GMP質(zhì)量體系土霉素片中間產(chǎn)品檢驗(yàn)操作規(guī)程

目的：為檢驗(yàn)土霉素片中間產(chǎn)品規(guī)定一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的程序，以便獲得準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。范圍：適用于土霉素片中間產(chǎn)品的檢驗(yàn)。職責(zé)：檢驗(yàn)員、檢驗(yàn)室主任對(duì)本規(guī)程實(shí)施負(fù)責(zé)。規(guī)程：1性狀：本品為淡黃色片。2鑒別2.1試劑與儀器2.1.1乙醇2.1.2燒杯2.1.3水浴鍋2.1.4量杯2.1.5電子天平(萬分之一克)2.1.6電爐2.1.7漏斗2.2項(xiàng)目與步驟2.2.1取本品細(xì)粉適量(約相當(dāng)于土霉素25mg)，加乙醇25ml，浸漬20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)胀撩顾氐蔫b別法(1)項(xiàng)試驗(yàn)，顯相同的反應(yīng)為符合規(guī)定。3檢查3.1試劑與儀器3.1.1電子天平(萬分之一克)3.1.2AB-2片劑脆碎度儀3.1.3BJ2A片劑崩解儀3.2項(xiàng)目與步驟3.2.1重量差異：照片劑重量差異檢查法(SOP-QC-334-00)檢查，±7.5%重量差異限度為符合規(guī)定。3.2.2崩解時(shí)限：取本品6片,按崩解時(shí)限檢查法(SOP-QC-330-00)檢查，各片應(yīng)在15分鐘內(nèi)全部崩解，如有1片崩解不完全，應(yīng)另取6片按同樣方法復(fù)試，全部崩解完全均為符合規(guī)定。3.2.3脆碎度：取本品約25片，用吹風(fēng)機(jī)吹去脫落的粉末，精密稱重，按脆碎度檢查法(SOP-QC-333-00)檢查，減失重量不得過1%，且不得檢出斷裂、龜裂及粉碎的片。如減失重量超過1%時(shí)，可復(fù)檢2次，3次的平均減失重量不得過1%，并不得檢出斷裂、龜裂及粉碎的片，為符合規(guī)定。4含量測(cè)定：取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱出適量（約相當(dāng)于土霉素0.25g），置250ml量瓶中，加鹽酸(0.1mol/L)50ml，振搖,使土霉素溶解后,再加滅菌水稀釋至每1ml中約含1,000單位的懸浮液；搖勻，靜置，精密量取懸浮液適量，照抗生素微生物檢定法(SOP-QC-339-00)操作。4.1試劑與儀器4.1.1抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅱ(6.5～6.6)4.1.2磷酸鹽緩沖液(PH6.0)4.1.3藤黃微球菌懸液4.1.4土霉素標(biāo)準(zhǔn)品4.1.5容量瓶(50ml,100ml)4.1.6滅菌刻度吸管,滴管4.1.7雙碟4.1.8陶瓦蓋4.1.9鋼管放置器4.1.10電熱隔水培養(yǎng)箱4.1.11稱量瓶4.1.12CHB-1抗生素效價(jià)測(cè)量?jī)x4.1.13電子天平(萬分這一克)4.1.14超凈工作臺(tái)4.1.15酒精燈4.1.16三角燒瓶(50ml,150ml)4.1.17量筒(100ml)4.1.18鑷子,接種棒4.2檢驗(yàn)步驟4.2.1培養(yǎng)基的制備：稱取抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅱ(PH6.5～6.6)28.5g，加水1000ml，加熱溶解，分裝，121℃高壓滅菌30分鐘，備用。4.2.2磷酸鹽緩沖液(PH6.0)制備：稱取磷酸氫二鉀2g與磷酸二氫鉀8g，加水使成1000ml，濾過，經(jīng)121℃蒸氣滅菌30分鐘，備用。4.2.3藤黃微球菌懸液的制備：取藤黃微球菌(28001)的營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種于盛有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在26～27℃培養(yǎng)24小時(shí)，臨用時(shí)用培養(yǎng)基Ⅲ將菌苔洗下，合并菌液至滅菌大試管中，備用。4.2.4標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備：4.2.4.1將標(biāo)準(zhǔn)品從冰箱取出，使與室溫平衡，準(zhǔn)確稱取土霉素對(duì)照品58mg置50ml容量瓶中,加(0.1mol/L)鹽酸溶液5ml溶解，加滅菌水至刻度，精密吸取10ml置25ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH7.8)稀釋至刻度，備用。4.2.4.2高劑量標(biāo)準(zhǔn)品的制備：精密吸取4.2.4.1制備的標(biāo)準(zhǔn)溶液2ml，置50ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH6.0)稀釋至刻度，備用。4.2.4.3低劑量標(biāo)準(zhǔn)品的制備：精密吸取4.2.4.1制備的標(biāo)準(zhǔn)溶液2ml，置100ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH6.0)稀釋至刻度，備用。4.2.5樣品溶液的制備：4.2.5.1取本品20片，研細(xì)，精密稱取重約0.66g置250ml容量瓶中，加(0.1mol/L)鹽酸液100ml，振搖，使土霉素溶解后，再加滅菌水稀釋至刻度，搖勻，靜置，精密量取上清液10ml置25ml容瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH6.0)稀釋至刻度，備用。4.2.5.2高劑量樣品溶液的制備：，精密吸取4.2.5.1制備的樣品溶液5ml，置50ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH6.0)稀釋至刻度，備用。4.2.5.3低劑量樣品的溶液的制備：精密吸取4.2.5.1制備的樣品溶液5ml，置100ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(PH6.0)稀釋至刻度，備用。4.2.6雙碟的制備：按抗生素微生物檢定法(SOP-QC-339-00)操作。4.2.7小鋼管的放置：按抗生素微生物檢法(SOP-QC-339-00)操作。4.2.8滴管、培養(yǎng)與測(cè)量：按抗生素微生物檢法(SOP-QC-339-00)操作。5記錄與計(jì)算：用電腦測(cè)試，計(jì)算、統(tǒng)計(jì)分析的打印紙貼附于記錄后。本品含土霉素(C22H24H2O9)為標(biāo)示量的90.0%～110.0%為符合規(guī)定。按下列計(jì)算土霉素的最終效價(jià)：PT=P×PT：為樣品的真實(shí)效價(jià)P：為樣品(相當(dāng)于標(biāo)示量或估計(jì)效價(jià))的百分?jǐn)?shù)對(duì)照品