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紅斑狼瘡細(xì)胞(LE)檢驗檢驗試驗室紅斑狼瘡檢查第1頁系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一個常見本身免疫性疾病。患者血液中存在著紅斑狼瘡因子,簡稱LE因子,是一個抗細(xì)胞核抗體。一、概述紅斑狼瘡檢查第2頁其發(fā)生率:國外約50/10萬人我國70/10萬人黑人及亞裔人群發(fā)病率高于歐美人紅斑狼瘡檢查第3頁臨床表現(xiàn)發(fā)燒:可為唯一首發(fā)癥狀皮膚:面部蝶形紅斑、盤狀紅斑骨、關(guān)節(jié):骨無菌性壞死消化系統(tǒng):口腔黏膜潰瘍紅斑狼瘡檢查第4頁紅斑狼瘡檢查第5頁面部蝶形紅斑紅斑狼瘡檢查第6頁當(dāng)前仍未真正明了,多原因參加免疫機(jī)制缺點本身抗體、免疫復(fù)合物形成和沉積、免疫調(diào)整障礙等遺傳原因雌激素環(huán)境原因病毒感染、藥品、陽光和紫外線紅斑狼瘡檢查第7頁原理
血液中存在抗細(xì)胞核抗體,在體外可使受損白細(xì)胞核DNA解聚,核溶解和破壞失去原有致密結(jié)構(gòu)變含糊而形成形成一個圓形云霧狀游離均勻體。均勻體同時吸引數(shù)個有吞噬功效白細(xì)胞在其周圍形成花形細(xì)胞簇,在補(bǔ)體作用下,被其中一個白細(xì)胞所吞噬,而形成LE細(xì)胞。紅斑狼瘡檢查第8頁1、去纖維蛋白法
靜脈采血5ml,置含幾顆小玻珠瓶中,搖動15min,直至纖維蛋白完全繞拌在玻珠為止。置37C孵箱中2小時,再將血標(biāo)本轉(zhuǎn)入小口徑試管中,以10O0r/min離心5min,使白細(xì)胞適當(dāng)集中,吸收白細(xì)胞至溫氏管內(nèi),以r/min離心沉淀10min.取白細(xì)胞層涂片,Wright染色后鏡檢。
紅斑狼瘡檢查第9頁2、血塊法
靜脈采血5ml,置小試管內(nèi),待其凝固后,竹簽搗碎血塊,然后移入小口徑試管中,以1000r/min離心5min,使白細(xì)胞適當(dāng)集中,置37°C孵箱中2h。再將白細(xì)胞層移入溫氏管內(nèi),以r/min離心10min,取出白細(xì)胞層涂片,Wright染色后鏡檢。
紅斑狼瘡檢查第10頁匯報方式
用“找到LE細(xì)胞”和“未找到LE細(xì)胞”匯報。若僅見游離均勻體或花形細(xì)胞簇,不能作為找到LE細(xì)胞依據(jù),須重復(fù)屢次檢驗,找到經(jīng)典LE細(xì)胞才能匯報陽性。
紅斑狼瘡檢查第11頁LE形成需要條件患者血清中存在LE因子受損或退變細(xì)胞核,即被LE因子作用核含有吞噬活性白細(xì)胞紅斑狼瘡檢查第12頁LE三種形態(tài)
必須找到經(jīng)典吞噬體才能匯報陽性結(jié)果游離均勻體(前期)花形細(xì)胞簇(花簇期)吞噬體(吞噬期)紅斑狼瘡檢查第13頁LE細(xì)胞紅斑狼瘡檢查第14頁LE細(xì)胞LE細(xì)胞紅斑狼瘡檢查第15頁紅斑狼瘡檢查第16頁紅斑狼瘡檢查第17頁紅斑狼瘡檢查第18頁紅斑狼瘡檢查第19頁紅斑狼瘡檢查第20頁紅斑狼瘡檢查第21頁紅斑狼瘡檢查第22頁紅斑狼瘡檢查第23頁本身抗體:各種多樣抗核抗體抗ds-DNA抗體抗Sm抗體2.免疫學(xué)檢驗法紅斑狼瘡檢查第24頁注意事項1、采血后應(yīng)馬上檢驗,不能放置過久,不然游離均勻體或LE細(xì)胞退化,造成假陰性。
2、孵育時間要適當(dāng),普通37°C2h為宜,時間過短,LE細(xì)胞均勻體未能形成,染色不佳,檢出率低,易造成假陰性結(jié)果;時間過長,則因為細(xì)胞退化,溶解而消失或識別困難也會出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
3、應(yīng)多檢驗幾張涂片,以提升陽性率,尤其注意涂片尾部和邊緣,最好先用低倍鏡或高倍鏡尋找,再用油鏡判定。
紅斑狼瘡檢查第25頁發(fā)覺LE細(xì)胞,結(jié)合臨床表現(xiàn)方可診療SLE系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人,LE細(xì)胞陽性率普通為70%~90%,對該病診療含有一定意義。通常在活動期輕易找到,在緩解期不易找到,使用激素治療后往往消失,病情嚴(yán)重者,在血液、骨髓、胸腹水直接涂片中,亦可找到LE細(xì)胞。LE細(xì)胞形成,為一個抗核抗體免疫反應(yīng),除系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)?,其它本身免疫性疾病,如風(fēng)濕熱、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病等亦可偶見LE細(xì)胞,所以,發(fā)覺LE細(xì)胞,尚需結(jié)合臨床表現(xiàn)及抗核抗體檢驗等,才能確診為系統(tǒng)性紅
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