實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)課件

獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)第九章實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)血液樣本的采取與抗凝血液樣本的采取

采血的部位和方法，根據(jù)檢驗(yàn)的項(xiàng)目、所需血量和動(dòng)物種類(lèi)的不同，可分為毛細(xì)血管采血、靜脈采血和心臟采血。毛細(xì)血管采血法除血沉測(cè)定和紅細(xì)胞壓積測(cè)定需較多量血液外，其他各項(xiàng)測(cè)定均可在耳尖、耳緣及耳靜脈處按毛細(xì)血管采血。采血前先剪毛，酒精棉球消毒，待酒精揮發(fā)后，用消毒的干燥的針頭迅速刺入2~3mm深，讓血液自然流出，且勿擠壓以免混入過(guò)多組織液。流出的第一滴血，可用于制作血片，然后用干棉球擦去局部的剩余血液，用流出的第二滴血液作紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定，若利用第三滴血時(shí)，仍要將第二滴血擦干，否則流出的血不能形成滴狀，不易吸取。靜脈采血法馬、牛、羊可由頸靜脈采血。雞可由翼下靜脈采血，即用細(xì)針頭刺入翼下靜脈后，任血液自行流出并接入試管中。犬、貓可于小腿外側(cè)跖背外側(cè)靜脈或前臂內(nèi)側(cè)皮下靜脈采血。局部剪毛消毒，用止血帶扎住采血部上端，使靜脈怒張，用消毒、干燥的注射器接上針頭，針頭斜上面刺入靜脈采血，待抽至所需量后，先放松止血帶，再用消毒棉球按住傷口，拔出針頭。除去針頭，將血液緩緩注入清潔的試管內(nèi)。需抗凝血液時(shí)，試管內(nèi)加抗凝劑，并立即混勻，以免凝固。心臟采血法多用于雞及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多量血液時(shí)，雞可由胸腔入口處向心臟刺入由于心腔壓力較靜脈高，血液自然涌入注射器，兔及雞亦可在左側(cè)胸部第1、2肋間，心搏動(dòng)明顯處，針頭與胸壁呈垂直方向緩緩刺入。獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)血液的抗凝草酸鈉是常用的抗凝劑，每1.5~2.0mg可抗凝1.0ml血液，可用于血液常規(guī)檢驗(yàn)。因?qū)t細(xì)胞大小有影響，故不能用紅細(xì)胞壓積測(cè)定，如測(cè)定紅細(xì)胞壓積時(shí)，可用雙草酸鹽抗凝劑或乙二胺四乙酸二鈉。雙草酸鹽抗凝劑

草酸鈉0.8g草酸銨1.2g蒸餾水加至100ml溶解后吸取0.5ml，加入供采血試管或小瓶中，置干燥箱內(nèi)（溫度不超過(guò)80℃）烘干備用，可供5ml全血抗凝。獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)肝素肝素價(jià)格最貴，其優(yōu)點(diǎn)是抗凝作用強(qiáng)，不影響血細(xì)胞的體積，不致溶血等，可用于多種血液生物化學(xué)分析和紅細(xì)胞壓積測(cè)定。但過(guò)量的肝素可引起白細(xì)胞聚集和血小板減少，故不適用于白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)，也不適用于血涂片檢查，因其在瑞氏染色時(shí)會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色背景，更不能用于凝血象的檢查。血液的抗凝通常用肝素粉劑配成1g/L水溶液。取0.5ml置小瓶?jī)?nèi)，放于37～50℃中烘干后貯于冰箱內(nèi)保存。能使5ml血液不凝固，肝素抗凝劑應(yīng)及時(shí)使用，放置過(guò)久易失效。懷疑傳染病時(shí)，采血應(yīng)防止到處流散，檢后殘余血液及所用器皿應(yīng)進(jìn)行消毒處理。獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞沉降率測(cè)定魏氏法魏氏血沉管長(zhǎng)30cm，內(nèi)徑2.5mm管上有0~200的刻度，每一刻度的距離為1mm，其溶積為1ml。先向10ml刻度試管中加入3.8%枸櫞酸1ml，再自靜脈采血4ml，顛倒混合數(shù)次，然后用魏氏血沉管吸取抗凝劑至刻度0處，擦去管外血液，在室溫條件下，垂直放于血沉管架上，經(jīng)15、30、45、60min，分別觀察并記錄細(xì)胞沉降數(shù)值。獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞沉降率測(cè)定“六五”型血沉管法“六五”型血沉管法內(nèi)徑0.9cm，全長(zhǎng)17~20cm，管上有100個(gè)刻度容積為10ml。于血沉管中加入抗凝劑（草酸鈉0.015~0.02g，枸櫞酸鈉粉末0.04~0.05g）,自頸靜脈直接采血至刻度“0”處，立即充分混合，于室溫垂直立于試管架上，鏡15、30、45、60min各觀察一次，并記錄紅細(xì)胞沉降的數(shù)值。獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)血紅蛋白測(cè)定紅細(xì)胞遇酸溶解，游離出血紅蛋白，并被酸化為褐色的酸性血紅素，稀釋后與標(biāo)準(zhǔn)色柱比色，即可求得血紅蛋白的含量。血紅蛋白試紙測(cè)定法器材應(yīng)備有測(cè)定血紅蛋白試紙和4g%~15g%血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)比色板。測(cè)定時(shí)，取試紙一條，吸附被檢血液一小滴，待血完全浸透后，立即置于所附標(biāo)準(zhǔn)色板的小孔下，肉眼與色板色澤進(jìn)行比較，選擇顏色相同或近似者，即得100ml血液所含血紅蛋白的克數(shù)。沙利氏血紅蛋白測(cè)定法沙利氏血紅蛋白計(jì)由比色架、標(biāo)準(zhǔn)比色柱、血紅蛋白測(cè)定管及血紅蛋白吸管組成。測(cè)定管有兩個(gè)刻度標(biāo)志，一側(cè)的2~24刻度表示100ml血液中含有的血紅蛋白克數(shù)；另一側(cè)有20~160刻度，表示100ml血液中所含血紅蛋白的百分?jǐn)?shù)。獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)血紅蛋白測(cè)定動(dòng)物種類(lèi)血紅蛋白值（克/100毫升）馬、騾11.0（9.0~13.0）牛10.0（9.0~11.0）水牛8.3（8.0~9.0）羊9.8（7.8~11.6）豬10.5（9.5~12.0）雞12.5（10.0~14.5）血紅蛋白增高見(jiàn)于各種原因引起的血液濃縮，如腹瀉、嘔吐、大汗、多尿及腸梗阻等。血紅蛋白減少見(jiàn)于各種貧血，如馬鼻疽、牛結(jié)核、牛羊肝片吸蟲(chóng)病、仔豬蛔蟲(chóng)等。獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是將一定量的供檢血液經(jīng)一定倍數(shù)稀釋后，計(jì)數(shù)一定容積的紅細(xì)胞數(shù)，并換算為每立方毫米血液內(nèi)含量。獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)用冰醋酸將紅細(xì)胞破壞后，計(jì)算每立方毫米內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。健康動(dòng)物白細(xì)胞數(shù)（個(gè)/立方毫米）動(dòng)物種類(lèi)平均數(shù)值變動(dòng)范圍馬80007000~9000黃牛、奶牛75007000~8000水牛88008000~9000綿羊85008000~9500山羊100007000~13000豬1300011000~16000雞2000018000~30000白細(xì)胞增多可見(jiàn)于多數(shù)細(xì)菌性感染和炎癥，如豬丹毒、豬肺疫、結(jié)核、馬鼻疽、馬腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病時(shí)以白細(xì)胞的顯著增多為特征。白細(xì)胞減少主要見(jiàn)于某些病毒性傳染病，如豬瘟、流感等；某些重度疾病的后期；長(zhǎng)期應(yīng)用某些藥物（如氯霉素等）；梨形蟲(chóng)病等。獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)以百分率表示各種類(lèi)型白細(xì)胞間的數(shù)量關(guān)系，稱(chēng)為白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)。健康動(dòng)物各類(lèi)白細(xì)胞分類(lèi)數(shù)值（%）動(dòng)物種類(lèi)嗜堿性細(xì)胞嗜酸性細(xì)胞嗜中性細(xì)胞淋巴細(xì)胞大單核細(xì)胞幼稚型桿狀核分葉核馬牛水牛豬羊0.50.50.50.50.54.54.010.02.55.50.51.04.04.04.55.01.053.033.035.035.033.035.056.047.053.057.03.02.03.03.03.0獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿血液檢驗(yàn)臨床意義白細(xì)胞增多嗜中性白細(xì)胞增多：見(jiàn)于豬、牛巴氏桿菌病、馬腺疫、肺炎及化膿性感染等。嗜酸性白細(xì)胞增多：見(jiàn)于某些蠕蟲(chóng)病、過(guò)敏性疾病及濕疹等。淋巴細(xì)胞增多：見(jiàn)于結(jié)核、鼻疽、布氏桿菌病、豬瘟及牛梨形蟲(chóng)病。單核細(xì)胞增多：見(jiàn)于敗血性疾病，某些梨形蟲(chóng)病及李氏桿菌等。白細(xì)胞減少嗜中性白細(xì)胞減少：見(jiàn)于病毒性傳染病、藥物中毒（如長(zhǎng)期服用抗生素）、各種疾病的垂危期。嗜酸性白細(xì)胞減少：見(jiàn)于敗血癥、某些病毒病及牛梨形蟲(chóng)病等。淋巴細(xì)胞減少：多為嗜中性白細(xì)胞增多而造成的相對(duì)性變化。尿液檢驗(yàn)?zāi)蛞簷z驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿液常規(guī)檢查注意事項(xiàng)1.供檢尿應(yīng)在清晨空腹采取的新鮮尿液為佳。因?yàn)檫@種尿液是在夜間形成的，受外界因素影響少。2.供檢尿液最好是導(dǎo)尿管采集的尿液。因?yàn)檫@種尿液沒(méi)有尿道、陰道污染物污染。3.采集尿液后，應(yīng)立即檢查，若不能及時(shí)檢驗(yàn)，可加防腐劑，即每100ml尿液中加入福爾馬林3~4滴或麝香草酚0.1g。尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿常規(guī)檢查內(nèi)容尿液一般物理性狀的檢查，包括透明度、尿色及氣味等。尿液一般化學(xué)性狀的檢查，包括酸堿度、尿蛋白質(zhì)、血液、血紅蛋白的檢查。透明度盛尿液于玻璃容器內(nèi)，透光觀察。正常的馬尿因含有碳酸鈣及不溶性堿性鹽，故馬尿混濁不清；牛及其他家畜因碳酸鈣及不溶性鹽很少，故澄清透明。如馬尿透明時(shí)，是喂精飼料過(guò)多或骨軟癥、胃腸炎的象征；牛尿變?yōu)榛鞚釙r(shí)，常是腎炎、尿路炎癥的表現(xiàn)。尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿常規(guī)檢查內(nèi)容尿色正常尿?yàn)樯铧S色或淡黃色。病理情況下有紅尿，是泌尿系統(tǒng)出血、肌紅蛋白尿或血紅蛋白尿；尿呈黃綠褐色是膽紅質(zhì)尿、尿膽素原尿的特征。尿氣味尿發(fā)氨臭，是膀胱炎、膀胱麻痹的表現(xiàn)，是由于細(xì)菌作用，使尿液分解產(chǎn)生氨的結(jié)果；尿發(fā)腐敗臭，是膀胱、尿道有潰瘍、壞死或化膿性炎癥，由于蛋白質(zhì)腐敗分解而發(fā)生；尿發(fā)大蒜臭，見(jiàn)于牛酮血病、綿羊妊娠病，由于尿中含大量酮體的結(jié)果。尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿沉渣檢驗(yàn)

尿沉渣檢查，在臨床上很重要，故一般住院病畜應(yīng)作此項(xiàng)檢查。檢查時(shí)應(yīng)特別注意識(shí)別尿液中各種有形成分，各種上皮細(xì)胞、膿球、細(xì)菌及無(wú)機(jī)鹽等。尿常規(guī)檢查內(nèi)容尿中有機(jī)沉渣檢查無(wú)機(jī)鹽沉渣檢查

尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿有機(jī)沉渣檢查紅細(xì)胞：尿中出現(xiàn)紅細(xì)胞，是泌尿系統(tǒng)出血的特征。紅細(xì)胞的形態(tài)，在新鮮尿液呈圓形淡紅綠色；酸性尿中，則紅細(xì)胞皺縮，邊緣呈鋸齒狀；堿性尿中，紅細(xì)胞膨脹或破壞，呈現(xiàn)陰影。白細(xì)胞：正常尿中僅有白細(xì)胞，尿液中最常見(jiàn)的是中性白細(xì)胞，而淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞均少見(jiàn)。尿中出現(xiàn)白細(xì)胞是腎、膀胱的炎癥。在新鮮尿中其形態(tài)比紅細(xì)胞大有核，易識(shí)別；酸性尿中其形態(tài)比較完整，加稀醋酸后其核更明顯；堿性尿中則膨脹而清晰。腎上皮細(xì)胞：比白細(xì)胞約大1/3，呈圓形，有一個(gè)較大的核，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有小顆粒，易識(shí)別。若尿中出現(xiàn)多量腎上皮細(xì)胞時(shí)，是腎實(shí)質(zhì)性炎癥。尾狀上皮細(xì)胞：呈梨形或梭形，比白細(xì)胞大2—4倍。有一個(gè)圓形或橢圓形的核，這種細(xì)胞，來(lái)自腎盂、膀胱、尿道粘膜的深層，尿中出現(xiàn)時(shí)是重劇炎癥，尿道炎的居多。

尿中的上皮細(xì)胞1.腎上皮細(xì)胞2.腎盂及尿路上皮細(xì)胞3.膀胱上皮細(xì)胞尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿扁平上皮細(xì)胞：細(xì)胞大而扁平，核小而圓，細(xì)胞邊緣稍卷起，或幾個(gè)在一起，容易與其他細(xì)胞區(qū)別。它來(lái)自膀胱、尿道的表層，出現(xiàn)時(shí)膀胱、尿道的炎癥，但膀胱炎居多。管型：管型是腎有炎癥的標(biāo)志。當(dāng)腎患病時(shí)，由腎小球?yàn)V出的蛋白質(zhì)在腎小管內(nèi)變性凝固或蛋白質(zhì)與其他成分相結(jié)合形成管型。尿中出現(xiàn)管型時(shí)，是腎病的特征。有機(jī)沉渣檢查尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿有機(jī)沉渣檢查顆粒管型：是在透明管型內(nèi)含有粗大的或細(xì)小的顆粒，這種顆粒是腎小球上皮變性崩解的顆粒或蛋白質(zhì)凝固的顆粒，其與透明管型不同的是表面有顆粒，但較透明管型而短，因混有血液的色素，故呈黃色或褐色，出現(xiàn)顆粒管型時(shí)，表現(xiàn)腎小球有嚴(yán)重的損害，見(jiàn)于重劇性腎炎。蠟樣管型：一般較粗，末端往往折斷，邊緣往往有缺口，結(jié)構(gòu)均勻，輪廓明顯，有玻璃樣閃光，表面類(lèi)似蠟塊，長(zhǎng)而直，很少有彎曲，比透明管型寬，色較灰暗，是腎小管上皮淀粉樣變性的結(jié)果，表示腎小管有嚴(yán)重變性或壞死。是重劇性腎炎之癥，予后多不良。尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿有機(jī)沉渣檢查脂肪管型：為上皮管型和顆粒管型中的脂肪性產(chǎn)物所形成，是一種較大的管型，表面蓋以脂肪滴和脂肪酸結(jié)晶，根據(jù)其強(qiáng)屈光的化學(xué)性質(zhì)，不難區(qū)別，它不溶于酸和堿，而可溶于醚中見(jiàn)于腎脂肪變性性炎癥。紅細(xì)胞管型：是在透明或顆粒管型內(nèi)有多量紅細(xì)胞的一種管型，見(jiàn)于腎出血性炎癥。尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿液檢查結(jié)果的分析判定紅尿紅尿即尿呈紅色，除泌尿系統(tǒng)出現(xiàn)出血性炎癥外，肌紅蛋白和血紅蛋白尿病，尿也呈紅色，應(yīng)注意鑒別。尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿根據(jù)尿液中異常成分分析判定疾病1尿液中有蛋白、血液、尿路上皮細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞時(shí)，是泌尿系統(tǒng)的疾病。2尿液中僅檢出血紅蛋白時(shí)，是幼畜溶血病、犢牛水中毒或焦蟲(chóng)病的特征。3尿液中僅檢出肌紅蛋白時(shí)，是肌紅蛋白尿病的表現(xiàn)。4尿液中僅檢出尿膽原時(shí)，是實(shí)質(zhì)性肝炎的特征。5尿液中僅檢出膽紅質(zhì)時(shí)，是膽道阻塞的特征。6尿液中僅檢出酮體是，見(jiàn)于牛酮血病及綿羊妊娠病。7尿液中僅檢出尿藍(lán)母時(shí)，見(jiàn)于胃腸炎、子宮內(nèi)膜炎，胸膜炎等。尿液檢驗(yàn)獸醫(yī)臨床診斷技術(shù)講稿尿液檢驗(yàn)結(jié)果必須結(jié)合臨床癥狀才能作出正確判定1.尿中出現(xiàn)蛋白質(zhì)、尾狀上皮細(xì)胞，而臨床表現(xiàn)尿意頻頻，屢呈排尿姿勢(shì)，排尿時(shí)呻吟不安，僅有少量淋漓排出，插入導(dǎo)尿管而疼痛不安，直檢膀胱充滿(mǎn)尿液的，可確診為尿道炎。2.尿液中出現(xiàn)尿蛋白，扁平上皮細(xì)胞或磷酸銨鎂結(jié)晶，臨床表現(xiàn)尿意頻頻，屢呈排尿姿勢(shì)，排尿時(shí)疼痛不安，僅排出少量尿液或尿液淋漓排出