實驗五影響酶活性的因素

實驗五影響酶活性的因素第一頁，共十頁，2022年，8月28日酶的活性受環(huán)境pH的影響極為顯著。通常，各種酶只有在一定的pH范圍內(nèi)才表現(xiàn)它的活性。一種酶表現(xiàn)其活性最高時的pH值，稱為該酶的最適pH。低于或高于最適pH時，酶的活性逐漸降低。唾液淀粉酶的最適pH值約為6.8。停止反應(yīng)。當酶促反應(yīng)速度達到最大值時的溫度，稱為酶作用的最適溫度。唾液淀粉酶的最適溫度為37℃。第二頁，共十頁，2022年，8月28日酶的活性常常受某些物質(zhì)的影響，有些物質(zhì)能使酶的活性增加，稱為酶的激活劑；有些物質(zhì)能使酶的活性降低，稱為酶的抑制劑。Cl-是唾液淀粉酶的激活劑，而Cu2+為其抑制劑。本實驗以唾液淀粉酶為例，此酶只能催化淀粉的水解，最終產(chǎn)物為麥芽糖和少量的葡萄糖

；淀粉水解程度不同，遇碘呈色反應(yīng)不同。因此，可以通過呈色反應(yīng)，了解淀粉水解的程度，從而間接判斷唾液淀粉酶活力第三頁，共十頁，2022年，8月28日的大小。淀粉水解如下：淀粉紫色糊精紅色糊精麥芽糖及少量葡萄糖藍色紫色紅色無色三、操作

1.稀釋唾液的制備：先用自來水漱口以清潔口腔

，然后取20mL蒸餾水含于口中，并做咀嚼動作，2min后吐入小燒杯中，加倍稀釋備用。附:pH5.0、6.8、8.0三種緩沖液的配制錐形瓶號pH值0.2mol/LNa2HPO4（mL）0.1mol/L檸檬酸（mL）15.010.309.7026.815.454.5538.019.450.55遇碘呈色第四頁，共十頁，2022年，8月28日項目試管編號123稀釋唾液(mL)111pH6.8的緩沖液（mL）

222溫度預(yù)處理5min(℃)

037100

0.2%淀粉溶液(mL)22（冷卻后加淀粉液）2反應(yīng)溫度(℃)03737檢查淀粉水解程度每隔1min,從2號管中取出1滴反應(yīng)液置于白瓷板上，用碘液檢查淀粉水解程度，直至反應(yīng)液不再變色（為橙黃色）

，取出所有試管，冷卻。碘液（滴）222搖勻觀察結(jié)果并解釋2．溫度對酶活性的影響取3支試管編號，按下表操作第五頁，共十頁，2022年，8月28日項目試管編號123pH5.0的緩沖溶液(mL)2

—

—pH6.8的緩沖溶液(mL)

—2

—pH8.0的緩沖溶液(mL)

—

—20.2%淀粉溶液（mL）222稀釋唾液（mL）111檢查淀粉水解程度將上述各管溶液混勻后在37℃水浴中保溫，然后每隔1min,從2號管中取出1滴反應(yīng)液置于白瓷板上，用碘液檢查淀粉水解程度，直至反應(yīng)液不再變色（為橙黃色），取出所有試管，冷卻。碘液（滴）222搖勻觀察結(jié)果并解釋3．pH值對酶活性的影響取3支試管編號，按下表操作。第六頁，共十頁，2022年，8月28日4．激活劑和抑制劑對酶活性的影響取3支試管編號，按下表操作。

項目試管編號123蒸餾水（mL）1

—

—0.9%NaCl溶液（mL）

—1

—1%CuSO4溶液（mL）

—

—10.1%淀粉溶液（mL）333稀釋唾液（mL）111檢查淀粉水解程度將上述各管溶液混勻后，在37℃水浴中保溫，然后每隔1min,從2號管中取出1滴反應(yīng)液置于白瓷板上，用碘液檢查淀粉水解程度，直至反應(yīng)液不再變色（為橙黃色）

，取出所有試管，冷卻。碘液（滴）222搖勻觀察結(jié)果并解釋第七頁，共十頁，2022年，8月28日錐形瓶號pH值0.2mol/LNa2HPO4（mL）0.1mol/L檸檬酸（mL）15.010.309.7026.815.454.5538.019.450.55四、結(jié)果觀察記錄實驗結(jié)果，并解釋之。附:pH5.0、6.8、8.0三種緩沖液的配制第八頁，共十頁，2022年，8月28日試劑和器材1.試劑：（1）0.2%淀粉溶液（含0.3%氯化鈉）稱取0.2g淀粉溶于100mL0.3%氯化鈉溶液中，煮沸2～3min。（2）碘液將碘化鉀20g及碘10g溶于100mL水中，使用前稀釋10倍。

（3）0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液

（4）0.1mol/L

檸檬酸溶液（5）0.1％淀粉溶液

(不含NaCl)

（6）0.9％氯化鈉溶液

（7）1％硫酸銅溶液

第九頁，共十頁，2022年，8月28日2.器材：

(1)試管與試管架（2）恒溫水浴鍋（3）冰?。?）沸水?。?）吸管（6）燒杯（7）錐形瓶（8）滴管

（9）白瓷板等。附:pH5.0、6.8、8.0三