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考點(diǎn)38基因工程生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題第一關(guān)小題自助餐自選狂刷題組一刷基礎(chǔ)小卷——固知識(shí)1.[經(jīng)典模擬]如圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化,圖中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是()A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②2.下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物B.限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)3.[2022·四省名校高三聯(lián)考]胰島素是胰島素基因控制合成的胰島素原經(jīng)加工、分類、包裝而形成的一種分泌蛋白,是治療糖尿病的特效藥。科學(xué)家從人體內(nèi)直接提取到控制合成人胰島素的基因,擬采用基因工程的方法大量生產(chǎn)人胰島素以用于疾病的治療。結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題:(1)從人體內(nèi)直接提取的人胰島素基因數(shù)量較少,科學(xué)家常采用PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)對(duì)其進(jìn)行快速擴(kuò)增,該技術(shù)依據(jù)的原理是,PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是,以便據(jù)此合成引物。(2)構(gòu)建人胰島素基因表達(dá)載體是基因工程的核心,其目的是_________________________________________________________________________________________。一個(gè)完整的基因表達(dá)載體除了含有啟動(dòng)子、終止子、目的基因外,還含有標(biāo)記基因,標(biāo)記基因的作用是______________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為能在山羊的乳汁中提取到人胰島素,科學(xué)家將人胰島素基因與等調(diào)控元件重組在一起,通過(guò)法導(dǎo)入山羊的受精卵中,最終得到乳汁中含有人胰島素的轉(zhuǎn)基因山羊,最終實(shí)現(xiàn)了人胰島素的大量生產(chǎn)。(4)依據(jù)單細(xì)胞生物繁殖快、代謝旺盛的特點(diǎn),科學(xué)家選用酵母菌作為生產(chǎn)人胰島素的轉(zhuǎn)基因受體細(xì)胞,不選用大腸桿菌作為受體細(xì)胞的主要原因是___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。題組二刷提升小卷——培素養(yǎng)4.[2022·江蘇省東臺(tái)中學(xué)高三檢測(cè)]限制酶、DNA連接酶的發(fā)現(xiàn)為DNA切割、連接、功能基因的獲得以及表達(dá)載體的構(gòu)建創(chuàng)造了條件,下列關(guān)于限制酶和DNA連接酶的敘述,正確的是()A.兩者都是從原核生物中分離純化出來(lái)的B.兩者的催化都會(huì)導(dǎo)致磷酸二酯鍵數(shù)目的改變C.限制酶都能在特定位點(diǎn)切割產(chǎn)生黏性末端D.T4DNA連接酶只能連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端5.[經(jīng)典模擬]近年誕生的CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可進(jìn)行基因定點(diǎn)編輯。CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要包括Cas9(內(nèi)切核酸酶)和向?qū)NA,其原理是由向?qū)NA引導(dǎo)Cas9到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割(上述過(guò)程見(jiàn)下圖)。下列相關(guān)敘述,正確的是()A.CRISPR/Cas9的組成物質(zhì)是在核糖體上合成的B.向?qū)NA的合成需要逆轉(zhuǎn)錄酶的參與C.基因的定點(diǎn)編輯過(guò)程只涉及堿基A—U,G—C的互補(bǔ)配對(duì)D.切割后形成的每個(gè)DNA片段均含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)6.[2022·新高考省份高三檢測(cè)]為使玉米獲得抗除草劑性狀,需進(jìn)行如圖所示的操作。報(bào)告基因的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過(guò)程中,愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌,導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下列敘述不正確的是()A.篩選1需要用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的農(nóng)桿菌B.篩選2需要用無(wú)色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出呈現(xiàn)藍(lán)色的組織C.為使除草劑抗性基因G在農(nóng)桿菌中高效表達(dá),需要把目的基因片段插入到表達(dá)載體的復(fù)制原點(diǎn)和啟動(dòng)子之間D.為從個(gè)體水平上檢測(cè)圖中玉米植株A是否具有抗除草劑性狀,可采用的方法是用相應(yīng)除草劑噴灑待測(cè)玉米植株7.[經(jīng)典高考]北極比目魚(yú)中有抗凍基因,其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列,該序列重復(fù)次數(shù)越多,抗凍能力越強(qiáng),下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖,有關(guān)敘述正確的是()A.過(guò)程①獲取的目的基因,可用于基因工程和比目魚(yú)基因組測(cè)序B.將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成能表達(dá)的新基因,不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C.過(guò)程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因,需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D.應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)8.[2022·福建龍巖市高三一模]Kisspeptin(Kp)是脊椎動(dòng)物的一種肽類激素,對(duì)下丘腦分泌促性腺激素釋放激素(GnRH)的神經(jīng)元有活化作用。研究者為探究Kp、GnRH以及GnRH受體的相關(guān)基因在下丘腦和垂體中的表達(dá)情況,提取下丘腦和垂體中的RNA,采用RT-PCR擴(kuò)增DNA(RT是反轉(zhuǎn)錄)進(jìn)行檢測(cè)。下列有關(guān)敘述不正確的是()A.RT—PCR過(guò)程需要的酶有反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶B.PCR擴(kuò)增時(shí)可以相關(guān)基因的mRNA的核苷酸序列為依據(jù)設(shè)計(jì)引物C.檢測(cè)RT-PCR的產(chǎn)物可采用DNA分子雜交和熒光分子雜交技術(shù)D.可檢測(cè)到Kp受體、GnRH、GnRH受體相關(guān)基因均在下丘腦中表達(dá)量最高9.[2022·沈陽(yáng)市高三模擬]圖1為培育轉(zhuǎn)基因生物時(shí)選用的運(yùn)載體,圖2是含有目的基因的一段DNA序列,圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.若通過(guò)PCR技術(shù)提取該目的基因,應(yīng)該選用引物甲和引物丙B.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ這兩種限制酶以及DNA連接酶C.若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌中,需用Ca2+處理大腸桿菌D.只利用含四環(huán)素的培養(yǎng)基就可以直接篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞題組三刷專項(xiàng)小卷——提考能10.(不定項(xiàng)選擇)甲基對(duì)硫磷是常見(jiàn)的農(nóng)藥污染物。科研人員嘗試改造并分離得到能夠降解甲基對(duì)硫磷的微生物。下列操作中必需的是()A.構(gòu)建含有甲基對(duì)硫磷分解酶基因的表達(dá)載體B.將甲基對(duì)硫磷分解酶基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體菌C.用甲基對(duì)硫磷為唯一碳源的培養(yǎng)基選擇所需工程菌D.提取工程菌的質(zhì)粒并檢測(cè)甲基對(duì)硫磷基因的含量11.(不定項(xiàng)選擇)下圖表示蛋白質(zhì)工程的操作過(guò)程,相關(guān)說(shuō)法正確的是()A.蛋白質(zhì)工程中對(duì)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的了解是非常關(guān)鍵的工作B.蛋白質(zhì)工程是完全擺脫基因工程技術(shù)的一項(xiàng)全新的生物技術(shù)工程C.a(chǎn)、b過(guò)程分別是轉(zhuǎn)錄、翻譯D.蛋白質(zhì)工程可以制造一種新的蛋白質(zhì)也可以對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造12.(不定項(xiàng)選擇)安全有效的疫苗被認(rèn)為是戰(zhàn)勝新冠疫情的“終極武器”。截止到2021年2月28日,我國(guó)共有4款新冠疫苗獲批上市,走在世界新冠疫苗研發(fā)的前沿。根據(jù)采用的主要技術(shù)路徑不同,目前研制的新冠疫苗主要是核酸疫苗、滅活疫苗、腺病毒載體疫苗、重組蛋白疫苗。對(duì)于新冠疫苗研制的技術(shù)路徑,下列說(shuō)法合理的是()A.通過(guò)基因工程方法,生產(chǎn)提純新冠病毒最有可能作為抗原的S蛋白,制成重組蛋白疫苗B.將新冠病毒在瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),然后通過(guò)滅活和純化,制成滅活疫苗C.mRNA疫苗在人體細(xì)胞內(nèi)作為模板合成病毒刺突蛋白(如S蛋白)可刺激人體產(chǎn)生抗體D.用改造后無(wú)害的腺病毒作為載體,和新冠病毒的刺突蛋白基因(如S蛋白基因)重組,可制成腺病毒載體疫苗13.(不定項(xiàng)選擇)基因編輯是指將外源DNA片段導(dǎo)入到染色體DNA特定位點(diǎn)或刪除基因內(nèi)部特定片段,是一種對(duì)生物體基因組特定目標(biāo)基因進(jìn)行修飾的技術(shù)。下圖是對(duì)某生物B基因進(jìn)行基因編輯的過(guò)程,該過(guò)程中用sgRNA指引限制性內(nèi)切核酸酶Cas9結(jié)合到特定的靶位點(diǎn)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.sgRNA的全部堿基序列與靶基因序列完全互補(bǔ)B.限制性內(nèi)切核酸酶Cas9可斷裂核苷酸之間的磷酸二酯鍵C.根據(jù)上述處理前后生物體的功能變化,可推測(cè)B基因的功能D.使用該項(xiàng)基因編輯技術(shù)來(lái)預(yù)防人的某些疾病時(shí)可以無(wú)需審批題組四刷真題小卷——登頂峰14.[2021·湖北卷]限制性內(nèi)切核酸酶EcoRⅠ識(shí)別并切割雙鏈DNA,用EcoRⅠ完全酶切果蠅基因組DNA,理論上得到DNA片段的平均長(zhǎng)度(堿基對(duì))約為()A.6B.250C.4000D.2400015.[2021·湖北卷]某實(shí)驗(yàn)利用PCR技術(shù)獲取目的基因,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示除目的基因條帶(引物與模板完全配對(duì))外,還有2條非特異條帶(引物和模板不完全配對(duì))。為了減少反應(yīng)非特異條帶的產(chǎn)生,以下措施中有效的是()A.增加模板DNA的量B.延長(zhǎng)熱變性的時(shí)間C.延長(zhǎng)延伸的時(shí)間D.提高復(fù)性的溫度16.[2021·遼寧卷]腈水合酶(N0)廣泛應(yīng)用于環(huán)境保護(hù)和醫(yī)藥原料生產(chǎn)等領(lǐng)域,但不耐高溫。利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)在N0的α和β亞基之間加入一段連接肽,可獲得熱穩(wěn)定的融合型腈水合酶(N1)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.N1與N0氨基酸序列的差異是影響其熱穩(wěn)定性的原因之一B.加入連接肽需要通過(guò)改造基因?qū)崿F(xiàn)C.獲得N1的過(guò)程需要進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯D.檢測(cè)N1的活性時(shí)先將N1與底物充分混合,再置于高溫環(huán)境17.[2021·山東卷]粗提取DNA時(shí),向雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水并攪拌,過(guò)濾后所得濾液進(jìn)行下列處理后再進(jìn)行過(guò)濾,在得到的濾液中加入特定試劑后容易提取出DNA相對(duì)含量較高的白色絲狀物的處理方式是()A.加入適量的木瓜蛋白酶B.37~40℃的水浴箱中保溫10~15分鐘C.加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精D.加入NaCl調(diào)節(jié)濃度至2mol/L→過(guò)濾→調(diào)節(jié)濾液中NaCl濃度至0.14mol/L18.[2021·海南卷]CRISPR/Cas9是一種高效的基因編輯技術(shù),Cas9基因表達(dá)的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”,在單鏈向?qū)NA(sgRNA)引導(dǎo)下,切割DNA雙鏈以敲除目標(biāo)基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的工作原理如圖所示?;卮鹣铝袉?wèn)題。(1)過(guò)程①中,為構(gòu)建CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒,需對(duì)含有特定sgRNA編碼序列的DNA進(jìn)行酶切處理,然后將其插入到經(jīng)相同酶切處理過(guò)的質(zhì)粒上,插入時(shí)所需要的酶是。(2)過(guò)程②中,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞的方法是。(3)過(guò)程③~⑤中,sgRNA與Cas9蛋白形成復(fù)合體,該復(fù)合體中的sgRNA可識(shí)別并與目標(biāo)DNA序列特異性結(jié)合,二者結(jié)合所遵循的原則是。隨后,Cas9蛋白可切割序列。(4)利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)敲除一個(gè)長(zhǎng)度為1200bp的基因,在DNA水平上判斷基因敲除是否成功所采用的方法是,基因敲除成功的判斷依據(jù)是。(5)某種蛋白酶可高效降解羽毛中的角蛋白??蒲腥藛T將該蛋白酶基因插入到CRISPR/Cas9質(zhì)粒中獲得重組質(zhì)粒,隨后將其導(dǎo)入到大腸桿菌細(xì)胞,通過(guò)基因編輯把該蛋白酶基因插入到基因組DNA中,構(gòu)建得到能大量分泌該蛋白酶的工程菌。據(jù)圖簡(jiǎn)述CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞內(nèi),將該蛋白酶基因插入到基因組DNA的編輯過(guò)程:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。19.[2021·遼寧卷]PHB2蛋白具有抑制細(xì)胞增殖的作用。為初步探究某動(dòng)物PHB2蛋白抑制人宮頸癌細(xì)胞增殖的原因,研究者從基因數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取了該蛋白的基因編碼序列(簡(jiǎn)稱phb2基因),大小為0.9kb(1kb=1000堿基對(duì)),利用大腸桿菌表達(dá)該蛋白。回答下列問(wèn)題:(1)為獲取phb2基因,提取該動(dòng)物肝臟組織的總RNA,再經(jīng)過(guò)程得到cDNA,將其作為PCR反應(yīng)的模板,并設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物來(lái)擴(kuò)增目的基因。(2)圖1為所用載體圖譜示意圖,圖中限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見(jiàn)下表。為使phb2基因(該基因序列不含圖1中限制酶的識(shí)別序列)與載體正確連接,在擴(kuò)增的phb2基因兩端分別引入和兩種不同限制酶的識(shí)別序列。經(jīng)過(guò)這兩種酶酶切的phb2基因和載體進(jìn)行連接時(shí),可選用(填“E.coliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”)。相關(guān)限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)注:箭頭表示切割位點(diǎn)。(3)轉(zhuǎn)化前需用CaCl2處理大腸桿菌細(xì)胞,使其處于的生理狀態(tài),以提高轉(zhuǎn)化效率。(4)將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),隨機(jī)挑取菌落(分別編號(hào)為1、2、3、4)培養(yǎng)并提取質(zhì)粒,用(2)中選用的兩種限制酶進(jìn)行酶切,酶切產(chǎn)物經(jīng)電泳分離,結(jié)果如圖2,號(hào)菌落的質(zhì)粒很可能是含目的基因的重組質(zhì)粒。注:M為指示分子大小的標(biāo)準(zhǔn)參照物;小于0.2kb的DNA分子條帶未出現(xiàn)在圖中。(5)將純化得到的PHB2蛋白以一定濃度添加到人宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)液中,培養(yǎng)24小時(shí)后,檢測(cè)處于細(xì)胞周期(示意圖見(jiàn)圖3)不同時(shí)期的細(xì)胞數(shù)量,統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖4。分析該蛋白抑制人宮頸癌細(xì)胞增殖可能的原因是將細(xì)胞阻滯在細(xì)胞周期的(填“G1”“S”或“G2/M”)期。20.[2021·福建卷]微生物吸附是重金屬?gòu)U水的處理方法之一。金屬硫蛋白(MT)是一類廣泛存在于動(dòng)植物中的金屬結(jié)合蛋白,具有吸附重金屬的作用??蒲腥藛T將棗樹(shù)的MT基因?qū)氪竽c桿菌構(gòu)建工程菌?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)根據(jù)棗樹(shù)的MTcDNA的核苷酸序列設(shè)計(jì)了相應(yīng)的引物(圖1甲),通過(guò)PCR擴(kuò)增MT基因。已知A位點(diǎn)和B位點(diǎn)分別是起始密碼子和終止密碼子對(duì)應(yīng)的基因位置。選用的引物組合應(yīng)為。(2)本實(shí)驗(yàn)中,PCR所用的DNA聚合酶擴(kuò)增出的MT基因的末端為平末端。由于載體E只有能產(chǎn)生黏性末端的酶切位點(diǎn),需借助中間載體P將MT基因接入載體E。載體P和載體E的酶切位點(diǎn)及相應(yīng)的酶切序列如圖1乙所示。①選用酶將載體P切開(kāi),再用(填“T4DNA”或“E·coliDNA”)連接酶將MT基因與載體P相連,構(gòu)成重組載體P′。②載體P′不具有表達(dá)MT基因的和。選用酶組合對(duì)載體P′和載體E進(jìn)行酶切,將切下的MT基因和載體E用DNA連接酶進(jìn)行連接,將得到的混合物導(dǎo)入到用離子處理的大腸桿菌,篩出MT工程菌。(3)MT基因在工程菌的表達(dá)量如圖2所示。結(jié)果仍無(wú)法說(shuō)明已經(jīng)成功構(gòu)建能較強(qiáng)吸附廢水中重金屬的MT工程菌,理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。21.[2021·山東卷]人類γ基因啟動(dòng)子上游的調(diào)控序列中含有BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn),該位點(diǎn)結(jié)合BCL11A蛋白后,γ基因的表達(dá)被抑制。通過(guò)改變?cè)摻Y(jié)合位點(diǎn)的序列,解除對(duì)γ基因表達(dá)的抑制,可對(duì)某種地中海貧血癥進(jìn)行基因治療??蒲腥藛T擴(kuò)增了γ基因上游不同長(zhǎng)度的片段,將這些片段分別插入表達(dá)載體中進(jìn)行轉(zhuǎn)化和熒光檢測(cè),以確定BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)的具體位置。相關(guān)信息如圖所示。(1)為將擴(kuò)增后的產(chǎn)物定向插入載體指導(dǎo)熒光蛋白基因表達(dá),需在引物末端添加限制酶識(shí)別序列。據(jù)圖可知,在F1~F7末端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是,在R末端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是。本實(shí)驗(yàn)中,從產(chǎn)物擴(kuò)增到載體構(gòu)建完成的整個(gè)過(guò)程共需要種酶。(2)將構(gòu)建的載體導(dǎo)入除去BCL11A基因的受體細(xì)胞,成功轉(zhuǎn)化后,含F(xiàn)1~F6與R擴(kuò)增產(chǎn)物的載體表達(dá)熒光蛋白,受體細(xì)胞有熒光,含F(xiàn)7與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞無(wú)熒光。含F(xiàn)7與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞無(wú)熒光的原因是__________________________________________________________________________________________________________。(3)向培養(yǎng)液中添加適量的雌激素,含F(xiàn)1~F4與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞不再有熒光,而含F(xiàn)5~F6與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞仍有熒光。若γ基因上游調(diào)控序列上與引物序列所對(duì)應(yīng)的位置不含有BCL11A蛋白的結(jié)合位點(diǎn)序列,據(jù)此結(jié)果可推測(cè),BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)位于,理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。第二關(guān)大題自助餐自選精做題組一基因工程及應(yīng)用1.[2022·廣東珠海市模擬]新冠病毒是RNA病毒,病毒的S蛋白(刺突蛋白)是決定病毒入侵易感細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白,可與宿主細(xì)胞的受體結(jié)合。下面為兩種針對(duì)新冠病毒的疫苗研發(fā)方法,回答下列問(wèn)題。方法技術(shù)路線基因工程疫苗S蛋白基因→基因表達(dá)載體→大腸桿菌→S蛋白→人體腺病毒載體重組疫苗S蛋白基因→腺病毒基因表達(dá)載體→人體(1)基因表達(dá)載體的組成除了S蛋白基因外還必須有復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、(答出2點(diǎn))等。啟動(dòng)子位于基因的首端,它是的部位。(2)基因工程疫苗制備過(guò)程中S蛋白基因進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)并且,則說(shuō)明該基因完成了轉(zhuǎn)化。與基因工程疫苗相比,腺病毒載體重組疫苗的優(yōu)點(diǎn)是。(3)除研制疫苗外,還可對(duì)新冠病毒進(jìn)行免疫學(xué)檢測(cè)以阻斷傳播途徑,其過(guò)程是:①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒S蛋白后分離產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞,并與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合,常用的融合方法有(答出1種);再多次篩選、檢測(cè),最終獲得所需雜交瘤細(xì)胞,該種細(xì)胞的特點(diǎn)是_____________________________________。②獲得的雜交瘤細(xì)胞可在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng),或注射到內(nèi)增殖,獲得大量可與S蛋白特異性結(jié)合的單克隆抗體作為診斷試劑。2.[2021·廣東廣州市三模]科研工作者將徑柳匙葉草液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(TaNHX2基因)轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi),獲得了耐鹽新品種。圖1是含有目的基因的DNA片段,Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶(Sau3AⅠ、BamHⅠ切割形成的黏性末端相同);圖2是農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請(qǐng)分析回答問(wèn)題:(1)將徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存,再根據(jù)目的基因的特定序列從受體菌中提取該基因,這種獲取目的基因的方法稱為_(kāi)_____________________。(2)計(jì)劃用EcoRⅠ分別切割圖1中DNA片段和圖2所示質(zhì)粒,以構(gòu)建基因表達(dá)載體。①構(gòu)建表達(dá)載體除限制酶外還需要的工具酶是。②本方案的缺陷是:可能導(dǎo)致以及目的基因與質(zhì)粒的反向連接。③為避免上述缺陷,最佳方案是用切割圖1的DNA,用切割圖2質(zhì)粒。(3)目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后,還需要利用技術(shù)才能得到轉(zhuǎn)基因棉花苗,這一技術(shù)的原理是_____________________________________。(4)要在個(gè)體生物學(xué)水平上檢測(cè)耐鹽新品種的培育效果,檢測(cè)方法是。題組二基因工程和蛋白質(zhì)工程的綜合考查3.[2022·陜西省聯(lián)考]超氧化物歧化酶(SOD)是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶,具有延緩衰老的功效??蒲腥藛T采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法將攜帶SOD基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入胡蘿卜細(xì)胞,成功培育出轉(zhuǎn)SOD基因胡蘿卜的新品種?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)Ti質(zhì)粒作為基因工程中常用的載體,應(yīng)具備的基本條件有(答出2點(diǎn)即可)。為了促進(jìn)農(nóng)桿菌吸收Ti質(zhì)粒,一般先用藥物處理大腸桿菌使之成為細(xì)胞。(2)為了獲得SOD基因,可通過(guò)提取分析超氧化物歧化酶中的序列,推知SOD基因可能的核苷酸序列,再用DNA合成儀直接大量合成?;蚬こ讨行枰狣NA連接酶,該酶催化形成的化學(xué)鍵是。(3)將攜帶SOD基因的Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌導(dǎo)入到胡蘿卜的體細(xì)胞中,然后利用技術(shù)獲得胡蘿卜的再生植株。若要測(cè)定SOD基因最終是否整合到胡蘿卜的某一染色體上,可用技術(shù),或直接測(cè)定該染色體上的DNA序列。(4)將SOD基因與受體植物細(xì)胞(包括原生質(zhì)體受體)遺傳物質(zhì)重新組合,除了轉(zhuǎn)基因技術(shù)外,還有細(xì)胞融合等方法,這些方法解決了傳統(tǒng)育種方法存在的的缺陷。(5)在生產(chǎn)蛋白質(zhì)方面,與基因工程相比,蛋白質(zhì)工程的優(yōu)點(diǎn)是________________。4.[2022·福建省模擬]乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用,ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的關(guān)鍵酶。轉(zhuǎn)化的反義ACC合成酶基因番茄具有耐儲(chǔ)存、宜運(yùn)輸?shù)膬?yōu)點(diǎn)。下圖為反義ACC合成酶基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答。(1)提取ACC合成酶的mRNA時(shí),宜選用成熟番茄的果實(shí)組織,原因是。以mRNA為模板合成DNA所需的酶是,原料是。(2)將圖中表達(dá)載體與農(nóng)桿菌菌液混合后,加入含有的培養(yǎng)基中,可篩選出轉(zhuǎn)化了反義ACC合成酶基因的農(nóng)桿菌。將ACC合成酶基因反向接在35S后構(gòu)成反義ACC合成酶基因,在檢測(cè)反義ACC合成酶基因是否整合到番茄植株的染色體DNA上時(shí),(填“能”或“不能”)用放射性物質(zhì)標(biāo)記的ACC合成酶基因片段做探針進(jìn)行檢測(cè),理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)圖中35S為特異啟動(dòng)子,推測(cè)35S應(yīng)在番茄的(器官)中啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄
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