基因操作原理01課件

基

因

操

作

原

理PrinciplesofGeneManipulation

一、什么是基因操作

核心部分為cloning大多數(shù)西方國家對此都有一個精確的法律定義，(由于政府的法律約束),在英國將基因操作定義為“PrinciplesofGeneManipulation”,BlackwellScientificPublications,RW.OLD&SBPrimrose,1985.將在細胞外產(chǎn)生的核酸分子插入病毒,質粒或其它載體系統(tǒng)中再整合到那些本來不含該類物質的宿主中從而形成一種新的可連續(xù)繁殖的有機體這里所說的基因操作并不是一個法律概念，除了包括基因克隆外，還包括基因的表達，調(diào)控，檢測等，與基因研究相關的內(nèi)容。了解對基因的研究是如何實施的二、本課程在學科發(fā)展中的地位這門課以前叫“分子克隆I”實驗課為“分子克隆II”利用分子生物學原理,為在分子或基因水平的研究服務的學科20世紀是生物學發(fā)展最為迅速的時期，1953年由于認識了DNA的雙螺旋結構，從而揭開了分子生物學研究的熱潮。在整個生物學研究進程或研究層次來說，其發(fā)展過程涉及到個體、組織器官、細胞、亞細胞水平同時由于遺傳學的興起與發(fā)展，DNA作為生命遺傳信息的物質基礎被確定下來，從而導致分子生物學的誕生。

從學科發(fā)展的角度來看，傳統(tǒng)的分子生物學就好象是高級生物化學，闡述基因或者說DNA（核酸）的靜態(tài)和動態(tài)化學本質。

目前的分子生物學正朝著發(fā)育、結構和遺傳生物學的方向發(fā)展，為深層次闡明生命的現(xiàn)象和本質服務。

如果說傳統(tǒng)的分子生物學是靜態(tài)分子生物學的話，那么這些學科可以說是動態(tài)分子生物學，即在分子水平（核酸）上，研究生物的生長、分化、死亡、以及遺傳和變異的內(nèi)在規(guī)律。生物科學

領域醫(yī)學生物農(nóng)業(yè)生物基礎生物學目的要求掌握基因操作中基本的普遍應用的原理并能自主設計通用操作方法和策略對于涉及到具體的學科或領域的原理不在此范圍內(nèi)不設計具體的材料參考書籍１.MolecularCloningV2.0,1989

分子克隆實驗指南

Edition3,2001.2.基因工程原理第二版吳乃虎科學出版社1998/20003.分子生物學試劑產(chǎn)品目錄

NewEnglandBioLabs參考書籍其它基因及其操作原理精編分子生物學實驗指南

Internet

PrinciplesofGeneManipulation(6thed)BlackwellScientificPublicationsSPrimrose,RTwyman,BOLD,2001.二、基因的基本概念

基因是遺傳信息的基本單位

從物質結構上看，基因是染色體組核酸分子基因是作為遺傳物質的核酸分子上的一段片段，可以是連續(xù)的，也可以是不連續(xù)的，可以是DNA也可以是RNA，可以存在于染色體上，也可存在于染色體之外（如質粒、噬菌體等）三、基因的基本結構組成編碼區(qū)

ORF啟動子

promoterRBSribosomalbindingsite終止區(qū)

terminatorflankingsequenceupstream/downstreamCap/tail三、基因克隆的通用策略基因克隆的技術路線...GAATTC......CTTAAG......G...CTTAAAATTC...G...EcoRI基因克隆的技術路線...GAATTC......CTTAAG......G...CTTAAAATTC...G...EcoRI基因克隆的技術路線酶切酶切連接...GAATTC......CTTAAG......G...CTTAAAATTC...G...EcoR