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甘油三酯(TG)測(cè)定操作規(guī)程〔SOP〕一、用途〔TG〕的含量。二、臨床意義〔一〕概述甘油三酯〔TG〕分子量約為885道爾頓,是血液中主要的脂質(zhì)成分,主要參與體內(nèi)能量代謝?!捕撑R床意義甘油三酯是最常用的高脂血癥篩查指標(biāo)。甘油三酯上升常見(jiàn)于糖尿病、腎病綜合征、脂肪肝及其SLETG上升。TG甘油三酯降低見(jiàn)于甲狀腺功能低下,腎上腺皮質(zhì)功能降低和肝功能?chē)?yán)峻低下。甘油三酯與HDL-C間呈負(fù)相關(guān),而HDL-C和冠心病的流行呈負(fù)相關(guān)。測(cè)定血清TGHDL-CTG定治療方案有意義。血清TG>2.8mmol/L時(shí),HDL-C下降的時(shí)機(jī)增大?!踩翅t(yī)學(xué)打算水平0.45mmol/L:此值在正常下限四周,低于此值多與養(yǎng)分不良有關(guān),應(yīng)進(jìn)展正確的診斷和治療。1.69mmol/L:年輕男性此值接近參考范圍上限,為動(dòng)脈粥樣硬化性心血管的一個(gè)危急因子,應(yīng)賜予病人供給適宜的預(yù)防建議。4.52mmol/L:高于此水尋常預(yù)示會(huì)發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化性三、檢驗(yàn)原理甘油三酯+H2OP甘油+脂肪酸甘油+ATP 3-磷-甘油3-磷酸-甘油+O2PO磷酸二羥丙酮+H22H22+4-AAP4-氯酚O醌亞胺+H2O醌亞胺的生成使505nm波特長(zhǎng)吸光度上升,吸光度的變TGTG四、樣品血液樣品原則上采集空腹血〔禁食12小時(shí);患者處于安靜、休息狀態(tài),削減患者由于運(yùn)動(dòng)、飲食帶來(lái)的影響;靜1分鐘內(nèi)采血,回血后馬上松開(kāi);正確使用抗凝劑;防止溶血;防止過(guò)失性采樣。防止樣品被污染、防止樣品及唯一性標(biāo)志的喪失和混淆,防止樣品對(duì)環(huán)境的污染、水分蒸發(fā)。TG〔肝素或EDTA抗凝。樣品應(yīng)在低溫條件下運(yùn)輸保存,樣品中TG在2~8℃7-20℃保存可穩(wěn)定數(shù)月。五、試劑R:試劑〔LPL〕甘油激酶〔GK〕
4.5KU/L1KU/L甘油磷酸氧化酶〔GPO〕2KU/L辣根過(guò)氧化物酶〔POD〕2KU/L40.3mmol/L〔4-AAP〕甘油三酯校準(zhǔn)品 不同批號(hào)試劑中各組份不能互換?!捕吃噭╊A(yù)備試劑為即用型液體試劑,開(kāi)瓶裝載即可使用,用后應(yīng)準(zhǔn)時(shí)冷藏保存。〔三〕試劑的保存及穩(wěn)定性不能冰凍試劑。未開(kāi)瓶的試劑應(yīng)在2~8℃密閉避光貯存,穩(wěn)定期為瓶簽標(biāo)示的有效期。開(kāi)瓶后的試劑應(yīng)在2~830〔四〕試劑性能可承受的指標(biāo)空白吸光度:試劑空白在波長(zhǎng)505nm處,10mm光徑下,吸光度值≤0.500。〔五〕試劑使用中的留意事項(xiàng)嚴(yán)格依據(jù)試劑說(shuō)明書(shū)的要求使用試劑。試劑2~8℃密閉避光貯存可穩(wěn)定至瓶簽標(biāo)示的有效期。對(duì)超過(guò)有效期的試劑不能使用。嚴(yán)禁放置0℃以下保存。碳,導(dǎo)致pH當(dāng)試劑變混濁或被污染或空白吸光度值>0.500時(shí),說(shuō)明試劑已失效,應(yīng)棄去?!擦愁A(yù)防危急發(fā)生的留意事項(xiàng)使用時(shí)應(yīng)避開(kāi)與人體接觸,當(dāng)試劑誤入口中或眼中,或請(qǐng)承受醫(yī)生的治療?!财摺程幚韽U棄物時(shí)的留意事項(xiàng)試劑反響后所產(chǎn)生的廢液及使用后的包裝材料應(yīng)集中收集后依據(jù)相關(guān)法規(guī)進(jìn)展廢物處理。六、操作步驟根本參數(shù)方法:終點(diǎn)法樣品/試劑:1/100主波長(zhǎng):505nm反響溫度:37℃副波長(zhǎng):none參加物
10min空白〔B〕校準(zhǔn)〔C〕測(cè)定〔U〕樣品〔μl〕 -- -- 3校準(zhǔn)品〔μl〕 -- 3 --蒸餾生理鹽〔μl3試劑R〔μl〕 300
--300
--300混勻,37℃恒溫10分鐘,505nm波特長(zhǎng)以空白管調(diào)零測(cè)定吸光度A。操作流程圖10分鐘時(shí)間:10分鐘
副波長(zhǎng):none測(cè)定讀數(shù)R:300μl:3μl計(jì)算Au樣品TG〔mmol/L〕=Ac七、參考值范圍0.52-1.70mmol/L
×Cc八、留意事項(xiàng)〔一〕本試劑盡管具有較好的抗穿插污染力量,但仍應(yīng)依據(jù)儀器性能及試驗(yàn)室條件做好防止穿插污染的工作?!捕吃噭┡c樣品用量可依據(jù)不同儀器的需要,在試劑樣品體積比例不變的條件下,適當(dāng)增加或削減試劑與樣品的用量?!踩吵惺鼙匾念A(yù)防措施使用試劑,試劑使用后應(yīng)馬上蓋緊瓶蓋,避開(kāi)污染?!菜摹硿?zhǔn)確的結(jié)果取決于準(zhǔn)確校正的儀器、溫度準(zhǔn)時(shí)間的控制?!参濉乘幬?、抗凝劑、促凝劑、分別膠等其他物質(zhì)都可能對(duì)測(cè)定值造成無(wú)法預(yù)知的干擾。當(dāng)疑心標(biāo)本存在這些干擾物質(zhì)的影響時(shí),應(yīng)停藥后或承受無(wú)任何添加劑的血清進(jìn)展測(cè)定?!擦矼G劑中含有膽酸鈉,對(duì)總膽汁酸的檢測(cè)也有干擾;且請(qǐng)勿與Trinde
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