實驗二植物病害組織分離培養(yǎng)技術(shù)及植物病害癥狀觀察課件

實驗二植物病原真菌組織分離培養(yǎng)技術(shù)及植物病害癥狀觀察

一、實驗?zāi)康暮鸵螅?.掌握植物病害組織分離、無菌操作及常用病原物的培養(yǎng)和保存方法。2.通過觀察植物病害的典型癥狀，初步掌握植物病害的癥狀特點，并學(xué)習(xí)植物病害癥狀的描述方法。二、材料及用具（1）植物病害組織體（自備），PDA平板培養(yǎng)基（已做好）。（2）超凈工作臺（內(nèi)有75%酒精（內(nèi)放脫脂棉球）、解剖刀、手術(shù)剪、鑷子、酒精燈、培養(yǎng)皿、滅菌紗布（2塊5cm×5cm）、培養(yǎng)皿（9cm）120套（2個班，2皿/人），5%乳酸瓶（60ml），1%漂白粉（0.1%升汞）瓶，無菌水、火柴等。2、分離過程：1）實驗進行前先把周圍環(huán)境灑上少許水，地面潔凈，把超凈臺面擦干凈，打開超凈臺的紫外燈照射20－30分鐘，然后關(guān)閉紫外燈，打開鼓風(fēng)機，點燃酒精燈。2）培養(yǎng)基在微波爐融化后，在超凈臺上把培養(yǎng)基倒入滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)，12ml/皿（為防止細菌污染，倒平板前每三角瓶內(nèi)加5%乳酸4-6滴），放置片刻待培養(yǎng)基自然冷卻。注意此步操作應(yīng)在酒精燈附近進行。3）植物病害標(biāo)本，用自來水沖洗干凈，放入接種箱內(nèi)；雙手用70%酒精棉球擦拭消毒后，伸入接種箱內(nèi)開始操作。4）打開3個培養(yǎng)皿（無菌的），依次倒入70%酒精、1%漂白粉、無菌水；取出滅菌解剖刀，蘸70%酒精并過酒精燈火焰后，待刀片冷卻后切取所需植物組織體，在病健交界處剪切成3mm2的大?。ūＷC每人6塊，3塊/皿），用紗布包好，分別于70％酒精中浸5秒后，再在1%漂白粉（0.1％升汞溶液）中浸3－5分鐘進行表面充分消毒，而后用滅菌水沖洗3次。玉米小斑病棉花輪紋病要求：本次實訓(xùn)操作要求細心，規(guī)范，快速，準(zhǔn)確注意

（1）工作環(huán)境的清潔和消毒（2）分離用具的消毒（3）分離材料的選擇植物病害癥狀觀察

植物病害病狀類型●

變色●

壞死●

腐爛●

萎蔫●

畸形初始癥狀褐色小點，有暈圈

中期癥狀褐色斑點，有暈圈

后期癥狀葉正面點狀物散生排列（分生孢子盤）壞死②針芒型：病斑似針芒向外擴展，無一定邊緣，病斑小，但數(shù)量多，遍布葉片，后期葉片漸黃，病斑周圍及背部保持綠色。③混合型：病斑很大，近圓形或不規(guī)則形，其上亦有小黑粒點，但不明顯地排列成同心輪紋狀，病斑暗褐色，后期中心為灰白色，但邊緣有的呈綠色?；旌闲停螤畈灰?guī)則。病斑較大，在葉邊緣及內(nèi)均發(fā)生

梨黑星病桃穿孔病細菌穿孔病霉斑穿孔病褐斑穿孔病菠菜猝倒病大白菜軟腐病棗瘋病癥狀：芽不正常萌發(fā)與生長所引起的枝葉叢生，以及嫩葉的明脈、黃化和卷成匙形等。病株花器各部分的著生部位不變?；ㄆ鞣底娆F(xiàn)象表現(xiàn)為花梗變長，花瓣變成小葉，有時變成小枝條，有時則不發(fā)生變態(tài)；雌蕊變成小枝條，其腋芽往往萌發(fā)，生成短而細的小枝。后來除了雌蕊變成的小枝和萼片腋芽萌發(fā)生成的枝條外，其余各部分大都脫落。這