗體、炭疽啦菌體2.1.1.4溶液及染色液克氏固定液、磷酸鹽緩沖鹽水(PBS）、緩沖甘油、0.5%苯酚(俗名石炭酸)溶液、福爾馬林龍膽紫染色液、堿性美藍(lán)染色液、草蘭氏染色液，配方見(jiàn)附錄B。2.1.1.5實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本體重178~20g清潔級(jí)尾明系小鼠2.1.2病料標(biāo)本采集為炭動(dòng)物，除慢性者外，其他不論是最急性者或急性者均于生前將耳部消毒后取血液，病變部取水腫液或滲出液等直接涂于載玻片上,白然干燥后.將玻片涂面相對(duì)疊好，中間用火柴桿隔開(kāi),以線捆扎·外用塑料紙包好?；蛴脺缇撝?、濾紙、布片吸取血液等放于小試管中，待檢。死后，自消海的耳根部或四肢末端部采取血液滴于玻片上：或用細(xì)繩在耳根部紫扎兩道，在兩繩之間將耳制下,以5%苯酚溶液（見(jiàn)第B.8章)浸濕的棉布包好,放廣口瓶中待檢，耳切口處用燒紅的烙鐵燒灼止血。已經(jīng)錯(cuò)部的疑似炭痘動(dòng)物尸體，可取肝、牌、腎等勝器置于試管中，待檢。上述涂片自然干燥，火焰固定，如涂片較薄，也可用無(wú)水甲醇或乙醇固定，然后用下述染色法染色鏡檢。2.1.3雷比格爾(Rabiger)氏莢膜染色法2.1.3.1操作方法加0.5mL～1.0ml.福爾馬林龍膽紫染色液(見(jiàn)第B.5章)于涂抹面上，