甾體激素類藥物分析課件資料

基本結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷駢多氫菲ABCD12345678910111213141516171819第1頁/共75頁第一頁，共76頁。分類：甾體激素腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素第2頁/共75頁第二頁，共76頁。腎上腺皮質(zhì)激素氫化可的松第3頁/共75頁第三頁，共76頁。腎上腺皮質(zhì)激素醋酸地塞米松第4頁/共75頁第四頁，共76頁。雄性激素丙酸睪酮第5頁/共75頁第五頁，共76頁。蛋白同化激素苯丙酸諾龍第6頁/共75頁第六頁，共76頁。孕激素黃體酮第7頁/共75頁第七頁，共76頁。雌激素炔雌醇第8頁/共75頁第八頁，共76頁。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.腎上腺皮質(zhì)激素主要活性基團性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17

–

α–醇酮基還原性第9頁/共75頁第九頁，共76頁。2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基團性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17–

β–羥基可成酯第10頁/共75頁第十頁，共76頁。3.孕激素主要活性基團性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)C17–甲酮基與亞硝基鐵氰化納反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)第11頁/共75頁第十一頁，共76頁。4.雌激素主要活性基團性質(zhì)A環(huán)為3–OH苯環(huán)UV、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)C17–羥基可成酯第12頁/共75頁第十二頁，共76頁。二、鑒別試驗（一）與強酸的呈色反應(yīng)甾體激素類藥物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）第13頁/共75頁第十三頁，共76頁。(二)官能團的反應(yīng)腎上腺皮質(zhì)激素藥物呈色四氮唑鹽OHˉ1C17

–

α–醇酮基還原性A.呈色反應(yīng)第14頁/共75頁第十四頁，共76頁。腎上腺皮質(zhì)激素藥物Cu2O↓橙紅色堿性酒石酸銅B.沉淀反應(yīng)Ag↓黑色氨制硝酸銀第15頁/共75頁第十五頁，共76頁。甾酮類激素藥物呈色羰基試劑2.C3–酮基和C20–酮基＃常用的羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼第16頁/共75頁第十六頁，共76頁。異煙腙（黃色）睪酮第17頁/共75頁第十七頁，共76頁。黃體酮異煙雙腙（黃色）第18頁/共75頁第十八頁，共76頁。具有甲酮基或活潑亞甲基的甾體激素類藥物呈色亞硝基鐵氰化納間二硝基酚芳香醛3.甲酮基第19頁/共75頁第十九頁，共76頁。黃體酮藍(lán)紫色亞硝基鐵氰化納其他甾體淡橙色不顯色第20頁/共75頁第二十頁，共76頁。黃體酮第21頁/共75頁第二十一頁，共76頁。藍(lán)紫色第22頁/共75頁第二十二頁，共76頁。有機氟Fˉ有機破壞有機氯Clˉ4.有機鹵素茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰硝酸—硝酸銀AgCl↓呈色第23頁/共75頁第二十三頁，共76頁。茜素氟藍(lán)藍(lán)紫色F-第24頁/共75頁第二十四頁，共76頁。雌激素類藥物紅色偶氮染料重氮苯磺酸5.酚羥基第25頁/共75頁第二十五頁，共76頁。含炔基的甾體激素銀鹽沉淀硝酸銀6.乙炔基↓第26頁/共75頁第二十六頁，共76頁。炔雌醇白第27頁/共75頁第二十七頁，共76頁?！鱇OH(三)制備衍生物測定m.p.第28頁/共75頁第二十八頁，共76頁?！鳌鞯?9頁/共75頁第二十九頁，共76頁。（四）水解產(chǎn)物的反應(yīng)第30頁/共75頁第三十頁，共76頁。第31頁/共75頁第三十一頁，共76頁。△４-3-酮240nm苯環(huán)280nm（五）UV法第32頁/共75頁第三十二頁，共76頁。3300～3000cm-13000～2700cm-11900～1650cm-11650～1450cm-11000～650cm-1（六）IR法3750～3300cm-1ν第33頁/共75頁第三十三頁，共76頁。醋酸可的松結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC20–酮基、C11–酮基、醋酸酯第34頁/共75頁第三十四頁，共76頁。結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC17–乙炔基炔諾酮第35頁/共75頁第三十五頁，共76頁。結(jié)構(gòu)特征：酚羥基、C17–OHC17–乙炔基炔雌醇第36頁/共75頁第三十六頁，共76頁。（七）TLC法

主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別

方法：對照品法要求供試品溶液所顯主斑點的顏色和位置與對照品溶液的主斑點相同。第37頁/共75頁第三十七頁，共76頁。（八）HPLC法

主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）

方法：對照品法要求在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品峰的tR與對照品峰的tR一致。第38頁/共75頁第三十八頁，共76頁。三、雜質(zhì)檢查（一）其他甾體定義與標(biāo)示藥物結(jié)構(gòu)不同的甾體化合物都稱為“其他甾體”第39頁/共75頁第三十九頁，共76頁。Li/NH3C2H5OH弱酸雌二醇－3－甲醚苯丙酸諾龍的合成路線III第40頁/共75頁第四十頁，共76頁。強酸苯丙酰氯HClIII第41頁/共75頁第四十一頁，共76頁。

特點（1）可能存在多個甾體雜質(zhì)（2）結(jié)構(gòu)類似2.來源原料、中間體、異構(gòu)體、降解產(chǎn)物第42頁/共75頁第四十二頁，共76頁。4.方法（具有一定分離能力）

TLC法（高低濃度對比法）

HPLC法（類似高低濃度對比法）第43頁/共75頁第四十三頁，共76頁。（1）TLC法（高低濃度對比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)斑點數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)斑點顏色第44頁/共75頁第四十四頁，共76頁。特點：（1）簡便易行，不需特殊的儀器；（2）不需對照品；（3）只能控制單個雜質(zhì)的限量；（4）要求雜質(zhì)與主成分的顯色靈敏度接近。第45頁/共75頁第四十五頁，共76頁。（2）HPLC法（高低濃度對比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)峰數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)峰面積第46頁/共75頁第四十六頁，共76頁。（二）游離磷酸地塞米松磷酸鈉氫化可的松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉氫化潑尼松磷酸鈉對照品法第47頁/共75頁第四十七頁，共76頁。原理：方法：第48頁/共75頁第四十八頁，共76頁。（對照液

0.0035%KH2PO4）第49頁/共75頁第四十九頁，共76頁。（三）甲醇和丙酮（靈敏度法）甲醇不得出峰檢測限=3.1ng丙酮≤5.0%

內(nèi)標(biāo)法+校正因子GC法第50頁/共75頁第五十頁，共76頁。炔雌醇第51頁/共75頁第五十一頁，共76頁。（四）雌酮原理Zimmermann反應(yīng)堿性KOH乙醇高純度第52頁/共75頁第五十二頁，共76頁。硒四、來源合成中用二氧化硒(SeO2)脫氫原理方法第53頁/共75頁第五十三頁，共76頁。四、含量測定（一）UV法△４-3-酮240nm（±）腎上腺皮質(zhì)激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素苯環(huán)280nm（±）雌激素第54頁/共75頁第五十四頁，共76頁。（二）反應(yīng)分光光度法1.適用于非分光光度活性藥物2.使待測組分光譜位移，避免干擾3.增加測定靈敏度4.增加選擇性弱、非分光光度活性藥物強分光光度活性藥物化學(xué)反應(yīng)第55頁/共75頁第五十五頁，共76頁。

腎上腺皮質(zhì)激素類C17-α－醇酮基強還原性1.原理OH-[還原]四氮唑比色法第56頁/共75頁第五十六頁，共76頁。[O]OH-分子重排第57頁/共75頁第五十七頁，共76頁。藍(lán)四氮唑（BT）第58頁/共75頁第五十八頁，共76頁。雙甲瓚（暗藍(lán)）第59頁/共75頁第五十九頁，共76頁。2.方法ChPTTC（RT）BPTTC（RT）USPBT對照品法40～45′暗第60頁/共75頁第六十頁，共76頁。3.討論（1）基團對反應(yīng)速度的影響C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯C16無論何種取代基ν↓第61頁/共75頁第六十一頁，共76頁。（2）溶劑、水分的影響含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→幾無反應(yīng)—無醛無水乙醇醛→A↑—無水乙醇第62頁/共75頁第六十二頁，共76頁。（3）O2與光線的影響反應(yīng)過程反應(yīng)產(chǎn)物怕光→避光、快速O2影響顏色強度和穩(wěn)定性→隔絕空氣、快速、充N2第63頁/共75頁第六十三頁，共76頁。（4）堿的種類及加入順序反應(yīng)應(yīng)在強堿性（pH13.75）條件下進行以氫氧化四甲基銨的結(jié)果最佳加入順序：第64頁/共75頁第六十四頁，共76頁。（5）溫度與時間t℃↑→ν↑→甲瓚分解↑→%↓ChP25℃40～45′BP30℃1h第65頁/共75頁第六十五頁，共76頁。4.特點：缺點影響因素太多優(yōu)點測定結(jié)果能指示藥品的穩(wěn)定性（氧化及降解產(chǎn)物無此反應(yīng)）第66頁/共75頁第六十六頁，共76頁。腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基1.原理HCl（縮合）異煙肼比色法第67頁/共75頁第六十七頁，共76頁。異煙腙（黃色）第68頁/共75頁第六十八頁，共76頁。2.方法暗45′對照品法第69頁/共75頁第六十九頁，共76頁。3.討論反應(yīng)速度（1）C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反應(yīng)反應(yīng)專屬性C3－酮基第70頁/共75頁第七十頁，共76頁。（2）溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無水甲醇無水乙醇第71頁/共75頁第七十一頁，共76頁。（3）水分、O2與光線的影響含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓不揮發(fā)溶劑、不吸收水分時→

O2與光線無影響第72頁/共75頁第七十二頁，共76頁。酸、異煙肼的量(3)鹽酸:異煙肼=2:1樣品:異煙肼=1:8→ν↑酸度↑→異煙肼鹽↓酸度↓→A↓溫度(4)t℃↑→ν↑第73頁/共75頁第七十三頁，共76頁。1.原理λmax=465λmax=515雌激素Kober反應(yīng)比色法△△第74頁/共