中藥材中硝酸鹽含量測(cè)定方法的研究

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R478.9A2095-6851（2022）09--01

1材料與方法

1.1測(cè)驗(yàn)材料

測(cè)驗(yàn)選用不同品種的丹參藥材分別為北丹1號(hào)（選育品種）、陜黃1號(hào)（選育品系），濱海丹參。該中藥材栽培于藥植所栽培試驗(yàn)基地，分為地下根及根莖、莖及葉三片面（由于陜黃1號(hào)莖不明顯，所以至分成根、莖兩片面）曬干。

連作種植丹參藥材選用北丹一號(hào)為試驗(yàn)品種，試驗(yàn)區(qū)面積30m2。丹參施肥試驗(yàn)處理有：頭茬常規(guī)施肥：雞糞500kg/667m2、復(fù)合肥100kg/667m2；連作常規(guī)施肥：雞糞500kg/667m2、復(fù)合肥100kg/667m2。連作生物有機(jī)肥：生物有機(jī)肥500kg/667m2（其中250kg撒施，250kg按1：1伴土穴施），復(fù)合肥：100kg/667m2。

1.2測(cè)驗(yàn)設(shè)備和儀器

HH-6型數(shù)顯恒溫水浴鍋，UV752N紫外可見分光光度計(jì)，F(xiàn)W135中草藥粉碎機(jī)（天津泰斯特儀器有限公司），DIONEXICS-1000離子色譜儀（包括Chromeleon7色譜工作站）、SIGMA3K15離心機(jī)、KQ5200DV型數(shù)控超聲波清洗器、AL204萬分之一電子天平、HDM-3000數(shù)顯控溫電熱套。

1.3測(cè)驗(yàn)方法

1.3.1供試品溶液的提取

細(xì)致稱取粉碎樣品0.50g，置三角燒瓶中，切實(shí)參與去離子水50mL，超聲處理30min，轉(zhuǎn)移提取液于10mL離心管中，12000r/min，離心15min，取上清液過RP小柱（依次用甲醇、水淋洗預(yù)處理），棄去前3mL流出液，收集后2mL流出液，流出液過0.22m濾頭后直接進(jìn)樣。

1.3.2對(duì)照品溶液的配制

細(xì)致稱取0.75g經(jīng)105℃枯燥至恒重的亞硝酸鈉于500mL容量瓶中加水定容，配制1000g/mLNO_2^-標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)蓄液；細(xì)致稱取0.815g硝酸鉀于500mL容量瓶中加水定容，配成1000g/mLNO_3^-標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)蓄液；細(xì)致移取1mL亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)蓄液于100mL容量瓶中，配制10g/mLNO_2^-標(biāo)準(zhǔn)使用液。細(xì)致移取5mL硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)蓄液于100mL容量瓶中，配制501000g/mLNO_3^-標(biāo)準(zhǔn)使用液。

1.3.3色譜條件

水為超純水，電阻率為18.2MΩ?cm^（-1），亞硝酸鈉和硝酸鉀對(duì)照品均為分析純（純度≥99.0%），碳酸鈉（純度≥99.5%），碳酸氫鈉（純度≥99.7%）。IonPacAS234250mm離子交換柱、IonPacAS23450mm養(yǎng)護(hù)柱、ASRS300-4mm抑制器。

1.3.4測(cè)定方法

按設(shè)定的色譜條件，待基線穩(wěn)定后，依次取一致體積的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和待測(cè)樣品溶液，注入離子色譜儀，根據(jù)留存時(shí)間定性，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。

2結(jié)果與分析

2.1不同品種丹參藥材中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量分析

丹參的不同品種及植株的不同部位中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量測(cè)定結(jié)果見表1。從表1的測(cè)定結(jié)果可以看出，不同品種丹參根中亞硝酸鹽含量有明顯差異，其中濱海丹參是北丹1號(hào)、陜黃1號(hào)中的2倍，而北丹1號(hào)及陜黃1號(hào)區(qū)別不大。

不同品種丹參的根部硝酸鹽含量差異特別明顯，表現(xiàn)為濱海丹參>北丹1號(hào)>陜黃1號(hào)。而丹參葉中亞硝酸鹽含量差異不大，其中硝酸鹽含量差異明顯，表現(xiàn)為陜黃1號(hào)>北丹1號(hào)>濱海丹參。不同品種丹參莖部亞硝酸鹽含量差異不大，而莖中硝酸鹽含量具有明顯差異，北丹1號(hào)莖中硝酸鹽含量最高，可以達(dá)成15000mg/kg。從植株的不同部位亞硝酸鹽含量來看，濱海丹參為莖>根>葉，三者之間具有明顯的差異；北丹1號(hào)為莖>根>葉，根、莖之間差異不明顯，但與葉之間具有明顯的差異；陜黃1號(hào)為根>葉，根、葉差異明顯。不同品種植株的不同部位硝酸鹽含量均表現(xiàn)為莖>根>葉，三者之間差異特別明顯。

2.2連作及施肥對(duì)丹參藥材中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量的影響

連作及施肥對(duì)丹參藥材中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量影響的測(cè)定結(jié)果見表2。從表2中的測(cè)定結(jié)果可以看出，頭茬常規(guī)施肥和連作常規(guī)施肥丹參中亞硝酸鹽含量差異不大，在6.4mg/kg左右；而生物有機(jī)肥能夠明顯裁減連坐地丹參中亞硝酸鹽含量，為4.7mg/kg。從硝酸鹽含量變化來看，在施用一致肥料條件下，連作能夠明顯促進(jìn)丹參中硝酸鹽的積累，連作常規(guī)施肥丹參中硝酸鹽含量是頭茬常規(guī)施肥的5倍；在一致的土壤條件下，生物有機(jī)肥能夠明顯降低丹參中硝酸鹽含量。

3議論

根據(jù)《食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的測(cè)定方法》（GB5009.33-2022）中的試驗(yàn)說明，當(dāng)采用分光光度法測(cè)定中藥材亞硝酸鹽含量時(shí)，由于中藥材中酮類、酚酸類有機(jī)化合物易溶于水，水提取液參與顯色劑后顯色液呈深色，嚴(yán)重干擾比色結(jié)果，OD值為負(fù)值。硝酸鹽那么采用鎘柱恢復(fù)為亞硝酸鹽后測(cè)定，該方法需分步測(cè)定硝酸鹽和亞硝酸鹽，操作繁瑣，專屬性差，試驗(yàn)過程中檢驗(yàn)人員需要接觸具有致癌性的鎘。因此，分光光度法無法應(yīng)用于中