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文檔簡介
實驗五影響酶活性的因素第一頁,共十頁,2022年,8月28日酶的活性受環(huán)境pH的影響極為顯著。通常,各種酶只有在一定的pH范圍內(nèi)才表現(xiàn)它的活性。一種酶表現(xiàn)其活性最高時的pH值,稱為該酶的最適pH。低于或高于最適pH時,酶的活性逐漸降低。唾液淀粉酶的最適pH值約為6.8。停止反應(yīng)。當酶促反應(yīng)速度達到最大值時的溫度,稱為酶作用的最適溫度。唾液淀粉酶的最適溫度為37℃。第二頁,共十頁,2022年,8月28日酶的活性常常受某些物質(zhì)的影響,有些物質(zhì)能使酶的活性增加,稱為酶的激活劑;有些物質(zhì)能使酶的活性降低,稱為酶的抑制劑。Cl-是唾液淀粉酶的激活劑,而Cu2+為其抑制劑。本實驗以唾液淀粉酶為例,此酶只能催化淀粉的水解,最終產(chǎn)物為麥芽糖和少量的葡萄糖
;淀粉水解程度不同,遇碘呈色反應(yīng)不同。因此,可以通過呈色反應(yīng),了解淀粉水解的程度,從而間接判斷唾液淀粉酶活力第三頁,共十頁,2022年,8月28日的大小。淀粉水解如下:淀粉紫色糊精紅色糊精麥芽糖及少量葡萄糖藍色紫色紅色無色三、操作
1.稀釋唾液的制備:先用自來水漱口以清潔口腔
,然后取20mL蒸餾水含于口中,并做咀嚼動作,2min后吐入小燒杯中,加倍稀釋備用。附:pH5.0、6.8、8.0三種緩沖液的配制錐形瓶號pH值0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L檸檬酸(mL)15.010.309.7026.815.454.5538.019.450.55遇碘呈色第四頁,共十頁,2022年,8月28日項目試管編號123稀釋唾液(mL)111pH6.8的緩沖液(mL)
222溫度預(yù)處理5min(℃)
037100
0.2%淀粉溶液(mL)22(冷卻后加淀粉液)2反應(yīng)溫度(℃)03737檢查淀粉水解程度每隔1min,從2號管中取出1滴反應(yīng)液置于白瓷板上,用碘液檢查淀粉水解程度,直至反應(yīng)液不再變色(為橙黃色)
,取出所有試管,冷卻。碘液(滴)222搖勻觀察結(jié)果并解釋2.溫度對酶活性的影響取3支試管編號,按下表操作第五頁,共十頁,2022年,8月28日項目試管編號123pH5.0的緩沖溶液(mL)2
—
—pH6.8的緩沖溶液(mL)
—2
—pH8.0的緩沖溶液(mL)
—
—20.2%淀粉溶液(mL)222稀釋唾液(mL)111檢查淀粉水解程度將上述各管溶液混勻后在37℃水浴中保溫,然后每隔1min,從2號管中取出1滴反應(yīng)液置于白瓷板上,用碘液檢查淀粉水解程度,直至反應(yīng)液不再變色(為橙黃色),取出所有試管,冷卻。碘液(滴)222搖勻觀察結(jié)果并解釋3.pH值對酶活性的影響取3支試管編號,按下表操作。第六頁,共十頁,2022年,8月28日4.激活劑和抑制劑對酶活性的影響取3支試管編號,按下表操作。
項目試管編號123蒸餾水(mL)1
—
—0.9%NaCl溶液(mL)
—1
—1%CuSO4溶液(mL)
—
—10.1%淀粉溶液(mL)333稀釋唾液(mL)111檢查淀粉水解程度將上述各管溶液混勻后,在37℃水浴中保溫,然后每隔1min,從2號管中取出1滴反應(yīng)液置于白瓷板上,用碘液檢查淀粉水解程度,直至反應(yīng)液不再變色(為橙黃色)
,取出所有試管,冷卻。碘液(滴)222搖勻觀察結(jié)果并解釋第七頁,共十頁,2022年,8月28日錐形瓶號pH值0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L檸檬酸(mL)15.010.309.7026.815.454.5538.019.450.55四、結(jié)果觀察記錄實驗結(jié)果,并解釋之。附:pH5.0、6.8、8.0三種緩沖液的配制第八頁,共十頁,2022年,8月28日試劑和器材1.試劑:(1)0.2%淀粉溶液(含0.3%氯化鈉)稱取0.2g淀粉溶于100mL0.3%氯化鈉溶液中,煮沸2~3min。(2)碘液將碘化鉀20g及碘10g溶于100mL水中,使用前稀釋10倍。
(3)0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液
(4)0.1mol/L
檸檬酸溶液(5)0.1%淀粉溶液
(不含NaCl)
(6)0.9%氯化鈉溶液
(7)1%硫酸銅溶液
第九頁,共十頁,2022年,8月28日2.器材:
(1)試管與試管架(2)恒溫水浴鍋(3)冰?。?)沸水?。?)吸管(6)燒杯(7)錐形瓶(8)滴管
(9)白瓷板等。附:pH5.0、6.8、8.0三
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