實(shí)驗(yàn)五 可溶性總糖的測定

實(shí)驗(yàn)五可溶性總糖的測定第一頁，共十頁，2022年，8月28日一、目的

掌握蒽酮法測定可溶性糖含量的原理和方法。第二頁，共十頁，2022年，8月28日二、原理

強(qiáng)酸可使糖類脫水成糖醛，生成的糖醛或羥甲基糖醛與蒽酮脫水縮合，形成糖醛的衍生物，呈藍(lán)綠色，該物質(zhì)在620nm處有最大吸收。在10－100μg范圍內(nèi)其顏色的深淺與可溶性糖含量成正比。這一方法有很高的靈敏度，糖含量在３0μg左右就能進(jìn)行測定，所以可做為微量測糖之用。一般樣品少的情況下，采用這一方法比較合適。第三頁，共十頁，2022年，8月28日三、儀器、試劑和材料

１、儀器分光光度計；電子天平；三角瓶；大管；試管架；漏斗；容量瓶；試管；水浴鍋２、試劑葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液；濃硫酸；蒽酮試劑：0.2g蒽酮溶于100mL濃硫酸中當(dāng)日配制使用。３、材料小麥第四頁，共十頁，2022年，8月28日四、操作步驟１、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取７支大試管，按下表數(shù)據(jù)配制一系列不同濃度的葡萄糖溶液：第五頁，共十頁，2022年，8月28日管號1234567葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液（ml）00.10.20.30.40.60.8蒸餾水（ml）10.90.80.70.60.40.2葡萄糖含量（μg）0102030406080第六頁，共十頁，2022年，8月28日

在每支試管中立即加入蒽酮試劑4.0ml，加完后一起浸于沸水浴中，準(zhǔn)確煮沸10分鐘取出，用流水冷卻，室溫放置10分鐘，在620nm波長下比色。以標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖含量作橫坐標(biāo)，以吸光值作縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。第七頁，共十頁，2022年，8月28日２、植物樣品中可溶性糖的提取

將小麥剪碎至２mm以下，準(zhǔn)確稱?。笨耍湃?0三角瓶中，加沸水25ml，在水浴中加蓋煮沸10分鐘，冷卻后過濾，濾液收集在50ml容量瓶中，定容至刻度。吸取提取液２ml置另一50ml容量瓶中，以蒸餾水稀釋定容不，搖勻測定。第八頁，共十頁，2022年，8月28日３、測定吸?。眒l已稀釋的提取液于大試管中，加入4.0ml蒽酮試劑，以一操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線制作。比色波長620nm，記錄吸光度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出葡萄糖的含量（μg）。

查表所得糖含量×稀釋倍數(shù)第九頁，共十頁，2022年，8月28日五、結(jié)果處理

植物樣品含糖量（％）＝