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影響血液凝固的因素第一頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹坑^察某些因素對(duì)血液凝固的影響【實(shí)驗(yàn)原理】血液凝固過(guò)程中必須較多因子的參與,因此血液凝固受許多因素的影響,除凝血因子可直接影響血凝過(guò)程外,血凝還受接觸面、溫度等影響。第二頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日血液凝固(bloodcoagulation)
概念:血液從流動(dòng)的溶膠狀態(tài)轉(zhuǎn)變成不能流動(dòng)的凝膠狀態(tài)的過(guò)程本質(zhì):可溶的纖維蛋白原變?yōu)椴蝗艿睦w維蛋白并交織成網(wǎng),網(wǎng)羅血細(xì)胞等成分形成凝血塊。第三頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日血液的凝固是由一系列凝血因子參與的復(fù)雜的蛋白質(zhì)酶解過(guò)程凝血因子(coagulationfactor)凝血因子是無(wú)活性酶原,有限水解才具活性。除Ⅳ因子(Ga2+)外其余多為蛋白質(zhì),在肝合成,其中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的合成必須有VitK參與。Ⅲ存在于組織中,其它因子均在血漿中。Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ都是絲氨酸蛋白酶,能對(duì)特定肽鏈有限水解。Ⅲ、Ⅴ、Ⅷ在反應(yīng)中起輔因子的作用,可使相應(yīng)絲氨酸蛋白酶凝血因子的催化速率增快上萬(wàn)倍。不能從腎小球?yàn)V過(guò),降解和失活在肝臟完成。第四頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日凝血因子第五頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日內(nèi)源性激活途徑(Ⅻ)外源性激活途徑(Ⅲ)凝血酶原激活物凝血酶原凝血酶纖維蛋白原纖維蛋白血液凝固的過(guò)程第六頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日表面激活+第七頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日
外源性凝血途徑在凝血的啟動(dòng)中起關(guān)鍵作用,組織因子是凝血反應(yīng)過(guò)程的啟動(dòng)物。
“截短的”內(nèi)源性凝血途徑在放大階段對(duì)凝血反應(yīng)開(kāi)始后的維持和鞏固起重要作用。第八頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日血漿和血清:血清中缺乏凝血因子和纖維蛋白原,但增加了少量凝血過(guò)程中血管內(nèi)皮和血小板釋放的物質(zhì)。第九頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日血液凝固的控制2.血液的稀釋、纖維蛋白吸附及單核巨嗜細(xì)胞的吞噬作用1.血管內(nèi)皮抗凝作用3.生理性抗凝物質(zhì)絲氨酸蛋白酶抑制物蛋白質(zhì)C系統(tǒng)組織因子途徑抑制物(TFPI)肝素第十頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日纖維蛋白的溶解纖溶系統(tǒng):纖維蛋白(原)在纖維蛋白溶解酶的作用下降解為纖維蛋白降解物(FDP)而分解液化的過(guò)程。纖溶生理意義:①保持血流通暢,血液處于流動(dòng)狀態(tài)
②維持血管正常通透性
③維持血液凝固與纖溶的動(dòng)態(tài)平衡第十一頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日纖溶的兩個(gè)基本階段:纖溶酶原的激活;纖維蛋白(纖維蛋白原)的降解纖溶酶原纖溶酶纖維蛋白(原)纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物纖溶酶原激活物纖溶酶原激活物抑制劑纖溶酶抑制劑第十二頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日纖溶酶原激活物組織型纖溶酶原激活物(t-PA):血管內(nèi)皮合成,發(fā)揮局部溶栓作用,保持血流通暢。尿激酶型纖溶酶原激活物:腎小管、集合管產(chǎn)生,在組織修復(fù)、傷口愈合過(guò)程中,血管外促進(jìn)纖溶。纖溶酶原的激活:第十三頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日注意:(1)凝血是一個(gè)正反饋機(jī)制,一旦啟動(dòng),必迅速完成全過(guò)程。(2)Ca2+在多個(gè)環(huán)節(jié)起作用,因此控制Ca2+就能控制血凝。(3)血凝過(guò)程是流水線(xiàn),阻斷其中一步,則凝血過(guò)程必終止。第十四頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】
家兔【實(shí)驗(yàn)器材與藥品】
哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)手術(shù)器械一套、20ml注射器1副、小燒杯2個(gè)、竹簽、清潔小試管6支、水浴裝置一套、冰塊、棉花、石蠟油、滴管、肝素、草酸鉀、0.025mol/LCaCl2溶液、肺組織浸液、富血小板血漿、少血小板血漿、生理鹽水第十五頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日【實(shí)驗(yàn)步驟和觀察項(xiàng)目】
1.麻醉:1.5%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉,劑量2ml/kg體重2.固定、備皮氣管插管3.手術(shù)頸總動(dòng)脈插管。第十六頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日4.做好準(zhǔn)備工作:按下2表做好各試管的準(zhǔn)備、人員分工、計(jì)時(shí)等。
表一影響血凝的理化因素
實(shí)驗(yàn)條件
凝血所需時(shí)間加棉花少許用石蠟油潤(rùn)滑試管表面保溫于37℃水浴糟中
放置于冰浴糟中加肝素8單位(加血后搖勻)加草酸鉀1~2mg(加血后搖勻)
第十七頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日
5.取血:打開(kāi)動(dòng)脈夾,經(jīng)頸動(dòng)脈插管放血入各試管,每支試管各采血約1.5ml(一定要一次性采血完畢,多次放血可能會(huì)出現(xiàn)血液凝固于插管內(nèi)而不能再放血),注意及時(shí)計(jì)時(shí)并將各試管盡快置于其實(shí)驗(yàn)條件下,如搖勻、放入溫浴槽、冰浴槽內(nèi)等。
第十八頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日6.實(shí)驗(yàn)觀察
每隔30s將各試管輕輕傾斜一次,觀察其中的血液是否已凝固,發(fā)現(xiàn)其中的血液已呈凝膠狀而不再流動(dòng)時(shí)記錄其時(shí)間,最后計(jì)算出各試管血液凝固所需的時(shí)間(在本實(shí)驗(yàn)條件下,如超過(guò)30分鐘血液仍未凝則視為“不凝”)。第十九頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日觀察內(nèi)源性凝血、外源性凝血過(guò)程以及血小板對(duì)血液凝固的影響,取干潔小試管3支,按表1-1加入各種成分,搖勻,最后再加入0.025mol/CaCl2溶液并同時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí),靜置,第一管、第二管每15s傾斜一次,第三管每隔5s傾斜一次,觀察器中的血漿已不能流動(dòng)即已完全凝固,并分別記錄三個(gè)試管的血漿凝固時(shí)間。表二
內(nèi)源性和外源性凝血的觀察
試劑
試管號(hào)
123富血小板血漿(ml)
0.2
少血小板血漿ml)
0.2
0.2
生理鹽水(ml)
0.2
0.2
肺組織浸液(ml)
0.2
0.025mol/LCaCl2溶液
0.2
0.2
0.2
血漿凝固時(shí)間
第二十頁(yè),共二十二頁(yè),2022年,8月28日【分析討論】1.表一:(1)比較第一管(放棉花管)與第二管(石蠟油潤(rùn)滑管)內(nèi)血液凝固的速度,并分析產(chǎn)生區(qū)別的原因。(2)比較第三管(37℃管)與第四管(冰浴管)內(nèi)血液凝固的速度,并分析產(chǎn)生區(qū)別的原因。(3
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