W3401試劑的準(zhǔn)備和配置2微

試劑的準(zhǔn)備與配制—高錳酸鉀吸收曲線的繪制儀器分析技術(shù)主要內(nèi)容測定條件的選擇1分光光度法定性定量的原理2高錳酸鉀溶液的配制3分光光度計(jì)的使用41測定條件的選擇試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制1.測定波長的選擇2.吸光度范圍的選擇3.參比溶液的選擇一、測定條件的選擇配制一濃度適當(dāng)?shù)娜芤?，在分光光度?jì)上，依次以不同的波長的入射光通過該溶液，測定吸光度（用A表示）。然后以吸光度A為縱坐標(biāo)，波長λ為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙或計(jì)算機(jī)上作圖，可得到一條曲線。這條A-λ曲線稱為該溶液的吸收曲線或稱吸收光譜曲線。試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制物質(zhì)的吸收曲線是分光光度法選擇測定波長的重要依據(jù)。通常是選擇λmax為測定波長，以提高測定的靈敏度，但若在λmax處有干擾時(shí)，在保證靈敏度的前提下，也可選擇其他波長。1.測定波長的選擇2.吸光度范圍的選擇3.參比溶液的選擇一、測定條件的選擇根據(jù)朗伯-比耳定律，當(dāng)A=0.434時(shí)，濃度的相對誤差最小。吸光度讀數(shù)在0.2-0.8時(shí)，濃度的相對誤差小于4%?？刂频姆椒ㄓ校嚎刂茦悠返姆Q樣量或稀釋倍數(shù)來調(diào)節(jié)試液濃度。選用不同厚度的比色皿。試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制1.測定波長的選擇2.吸光度范圍的選擇3.參比溶液的選擇一、測定條件的選擇溶劑參比：以純?nèi)芤鹤鳛閰⒈热芤海热缯麴s水。 試劑參比：不加入樣品，同樣加入試劑與溶劑的混合液。樣品參比：只是不加入顯色劑的混合液作參比溶液。平行操作參比：不含被測組分的樣品，在相同的條件下與被測樣品同時(shí)進(jìn)行處理，得到平行操作參比溶液。試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制2分光光度法定性定量的原理試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制定性分析基礎(chǔ)定量分析基礎(chǔ)物質(zhì)對光的選擇吸收：不同物質(zhì)吸收光譜不同；相同物質(zhì)吸收光譜相同ABA在一定條件下，物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)的濃度成正比。一定的物質(zhì)，濃度增加，λmax不變，吸收程度成比例增加AC增大二、分光光度法定性定量的原理試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制3高錳酸鉀溶液的配制試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制三、高錳酸鉀溶液的配制試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制稱取1.6g高錳酸鉀于小燒杯中，加入少量水，溶解后轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，貼上標(biāo)簽。該溶液的高錳酸鉀的濃度約為0.01mol/L。0.01mol/L高錳酸鉀溶液配制思考：配制0.0001mol/L高錳酸鉀溶液100ml，問：需要量取0.01mol/L高錳酸鉀溶液多少ml？如何操作？4分光光度計(jì)的使用試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制使用方法1注意事項(xiàng)2四、分光光度計(jì)的使用試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制四、分光光度計(jì)的使用試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制使用方法1接通電源，打開儀器電源開關(guān)，打開樣品室蓋，預(yù)熱10min;將空白液或?qū)φ找杭皽y定液分別裝入比色杯3/4體積并用擦鏡紙擦凈外壁，放入樣品室內(nèi),空白液一般放于最外格，樣品比色杯放入位置與試管位置對應(yīng);調(diào)好波長;調(diào)節(jié)按鈕開蓋時(shí)，調(diào)T參數(shù)調(diào)為100

合上蓋，調(diào)A參數(shù)調(diào)為0;逐步拉出樣品室拉桿（聽到“咔”一聲），讀取吸光度值(A）；讀數(shù)完打開樣品室蓋，再將讀數(shù)寫入記錄本。四、分光光度計(jì)的使用試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制樣品室蓋應(yīng)輕開輕放；比色皿拿其磨砂面，液體裝入約3/4高度，并用擦鏡紙擦凈外壁，每次用完后自來水沖洗干凈，倒置于濾紙上；倒取試劑時(shí)不能在儀器表面上方操作，儀器上請勿放任何物品；每調(diào)換一次波長，都應(yīng)將空白溶液的吸光度調(diào)至“0”。注意事項(xiàng)2UV1600紫外可見分光光度計(jì)操作步驟

四、分光光度計(jì)的使用試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制1.打開電源（開關(guān)在儀器的左下側(cè)）；2.按任意鍵（除復(fù)位鍵外）儀器進(jìn)行自檢；3.待自檢結(jié)束，按任意鍵進(jìn)入主菜單；4.進(jìn)入主菜單后，按數(shù)字鍵2，進(jìn)入光度測量；UV1600紫外可見分光光度計(jì)操作步驟

四、分光光度計(jì)的使用試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制5.按F1進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)置菜單，將參數(shù)設(shè)置如下：比色皿校正關(guān)（開）換燈點(diǎn)356.5樣池?cái)?shù)7波長數(shù)1UV1600紫外可見分光光度計(jì)操作步驟

四、分光光度計(jì)的使用試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制6.參數(shù)設(shè)置好后，按GOTO鍵進(jìn)入設(shè)置檢測波長界面，進(jìn)入該界面后，輸入所需的檢測波長，按ENTER鍵確認(rèn)。按RETURN鍵返回參數(shù)設(shè)置菜單，再按RETURN鍵返回至光度測量主操作界面。UV1600紫外可見分光光度計(jì)操作步驟

四、分光光度計(jì)的使用試劑的配制與準(zhǔn)備—高錳酸鉀吸收曲線的繪制7.將參比放在8號樣池，將樣品放在1-7號樣品池內(nèi)，蓋上