NY/T 561-2002動物炭疽診斷技術(shù)

565.11.220NY中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準NY/r561-2002動物炭疽診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforanimalanthrax2002-08-27發(fā)布2002-12-01實施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T561-2002麗F炭疽是由炭殖桿菌所致的人畜共患烈性傳染病,對反動物危害尤為嚴重。本病分布于世界各地目前很多國家和地區(qū)仍有本病的發(fā)生·我國個別地區(qū)也有散發(fā)。世界動物衛(wèi)生組織[WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OffieeintentionaldesEpizootic(法），IE將該病列為B類動物傳染病，我國農(nóng)業(yè)部將其規(guī)定為二類動物傳染病。本標準與（IE編著《哺乳動物、禽和蜜蜂A和B類疾病診斷試驗和疫苗標準手冊》2000)中有關(guān)炭殖抗原的診斷技術(shù)基本一致。但該于冊介紹的血清學(xué)試驗，由于特異性和敏感性較差而術(shù)采用。本標準吸收了農(nóng)業(yè)部1979年頒布的《皮張?zhí)烤页恋矸磻?yīng)技術(shù)操作規(guī)程》和《熒光抗體檢驗景、毛、絨類炭痘桿菌操作規(guī)程》等部分內(nèi)容，因此，在本標準實施之后，上述規(guī)程將白動廢止。本標準的附錄A、附錄B為規(guī)范性附錄，本標準由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出。本標準由全國動物檢疫標準化委員會歸口。本標準起草單位：中國人民解放軍軍需大學(xué)、本標準主要起草人：王世若、王興龍、沈廣、韓文瑜、梁煥春

NY/T561-2002動物炭疽診斷技術(shù)1范圍本標準規(guī)定了動物炭疽桿菌分離培養(yǎng)鑒定及血清學(xué)試驗方法。本標準適用于各種動物炭痘病的診斷及檢疫新鮮疑似炭痘病料標本的細菌學(xué)檢查2.1顯微鏡檢查2.1.1材料準備2.1.1.1器材恒溫箱、顯微鏡、高壓滅菌器、煮沸消毒器、漏斗、15mm×150mm試管、最小反應(yīng)管、移液管、帶膠乳頭的毛細吸管(或血清加樣器)、乳缽、中性石棉、5ml.注射器、外科刀、攝、鐘金耳、酒精燈等。2.1.1.2培養(yǎng)基戊燒脹多帖蘭索血液瓊脂平板、碳酸氫鈉瓊脂平板、快速增殖肉湯、普通營養(yǎng)肉湯、普通營養(yǎng)瓊脂平板、2%綿羊血液瓊脂平板、2%兔血清瓊脂平板等，配制方法見附錄A。2.1.1.3試劑炭痘沉淀素血清、陰性血清、標準炭疽桿菌抗原、炭疽熒光抗體、炭疽啦菌體2.1.1.4溶液及染色液克氏固定液、磷酸鹽緩沖鹽水(PBS）、緩沖甘油、0.5%苯酚(俗名石炭酸)溶液、福爾馬林龍膽紫染色液、堿性美藍染色液、草蘭氏染色液，配方見附錄B。2.1.1.5實驗動物本體重178~20g清潔級尾明系小鼠2.1.2病料標本采集為炭動物，除慢性者外，其他不論是最急性者或急性者均于生前將耳部消毒后取血液，病變部取水腫液或滲出液等直接涂于載玻片上,白然干燥后.將玻片涂面相對疊好，中間用火柴桿隔開,以線捆扎·外用塑料紙包好?；蛴脺缇撝蕖V紙、布片吸取血液等放于小試管中，待檢。死后，自消海的耳根部或四肢末端部采取血液滴于玻片上：或用細繩在耳根部紫扎兩道，在兩繩之間將耳制下,以5%苯酚溶液（見第B.8章)浸濕的棉布包好,放廣口瓶中待檢，耳切口處用燒紅的烙鐵燒灼止血。已經(jīng)錯部的疑似炭痘動物尸體，可取肝、牌、腎等勝器置于試管中，待檢。上述涂片自然干燥，火焰固定，如涂片較薄，也可用無水甲醇或乙醇固定，然后用下述染色法染色鏡檢。2.1.3雷比格爾(Rabiger)氏莢膜染色法2.1.3.1操作方法加0.5mL～1.0ml.福爾馬林龍膽紫染色液(見第B.5章)于涂抹面上，