2018-2016各地真題分類選修三

高考真題分類2018年北京卷5，6分）用XhoI和SalI兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段，酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確 的是．．．A．圖1中兩種酶識(shí)別的核苷酸序列不同B．圖2中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組 DNAC．泳道①中是用 SalI處理得到的酶切產(chǎn)物D．圖中被酶切的 DNA片段是單鏈 DNA【答案】D2018江蘇卷8,2分）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是A．為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在 70%乙醇中浸泡 30min．過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化．過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上【答案】C2018江蘇卷10,2分）下列關(guān)于采用胚胎工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)某良種肉用牛快速繁殖的敘述，正確的是．采取激素注射等方法對(duì)良種母牛作超數(shù)排卵處理．體外培養(yǎng)發(fā)育到原腸胚期的胚胎即可進(jìn)行移植C．使用免疫抑制劑以避免代孕牛對(duì)植入胚胎的排斥反應(yīng)．利用胚胎分割技術(shù)，同卵多胎較同卵雙胎成功率更高【答案】A2018江蘇卷22,3分）如圖為細(xì)胞融合的示意圖，下列敘述正確的是．若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先去分化再誘導(dǎo)融合．a(chǎn)細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C．c細(xì)胞的形成與 a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)D．c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá) a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因【答案】BC高考真題分類（2017年北京卷 5，6分）為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因 C（圖1），擬將其與質(zhì)粒（圖 2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟?符的是．．A．用限制性核酸內(nèi)切酶 EcoRⅠ和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒B．用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將 C基因?qū)爰?xì)胞C．在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞D．用分子雜交方法檢測 C基因是否整合到菊花染色體上【答案】

C（2017

江蘇

11）牛雄性胚胎中存在特異性

H-Y

抗原，可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加

H-Y

單克隆抗體，篩選胚胎進(jìn)行移植，

以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。

下列相關(guān)敘述正確的是A．H-Y

單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌

B．應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別C．鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植

D．用

H-Y

抗原免疫母?？色@得相應(yīng)抗體【答案】

D（2017江蘇14）下列關(guān)于小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述，錯(cuò)誤的是A．精子在獲能液中于 37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲能B．小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng)，注射相關(guān)激素有促進(jìn)超數(shù)排卵的作用C．分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)，因此發(fā)育成的個(gè)體沒有形態(tài)學(xué)差異D．注射到囊胚腔中的胚胎干細(xì)胞可以參與個(gè)體器官的發(fā)育【答案】C（2017年4月浙江卷，28）【加試題】若利用根瘤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)基因技術(shù)將抗蟲基因和抗除草劑基因轉(zhuǎn)入大豆，獲得若干轉(zhuǎn)基因植物（T0代），從中選擇抗蟲抗除草劑的單株S1、S2和S3，分別進(jìn)行自交獲得T1代，T1代性狀表現(xiàn)如圖所示。已知目的基因能1次或多次插入并整合到受體細(xì)胞染色體上。下列敘述正確的是高考真題分類第28題圖．抗蟲對(duì)不抗蟲表現(xiàn)為完全顯性，抗除草劑對(duì)不抗除草劑表現(xiàn)為不完全顯性B．根瘤農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒攜帶的抗蟲和抗除草劑基因分別插入到了 S2的2條非同源染色體上， 并正常表達(dá)C．若給S1后代T1植株噴施適量的除草劑，讓存活植株自交，得到的自交一代群體中不抗蟲抗除草劑的基因型頻率為 1/2D．若取S3后代T1純合抗蟲不抗除草劑與純合不抗蟲抗除草劑單株雜交，得到的子二代中抗蟲抗除草劑的純合子占1/9【答案】C（2016年高考天津卷 4，6分）將攜帶抗 M基因、不帶抗 N基因的鼠細(xì)胞去除細(xì)胞核后，與攜帶抗N基因、不帶抗M基因的鼠細(xì)胞融合， 獲得的胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有 M、N兩種抗性。該實(shí)驗(yàn)證明了A．該胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有全能性 B．該胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有無限增殖能力C．抗M基因位于細(xì)胞質(zhì)中 D．抗N基因位于細(xì)胞核中【答案】

C2016上海高考卷，第27題，2分）十年前兩個(gè)研究小組幾乎同時(shí)發(fā)現(xiàn)，將四個(gè)特定基因?qū)胩幱诜只K端的體細(xì)胞（如成纖維細(xì)胞等）中，可誘導(dǎo)其形成具有胚胎干細(xì)胞樣分化潛能的誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞。這項(xiàng)先進(jìn)技術(shù)的潛在應(yīng)用前景是A．改造和優(yōu)化人類基因組結(jié)構(gòu) B．突破干細(xì)胞定向分化的障礙C．解決異體組織 /器官排斥難題 D．克隆具有優(yōu)良品質(zhì)的動(dòng)物個(gè)體【答案】C（2016江蘇9）下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是A．PEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合．用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細(xì)胞破裂高考真題分類C．骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D．核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體 DNA來自供卵母體【答案】D2016江蘇11）印度沙漠貓是一種珍稀貓科動(dòng)物，通過胚胎工程技術(shù)，可以讓家貓代孕而繁育，主要步驟如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是．步驟甲、乙分別是指精子獲能、胚胎分割．誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞．步驟甲使用的培養(yǎng)液和早期胚胎培養(yǎng)液成分基本相同【答案】B2018年全國I卷，第38題，15分）回答下列問題：1）博耶（H.Boyer）和科恩（S.Coben）將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá)。該研究除證明了質(zhì)粒可以作為載體外，還證明了_________（答出兩點(diǎn)即可）。2）體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2+參與的________方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，而體外重組的噬菌體DNA通常需與_________組裝成完整噬菌體后，才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞，在細(xì)菌、心肌細(xì)胞、葉肉細(xì)胞中，可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是_______。3）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用__________的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在蛋白質(zhì)純化的過程中因添加______________的抑制劑?！敬鸢浮浚?5分）（1）體外重組的質(zhì)?？梢赃M(jìn)入受體細(xì)胞；真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)。（2）轉(zhuǎn)化外殼蛋白（或噬菌體蛋白）細(xì)菌（3）蛋白酶缺陷型蛋白酶（2018年全國卷Ⅱ，第38題，15分）某種熒光蛋白（GFP）在紫外線或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠高考真題分類色熒光，這一特性可用于檢測細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5’末端，獲得了L1-GFP融合基因（簡稱為甲），并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下，圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。回答下列問題：（1）據(jù)圖推斷，該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒 P0時(shí)，使用了兩種限制酶，這兩種酶是 ________。使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證 _______，也是為了保證 __________。（2）將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明 L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了 __________和___________過程。（3）為了獲得含有甲的牛， 該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括： 將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的 ________移入牛的________中，體外培養(yǎng)、胚胎移植等。（4）為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，某同學(xué)用 PCR方法進(jìn)行鑒定，在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞的 ____________（填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”）作為 PCR模板。【答案】（ 15分）（1）E1

和

E4

甲的完整

甲與載體正確連接（2）轉(zhuǎn)錄

翻譯

（3）細(xì)胞核

去核卵母細(xì)胞

（4）核

DNA（2018年全國卷Ⅲ，第 38題，15分）2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長類動(dòng)物進(jìn)行克隆， 獲得兩只克隆猴 ——“中中”和“華華”。 回答下列問題：（1）“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程， 核移植是指 。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目 （填“減半”“加倍”或“不變”） 。（2）哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度 （填“大于”或“小于”）體細(xì)胞核移植，其原因是 。（3）在哺乳動(dòng)物核移植的過程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通高考真題分類常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目 （填“相同”或“不同”）性染色體組合 （填“相同”或“不同”） ?！敬鸢浮浚?5分）（1）將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中 不變（2）小于 胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易（3）相同 不同

，（2018海南卷.31）題，15分）甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì)。為了改善黃瓜的品質(zhì)，科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將一種甜蛋白基因成功導(dǎo)入黃瓜細(xì)胞，得到了轉(zhuǎn)基因植株。回答下列問題：（1）用農(nóng)桿菌感染時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選用黃瓜 （填“受傷的”或“完好的” ）葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是 。（2）若在轉(zhuǎn)基因黃瓜中檢測到這種甜蛋白， 則表明該重組質(zhì)粒中 已轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中且能夠表達(dá)；用該轉(zhuǎn)基因黃瓜的某一植株與一株非轉(zhuǎn)基因植株雜交，發(fā)現(xiàn)子代中含甜蛋白個(gè)體數(shù)與不含甜蛋白個(gè)體數(shù)之比為 1：1，則說明甜蛋白基因已經(jīng)整合到（填“核基因組”“線粒體基因組”或“葉綠體基因組” ）中。（3）假設(shè)某種轉(zhuǎn)基因作物因?yàn)槭艿讲《靖腥径鴾p產(chǎn)，若要以該轉(zhuǎn)基因作物為材料獲得脫毒苗，應(yīng)選用 作為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)。（4）通常，基因工程操作主要有 4個(gè)步驟，即目的基因獲取、重組表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、 目的基因的檢測與鑒定。 因此，基因工程的含義可概括為【答案】（15分）

。（1）受傷的 葉片傷口處的細(xì)胞釋放出大量酚類物質(zhì)，可吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞（2）甜蛋白基因 核基因組3）莖尖4）按照人們的愿望進(jìn)行設(shè)計(jì)，并通過體外重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出符合人們需要的新生物類型2018天津卷10，14分）甲型流感病毒為RNA病毒，易引起流感大規(guī)模流行。我國科學(xué)家在2017年發(fā)明了一種制備該病毒活疫苗的新方法，主要環(huán)節(jié)如下。（1）改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主細(xì)胞內(nèi)的增殖能力。以病毒 RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄成對(duì)應(yīng)

DNA

后，利用

技術(shù)擴(kuò)增，并將其中某些基因（不包括表面抗原基因）內(nèi)個(gè)別編碼氨基酸的序列替換成編碼終止密碼子的序列。與改造前的基因高考真題分類相比，改造后的基因表達(dá)時(shí)不能合成完整長度的 ，因此不能產(chǎn)生子代病毒。將該改造基因、表面抗原等其他基因分別構(gòu)建重組質(zhì)粒，并保存。（2）構(gòu)建適合改造病毒增殖的轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞。設(shè)計(jì)合成一種特殊 tRNA的基因，其產(chǎn)物的反密碼子能與（ 1）中的終止密碼子配對(duì)結(jié)合，并可攜帶一個(gè)非天然氨基酸（ Uaa）。將該基因與 連接后導(dǎo)入宿主細(xì)胞。提取宿主細(xì)胞的 進(jìn)行分子雜交鑒定，篩選獲得成功表達(dá)上述 tRNA的轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞。（3）利用轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞制備疫苗。將（ 1）中的重組質(zhì)粒導(dǎo)入（ 2）中的轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞，并在補(bǔ)加 的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)， 則該宿主細(xì)胞能利用上述特殊 tRNA，翻譯出改造病毒基因的完整蛋白，產(chǎn)生大量子代病毒，用于制備疫苗。特殊 tRNA基因轉(zhuǎn)錄時(shí)，識(shí)別其啟動(dòng)子的酶是 （單選）。A．病毒的DNA聚合酶 B．宿主的 DNA聚合酶C．病毒的 RNA聚合酶 D．宿主的 RNA聚合酶4）上述子代病毒不能在正常宿主細(xì)胞中增殖，沒有致病性，因此不經(jīng)滅活或減毒即可制成疫苗。與不具侵染性的流感病毒滅活疫苗相比，該病毒活疫苗的優(yōu)勢(shì)之一是可引起免疫，增強(qiáng)免疫保護(hù)效果。【答案】（14分）（1）PCR 多肽（或蛋白質(zhì)）（2）載體 總RNA（3）非天然氨基酸（ Uaa） D（4）細(xì)胞（2018年江蘇卷 32，8分）為生產(chǎn)具有特定性能的 α-淀粉酶，研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656個(gè)堿基對(duì)），利用基因工程大量制備 α-淀粉酶，實(shí)驗(yàn)流程見下圖。請(qǐng)回答下列問題：（1）利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增 α-淀粉酶基因前，需先獲得 細(xì)菌的____________。2）為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接，需在引物的___端加上限制性酶切位點(diǎn)，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要目的是____。3）進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，反應(yīng)的溫度和時(shí)間需根據(jù)具體情況進(jìn)行高考真題分類設(shè)定，下列選項(xiàng)中__的設(shè)定與引物有關(guān)， ___的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長度有關(guān)。 （填序號(hào)）①變性溫度 ②退火溫度 ③延伸溫度④變性時(shí)間 ⑤退火時(shí)間 ⑥延伸時(shí)間（4）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼 α-淀粉酶的

mRNA

的部分堿基序列：圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含__個(gè)密碼子，如虛線框后的序列未知，預(yù)測虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有___種。（5）獲得工程菌表達(dá)的 α-淀粉酶后，為探究影響酶活性的因素，以濃度為 1%的可溶性淀粉為底物測定酶活性，結(jié)果如下：根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，初步判斷該 α-淀粉酶活性最高的條件為【答案】（8分）

___________。1）基因組DNA2）5’使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連3）②⑥4）8135）pH為8.5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl（浙江2018年11月選考，7分）32.【加試題】回答下列（二）小題：（二）某農(nóng)業(yè)生態(tài)丁程示意圖如下，回答下列問題：(l)該農(nóng)業(yè)生態(tài)工程體現(xiàn)的生態(tài)工程原理主要是 ________。對(duì)該工程的經(jīng)濟(jì)效益分析，可從系統(tǒng)內(nèi)部的投入和產(chǎn)出、______________、系統(tǒng)的有效貢獻(xiàn)等三方面進(jìn)行核算。若要提高該工程的經(jīng)濟(jì)效益，可采用農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的技術(shù)_________在桑基上再種植大豆， 也可采用農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的_________技術(shù)放養(yǎng)適量的雞鴨等動(dòng)物以調(diào)整該工程的產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)。(3)某小組應(yīng)用基因工程方法開展適用于該生態(tài)工程的抗蟲植物改良研究。為提高將重組 DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的高考真題分類效率，除考慮導(dǎo)入方法、篩選條件、防止污染外，還需考慮的主要因素有 ___________________（答出2點(diǎn)即可）。農(nóng)桿菌介導(dǎo)法是目前植物轉(zhuǎn)基因的常用方法，該方法的基本過程是農(nóng)桿菌感染植物時(shí)，并將其插入到受體細(xì)胞的基因組中。 欲獲得穩(wěn)定遺傳的抗蟲性強(qiáng)的轉(zhuǎn)基因植物品種，則轉(zhuǎn)入的抗蟲基因必須能在受體細(xì)胞中 ________________________答案：(1)物質(zhì)循環(huán) 系統(tǒng)的實(shí)際消費(fèi)2)間種種 植業(yè)和畜牧業(yè)合理優(yōu)化(3)重組DNA的質(zhì)量和濃度、受體細(xì)胞的生長狀態(tài)與密度 攜帶目的基因的 Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞 。（2018

年4月浙江卷，

32）回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：（1）將含某抗蟲基因的載體和含卡那霉素抗性基因的載體

pBI121

均用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI酶切，在切口處形成

__________。選取含抗蟲基因的

DNA

片段與切割后的pBI121用

DNA

連接酶連接，在兩個(gè)片段相鄰處形成

__________，獲得重組質(zhì)粒。（2）已知用

CaCl2處理細(xì)菌，會(huì)改變其某些生理狀態(tài)。取

CaCl2處理過的農(nóng)桿菌與重組質(zhì)粒在離心管內(nèi)進(jìn)行混合等操作，使重組質(zhì)粒進(jìn)入農(nóng)桿菌，完成 _____________實(shí)驗(yàn)。在離心管中加入液體培養(yǎng)基，置于搖床慢速培養(yǎng)一段時(shí)間，其目的是 __________，從而表達(dá)卡那霉素抗性基因，并大量增殖。3）取田間不同品種水稻的幼胚，先進(jìn)行____________，然后接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng)，幼胚發(fā)生______________形成愈傷組織，并進(jìn)行繼代培養(yǎng)。用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染愈傷組織，再培養(yǎng)愈傷組織，以便獲得抗蟲的轉(zhuǎn)基因水稻。影響愈傷組織能否成功再生出植株的因素有：培養(yǎng)條件如光溫、培養(yǎng)基配方如植物激素配比、以及_______________（答出2點(diǎn)即可）?！敬鸢浮浚?）粘性末端磷酸二酯鍵（2）轉(zhuǎn)化使CaCl2處理過的農(nóng)桿菌恢復(fù)細(xì)胞的正常狀態(tài)（3）消毒脫分化水稻的基因型、愈傷組織繼代的次數(shù)（2017年全國I卷，第38題，15分）真核生物基因中通常有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列的機(jī)制。已知在人體中基因A（有內(nèi)含子）可以表達(dá)出某種特定蛋白（簡稱蛋白A）。回答下列問題：（1）某同學(xué)從人的基因組文庫中獲得了基因 A，以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到蛋白 A，其原因是_____________________。（2）若用家蠶作為表達(dá)基因 A 的受體，在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中，不選用高考真題分類____________________作為載體，其原因是 _____________________。（3）若要高效地獲得蛋白 A，可選用大腸桿菌作為受體。因?yàn)榕c家蠶相比，大腸桿菌具有_________________（答出兩點(diǎn)即可）等優(yōu)點(diǎn)。4）若要檢測基因A是否翻譯出蛋白A，可用的檢測物質(zhì)是___________________（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”）。（5）艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)為證明 DNA 是遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻(xiàn)，也可以說是基因工程的先導(dǎo)，如果說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，那么，這一啟示是_________________________。【答案】（15分）（1）基因A有內(nèi)含子，在大腸桿菌中，其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的 RNA序列不能被切除，無法表達(dá)出蛋白

A（2）噬菌體 噬菌體的宿主是細(xì)菌，而不是家蠶（3）繁殖快、容易培養(yǎng)（4）蛋白A的抗體（5）DNA可以從一種生物個(gè)體轉(zhuǎn)移到另一種生物個(gè)體（2017年全國卷Ⅱ，第38題，15分）幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分， 幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)， 可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。 回答下列問題：（1）在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的 mRNA，常選用嫩葉而不選用老葉作為實(shí)驗(yàn)材料，原因是 __________________________。提取 RNA

時(shí)，提取液中需添加 RNA酶抑制劑，其目的是 __________________________。2）以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是__________________________。3）若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是 __________________________（答出兩點(diǎn)即可）。4）當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是______________。5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是 __________________________?！敬鸢浮浚?5分）（1）嫩葉組織細(xì)胞易破碎 防止RNA降解（2）在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以 mRNA為模板按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則可以合成 cDNA高考真題分類3）目的基因無復(fù)制原點(diǎn)；目的基因無表達(dá)所需啟動(dòng)子4）磷酸二酯鍵5）目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常（2017年全國卷Ⅲ，第 38題，15分）編碼蛋白甲的 DNA序列（序列甲）由 A、B、C、D、E五個(gè)片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖 1所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙， 若在啟動(dòng)子的下游直接接上編碼蛋白乙的 DNA序列（TTCGCTTCT??CAGGAAGGA ），則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙，原因是 _____________________________________。（2）某同學(xué)在用 PCR技術(shù)獲取 DNA片段B或D的過程中，在PCR反應(yīng)體系中加入了 DNA聚合酶、引物等，還加入了序列甲作為_____________________，加入了________________作為合成DNA的原料。（3）現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn)：將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對(duì)照，培養(yǎng)并定期檢測T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。①由圖2可知，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí)，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是__________________。細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是__________________。②僅根據(jù)圖1、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少______________（填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所編碼的肽段，則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果?！敬鸢浮浚?5分）（1）編碼乙的 DNA序列起始端無 ATG，轉(zhuǎn)錄出的 mRNA無起始密碼子高考真題分類（2）模板 四種游離的脫氧核苷酸（ dNTP）（3）①進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng) 維持培養(yǎng)液是的 pH ②C2017年海南卷，31題，15分）甲、乙兩名同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物?；卮鹣铝袉栴}：1）以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體，在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是 ________________________________________________。2）甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到______________________。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗，該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是________________________（填“具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”）。3）圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是__________________________。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)_______________形成的。4）若該種植物是一種雜合體的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，可用組織培養(yǎng)方法繁殖，在培養(yǎng)時(shí)，___________（填“能”或“不能”）采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體，原因是 _______________________。【答案】（15分）1）綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性，在一定條件下能發(fā)育成完整的植株。2）葡萄糖、果糖具有完整的細(xì)胞核（3）細(xì)胞分裂素、生長素 脫分化（4）不能 對(duì)雜合體的植株來說， 其體細(xì)胞的基因型相同， 而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到花卉基因型不同于原植株。（2017年高考天津卷 9，20分）玉米自交系（遺傳穩(wěn)定的育種材料） B具有高產(chǎn)、抗病等優(yōu)良性狀，但難以直接培育成轉(zhuǎn)基因植株，為使其獲得抗除草劑性狀，需依次進(jìn)行步驟 I、II試驗(yàn)。Ⅰ．獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米自交系 A，技術(shù)路線如下圖。高考真題分類（1）為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用 2種限制酶，選擇的原則是選）。①Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)

______（單G基因編碼蛋白質(zhì)的序列中，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)③酶切后，G基因形成的兩個(gè)黏性末端序列不相同④酶切后，Ti質(zhì)粒形成的兩個(gè)黏性末端序列相同A．①③ B．①④ C．②③ D．②④2）下表是4種玉米自交系幼胚組織培養(yǎng)不同階段的結(jié)果。據(jù)表可知，細(xì)胞脫分化時(shí)使用的激素是_______________，自交系_______________的幼胚最適合培養(yǎng)成愈傷組織作為轉(zhuǎn)化受體。3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織時(shí)，T-DNA攜帶插入其內(nèi)的片段轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞。篩選轉(zhuǎn)化的愈傷組織，需使用含_____________________的選擇培養(yǎng)基。4）轉(zhuǎn)化過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長。含有內(nèi)含子的報(bào)告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。用 K分別處理以下愈傷組織，出現(xiàn)藍(lán)色的是 _______________（多選）。．無農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織B．無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織C．農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織高考真題分類D．農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織（5）組織培養(yǎng)獲得的轉(zhuǎn)基因植株（核 DNA中僅插入一個(gè) G基因）進(jìn)行自交，在子代含基因的植株中，純合子占 _______。繼續(xù)篩選，最終選育出抗除草劑純合自交系

GA。．通過回交使自交系B獲得抗除草劑性狀（6）抗除草劑自交系 A（GG）與自交系 B雜交產(chǎn)生 F1，然后進(jìn)行多輪回交（下圖） 。自交系B作為親本多次回交的目的是使后代 ______________。（7）假設(shè)子代生活力一致，請(qǐng)計(jì)算上圖育種過程 F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例，并在圖1中畫出對(duì)應(yīng)的折線圖。若回交后每代不進(jìn)行鑒定篩選，直接回交，請(qǐng)?jiān)趫D2中畫出相應(yīng)的折線圖。（8）下表是鑒定含G基因植株的4種方法。請(qǐng)預(yù)測同一后代群體中，4種方法檢出的含G基因植株的比例，從小到大依次是_________________。．．．．方法檢測對(duì)象檢測目標(biāo)檢出的含G基因植株的比例PCR擴(kuò)增基因組DNAG基因X1分子雜交總mRNAG基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物X2抗原-抗體雜交總蛋白質(zhì)G基因編碼的蛋白質(zhì)X3噴灑除草劑幼苗抗除草劑幼苗X4對(duì)Hn繼續(xù)篩選，最終選育出高產(chǎn)、抗病、抗除草劑等優(yōu)良性狀的玉米自交系。高考真題分類【答案】（20分）1）A2）2,4—D乙3）除草劑4）BD（少選得1分，錯(cuò)選或多選不得分）5）1/3（6）積累越來越多自交系 B的遺傳物質(zhì)/優(yōu)良性狀7）每圖中F1和H1比例標(biāo)識(shí)正確得1分，H2和H3比例標(biāo)識(shí)正確得1分8）X4，X3，X2，X12017江蘇33，8分）金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白，某研究小組計(jì)劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增獲得目的基因，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌，用于重金屬廢水的凈化處理。PCR擴(kuò)增過程示意圖如下，請(qǐng)回答下列問題：1）從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA，通過______________獲得___________用于PCR擴(kuò)增。高考真題分類（2）設(shè)計(jì)一對(duì)與

MT

基因兩端序列互補(bǔ)配對(duì)的引物（引物

1和引物

2），為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，在引物中需要增加適當(dāng)?shù)?/p>

______________位點(diǎn)。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成______________，而造成引物自連。（3）圖中步驟

1代表______________，步驟

2代表退火，步驟

3代表延伸，這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。（4）PCR

擴(kuò)增時(shí)，退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過高會(huì)破

_________的堿基配對(duì)。退火溫度的設(shè)定與引物長度、堿基組成有關(guān)，長度相同但 ____________的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。（5）如果PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，則可以采取的改進(jìn)措施有 ___________（填序號(hào)：①升高退火溫度 ②降低退火溫度 ③重新設(shè)計(jì)引物）?！敬鸢浮浚?分）（1）逆轉(zhuǎn)錄 cDNA（2）限制性核酸內(nèi)切酶 堿基互補(bǔ)配對(duì)（3）變性（4）引物與模板 GC含量高5）②③2017年11月浙江卷，32）【加試題】（節(jié)選）回答與植物克隆和動(dòng)物克隆有關(guān)的問題：1）利用植物愈傷組織獲得再生植株主要有兩條途徑：一是由愈傷組織的細(xì)胞先分化產(chǎn)生芽和根后再形成一個(gè)完整植株的__________途徑，二是由愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生胚狀體后再萌發(fā)形成完整植株的胚胎發(fā)生途徑。另外也可不通過愈傷組織階段而直接采用腋芽帶的莖段培養(yǎng)成叢狀苗，再誘導(dǎo)生根獲得再生植株，其原因是腋芽中存在 __________。（2）利用植物克隆培育新品種，一方面可利用帶有目的基因的 __________侵染植株，或?qū)⒛康幕蛲ㄟ^__________方法導(dǎo)入植物細(xì)胞、 組織、器官獲得轉(zhuǎn)基因植株， 另一方面利用異源植株的__________進(jìn)行融合產(chǎn)生雜種植株， 或利用異源植物在試管內(nèi)進(jìn)行 __________，對(duì)其產(chǎn)生的胚進(jìn)行培養(yǎng)產(chǎn)生雜種植株。（3）下列屬于植物克隆和動(dòng)物克隆共有培養(yǎng)方法是A．懸浮培養(yǎng)、器官培養(yǎng) B．貼壁培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)C．器官培養(yǎng)、愈傷組織培養(yǎng) D．原生質(zhì)體培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)【答案】1）器官發(fā)生分生組織（2）農(nóng)桿菌顯微注射原生質(zhì)體受精（3）A2017年4月浙江卷，32）【加試題】（節(jié)選）高考真題分類（二）回答與生態(tài)工程有關(guān)的問題：（1）對(duì)農(nóng)作物秸稈多途徑利用的基本過程示意圖如下，術(shù)。其中“過腹還田”的具體途徑是產(chǎn)生沼氣，這是利用了農(nóng)業(yè)生態(tài)工程中的

貫穿全過程的核心技術(shù)是。將秸稈和動(dòng)物糞便等通過微生物發(fā)酵技術(shù)。

技（2）農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，畜牧業(yè)依賴和受制于種植業(yè)，可以通過種植業(yè)和畜牧業(yè)的提高經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益?！巴烁€林”后，林地的增加可以減少于受損生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)。 使用農(nóng)藥能有效控制農(nóng)業(yè)害蟲， 但也使生態(tài)系統(tǒng)的少，因此利用生物的 進(jìn)行生物防治是今后的發(fā)展方向?！敬鸢浮?/p>

技術(shù)，更有利減（二）（1）物質(zhì)的良性循環(huán) 秸稈→家畜→糞便→農(nóng)田 潔凈可再生的新能源開發(fā)（2）合理優(yōu)化 水土流失 生物多樣性 種間關(guān)系（2016年全國I卷，第40題，15分）某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源 DNA插入到

Ampr或Tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（

Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，

Tetr表示四環(huán)素抗性基因）。有人將此質(zhì)粒載體用

BamHI

酶切后，與用

BamHI

酶切獲得的目的基因混合，加入 DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有 （答出兩點(diǎn)即可）。而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動(dòng)子和終止子。高考真題分類（2）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞不能區(qū)分的，其原因是 ；并且和 的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是 。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還需使用含有的固體培養(yǎng)基。（3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其 DNA 復(fù)制所需的原料來自于 。【答案】（15分）（1）能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因（2）二者均不含氨芐青霉素抗性基因， 在該培養(yǎng)基上均不能生長 含有質(zhì)粒載體 含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒（或答含有重組質(zhì)粒）

二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長

四環(huán)素（3）受體細(xì)胞（2016年全國卷Ⅱ，第40題，15分）下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆晡乳動(dòng)物（二倍體）的流程?；卮鹣铝袉栴}：（1）圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為

2n，則其性染色體的組成可為＿＿＿＿。過程①表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用＿＿＿＿的方法。②代表的過程是＿＿＿＿。2）經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中＿＿＿＿的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。3）若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。4）與克隆羊“多莉（利）”培育成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了＿＿＿?！敬鸢浮浚?5分）（1）XX或XY 顯微操作 胚胎移植（2）遺傳物質(zhì)高考真題分類3）卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響4）動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性（2016年全國卷Ⅲ，第 40題，6分）圖（a）中的三個(gè) DNA片段上依次表示出了 EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)，圖(b)為某種表達(dá)載體的示意圖（載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點(diǎn)是唯一的）。根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問題：（1）經(jīng) BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被 酶切后的產(chǎn)物連接，理由是 。（2）若某人利用圖（ b）所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子，如圖（c）所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有 ，不能表達(dá)的原因是 。（3）DNA

連接酶是將兩個(gè)

DNA

片段連接起來的酶，常見的有

和

，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是

。【答案】（15分）（1）Sau3AⅠ

兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端高考真題分類2）甲和丙甲中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，丙中目的基因插入在終止子的下游，二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄(其他合理答案亦可)（3）E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶T4DNA連接酶（2016海南卷.31題，15分）基因工程又稱為DNA重組技術(shù)，回答相關(guān)問題：（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即和從中分離。（2）利用某植物的成熟葉片為材料，同時(shí)構(gòu)建cDNA文庫和基因組文庫，兩個(gè)文庫相比，cDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少，其原因是。（3）在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是。（4）將目的基因通過基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時(shí)，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有和顆粒。【答案】（15分）（1）人工合成生物材料（每空2分，共4分，其他合理答案可酌情給分）（2）cDNA文庫中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄（或已表達(dá)）的基因，而基因組文庫中含有該植物的全部基因（5分，其他合理答案可酌情給分）（3）RNA（2分）大腸桿菌（或答細(xì)菌）（2分）（4）金粉鎢粉（每空1分，共2分）（2016年高考天津卷7，12分）人血清白蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。（1）為獲取 HSA基因，首先需采集人的血液，提取 _____________合成總cDNA，然后以cDNA為模板，使用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，請(qǐng)用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向。（2）啟動(dòng)子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)

rHSA

的載體，需要選擇的啟動(dòng)子是A．人血細(xì)胞啟動(dòng)子

_____________（填寫字母，單選）。B．水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子高考真題分類C．大腸桿菌啟動(dòng)子

D．農(nóng)桿菌啟動(dòng)子（3）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是____________。（4）人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確空間結(jié)構(gòu)才有活性。與途徑相比，選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢(shì)是________________________________。5）為證明rHSA具有醫(yī)用價(jià)值，須確認(rèn)rHSA與_____________的生物學(xué)功能一致?！敬鸢浮浚?2分）1）總RNA（或mRNA）2）B3）吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化（4）水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對(duì)初始 rHSA多肽進(jìn)行高效加工5）HSA2016年北京卷，31，16分）嫁接是我國古代勞動(dòng)人民早已使用的一項(xiàng)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)技術(shù)，目前也用于植物體內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的基礎(chǔ)研究。研究者將具有正常葉形的番茄（ X）作為接穗，嫁接到葉形呈鼠耳形的番茄（ M）砧木上，結(jié)果見圖 1.（1）上述嫁接體能夠成活，是因?yàn)榧藿硬课坏募?xì)胞在恢復(fù)分裂、

形成

組織后，經(jīng)

形成上下連通的輸導(dǎo)組織。（2）研究者對(duì)

X和

M植株的相關(guān)基因進(jìn)行了分析，結(jié)果見圖

2。由圖可知，

M植株的

P基因發(fā)生了類似于染色體結(jié)構(gòu)變異中的

變異，部分

P基因片段與

L基因發(fā)生融合，形成

P—L

基因（P—L）。以

P—L

為模板可轉(zhuǎn)錄出

，在

上翻譯出蛋白質(zhì)，M

植株鼠耳葉形的出現(xiàn)可能與此有關(guān)。（3）嫁接體正常葉形的接穗上長出了鼠耳形的新葉。 為探明原因，研究者進(jìn)行了相關(guān)檢測，結(jié)果見下表。高考真題分類實(shí)驗(yàn)材料M植株的葉X植株的葉檢測對(duì)象接穗新生葉P—LmRNA有無有P—LDNA有無無①檢測P—LmRNA需要先提取總RNA，再以mRNA為模板出cDNA，然后用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的片段。②檢測P—LDNA需要提取基因組DNA，然后用PCR技術(shù)對(duì)圖2中（選填序號(hào)）位點(diǎn)之間的片段擴(kuò)增。a．Ⅰ~Ⅱb．Ⅱ~Ⅲc．Ⅱ~Ⅳd．Ⅲ~Ⅳ（4）綜合上述實(shí)驗(yàn)，可以推測嫁接體中P—L基因的mRNA?！敬鸢浮浚?6分）（1）愈傷細(xì)胞分化（2）重復(fù)mRNA核糖體（3）①逆轉(zhuǎn)錄②C4）從砧木被運(yùn)輸?shù)浇铀胄律~中，發(fā)揮作用，影響新生葉的形態(tài)2016上海高考卷，第九題，9分）回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達(dá)的問題。在圖27所示的質(zhì)粒pZHZ11（總長為3.6kb，1kb=1000對(duì)堿基）中，lacZ基因編碼β-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能將白色的大腸桿菌染成藍(lán)色。68．若先用限制酶 BamHI切開pZHZ11，然后滅活 BamHI酶，再加DNA連接酶進(jìn)行連接，最后將連接物導(dǎo)入足夠數(shù)量的大腸桿菌細(xì)胞中，則含 3.1kb質(zhì)粒的細(xì)胞顏色為 _____；含3.6kb質(zhì)粒的細(xì)胞顏色為_____。69．若將兩端分別用限制酶 BamHI和BglHI切開的單個(gè)目的基因片段置換 pZHZ11中0.5kb高考真題分類的BamHI酶切片段，形成 4.9kb的重組質(zhì)粒，則目的基因長度為 _____kb。70．上述 4.9kb的重組質(zhì)粒有兩種形式，若用 BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段；那么聯(lián)合酶切同等長度的另一種重組質(zhì)粒，則可獲得_____kb和_____kb兩種DNA片段。71．若將人的染色體 DNA片段先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中克隆并鑒定目的基因，然后再將獲得的目的基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞中表達(dá)， 最后將產(chǎn)生的藥物蛋白注入小鼠體內(nèi)觀察其生物功能是否發(fā)揮，那么上述過程屬于 _____。A．人類基因工程 B．動(dòng)物基因工程C．植物基因工程 D．微生物基因工程【答案】（9分）68．白色白色和藍(lán)色/白色或藍(lán)色69．1.870．1.43.571．C（2016江蘇33）下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請(qǐng)回答下列問題：（1）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用

______兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過

__________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒，需將其轉(zhuǎn)入處于

__________態(tài)的大腸桿菌。（2）為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加

__________，平板上長出的菌落，常用

PCR鑒定，所用的引物組成為圖

2中_____________。（3）若

BamHⅠ酶切的

DNA

末端與

BclⅠ酶切的

DNA

末端連接，連接部位的

6個(gè)堿基對(duì)序列為

________________________，對(duì)于該部位，這兩種酶

_____________（填“都能”、“都不能”或“只有一種能”）切開。高考真題分類4）若用Sau3AⅠ切圖1質(zhì)粒最多可能獲得_______種大小不同的DNA片段?！敬鸢浮浚?分）（1）BclI和HindⅢ 連接 感受（2）四環(huán)素 引物甲和引物丙（3） 都不能4）72016年浙江理綜生物，32，18分）若某研究小組用普通綿羊通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了轉(zhuǎn)基因綿羊甲和乙各1頭，具體見下表。請(qǐng)回答：（1）A+基因轉(zhuǎn)錄時(shí)，在的催化下，將游離核苷酸通過鍵聚合成RNA分子。翻譯時(shí),核糖體移動(dòng)到mRMA的,多肽合成結(jié)束。（2）為選育黑色細(xì)毛的綿羊，以綿羊甲、綿羊乙和普通綿羊?yàn)橛H本雜交獲得F1，選擇1F中表現(xiàn)型為的綿羊和的綿羊雜交獲得F2。用遺傳圖解表示由F1雜交獲得F2的過程。（3）為獲得穩(wěn)定遺傳的黑色細(xì)毛綿羊,從F2中選出合適的1對(duì)個(gè)體雜交得到F3,再從F3中選出2頭黑色細(xì)毛綿羊（丙、丁)并分析A+和B+基因的表達(dá)產(chǎn)物,結(jié)果如下圖所示。不考慮其他基因?qū)+和B+基因表達(dá)產(chǎn)物量的影響，推測綿羊丙的基因型是，理論上綿羊丁在F3中占的比例是?！敬鸢浮浚?8分）高考真題分類（1）RNA聚合酶 磷酸二酯 終止密碼子（2）黑色粗毛 白色細(xì)毛（3）A+A+B+B-1/162016年浙江卷，自選模塊，18）（一）下面是關(guān)于獲得能產(chǎn)生人干擾素大腸桿菌的問題。請(qǐng)回答：（1）用限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別人干擾素基因和質(zhì)粒中一段特定的

①并切割，然后用

②連接形成重組

DNA

。該質(zhì)粒是一種含抗生素抗性基因的

③ 核酸分子。A．雙鏈環(huán)狀

B．單鏈環(huán)狀

C．雙鏈線狀

D．單鏈線狀（2）將含人干擾素基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入到大腸桿菌，經(jīng)含有終獲得能產(chǎn)生人干擾素的大腸桿菌。

④的培養(yǎng)基篩選等過程，最（二）某農(nóng)戶建立了小型的“蔬菜 -雞、豬-沼氣”系統(tǒng)。請(qǐng)回答：1）這一系統(tǒng)屬于人工干預(yù)下的⑤生態(tài)系統(tǒng)，其生物組成成分包括生產(chǎn)者、消費(fèi)者和⑥，在分析該生態(tài)系統(tǒng)的經(jīng)濟(jì)效益時(shí)，除了考慮這三者的投人與產(chǎn)出外，還要考慮⑦的投入（2）在該生態(tài)系統(tǒng)中，利用發(fā)酵技術(shù)產(chǎn)生沼氣開發(fā)生物能屬于 ⑧ 的生態(tài)工程。A．生物多樣性保護(hù)和持續(xù)利用 B．節(jié)水和廢水處理與利用C．山區(qū)小流域綜合治理與開發(fā) D．潔凈及可再生能源系統(tǒng)組合利用【答案】（18分）（一）（1）①核苷酸序列； ②DNA連接酶； ③A（2）④抗生素；高考真題分類（二）（1）⑤庭院； ⑥分解者； ⑦勞動(dòng)者；2）⑧D2016