微生物第六章大腸桿菌二

第二節(jié)埃希菌屬

Escherichia

人類和動(dòng)物腸道中的正常菌群出生后數(shù)小時(shí)就進(jìn)入腸道，并終生伴隨一、分類：大腸埃希菌（E.coli）：最常見(jiàn)的臨床分離菌蟑螂埃希菌弗格森埃希菌赫爾曼埃希菌傷口埃希菌（一）致病因素：1.侵襲力：K抗原：抗吞噬、抗補(bǔ)體、抗體作用菌毛：定植因子，黏附作用2.內(nèi)毒素：3.腸毒素：不耐腸毒素（LT）耐熱腸毒素（ST）4.志賀樣毒素（EHEC產(chǎn)生）二、臨床意義：

(二）所致疾病

正常菌群，一般不致病兩大原因可以致病1.條件致病細(xì)菌居住部位改變引起的腸外感染：泌尿系統(tǒng)感染：尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎敗血癥嬰兒腦膜炎2.致病菌株

(1）腸道外致病性大腸桿菌(ExPEC):通過(guò)其特有的毒力因子（菌毛、黏附素、細(xì)胞表面亞基、侵襲因子、鐵相關(guān)蛋白、毒素等）侵襲、定植于腸外組織，并誘發(fā)感染

①尿道致病性大腸埃希菌(UPEC):②腦膜炎/膿毒癥相關(guān)大腸埃希菌（ＭＮＥＣ）:(2）致瀉性大腸埃希菌：某些帶有致病基因的血清型，引起腸道感染美國(guó)臨床數(shù)據(jù)顯示:由革蘭陰性菌引起的新生兒腦膜炎中50%是ExPEC造成的在泌尿道的感染中70%～90%是ExPEC所致

引起腸道感染的大腸埃希菌分為五類：①腸毒素大腸埃希菌（enterotoxigenicE.coli,ETEC）②腸致病型大腸埃希菌（enteropathogenicE.coli,EPEC）③腸侵襲型大腸埃希菌（enteroinvasiveE.coli,EIEC）④腸出血型大腸埃希菌（enterohemorrhagicE.coli,EHEC）⑤腸凝聚型大腸埃希菌（enteroaggregativeE.coli,EAggEC）腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌

(enterotoxigenicE.coli,ETEC)

致病物質(zhì)腸毒素enterotoxinheatlabileenterotoxin(LT)heatstableenterotoxin(ST定植因子(菌毛）嬰幼兒、旅游者腹瀉，與霍亂相似，水樣便腸致病型大腸埃希菌

(enteropathogenicE.coli,EPEC)嬰幼兒腹瀉:水樣或蛋花湯樣便致病機(jī)理粘附和破壞腸粘膜微絨毛上皮細(xì)胞排列紊亂，功能受損，導(dǎo)致腹瀉腸侵襲型大腸埃希菌

(enteroinvasiveE.coli,EIEC)致病機(jī)理侵襲結(jié)腸粘膜上皮并繁殖細(xì)菌死亡后釋放內(nèi)毒素，引起炎癥成人腹瀉，與菌痢相似，有膿血便，有里急后重腸出血型大腸埃希菌

(enterohemorrhagicE.coli,EHEC)亦稱為Vero毒素大腸埃希菌血清型主為O157:H7致病因子菌毛毒素Vero毒素內(nèi)毒素與溶血素臨床表現(xiàn)輕重不一出血性結(jié)腸炎

10%小于十歲患兒，有嚴(yán)重并發(fā)癥，溶血性尿毒綜合征（HUS）等死亡率高腸集聚型大腸埃希菌

(enteroaggregativeE.coli,EAggEC)致病因子腸集聚耐熱毒素（EAST）

嬰兒腹瀉三、微生物學(xué)檢查（一）生物學(xué)性狀：1、共性：2、個(gè)性：1)革蘭陰性桿菌，無(wú)規(guī)則散在排列2)莢膜或微莢膜(部分菌株)和周身菌毛3)培養(yǎng)特性：兼性厭氧、營(yíng)養(yǎng)要求不高液體培養(yǎng)基呈混濁生長(zhǎng)

NA:較大、圓形、光滑、濕潤(rùn)、灰白色菌落

Mac:可發(fā)酵乳糖，形成有色菌落

EMB平板：菌落呈金屬光澤藍(lán)紫色大腸埃希菌革蘭染色圖圖1：大腸埃希菌普通平板上菌落圖2：大腸埃希菌EMB平板上菌落圖3：大腸埃希菌Mac平板上粉紅色菌落1234)、發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣

KIA結(jié)果：AA+—MIU結(jié)果：++—IMViC結(jié)果：++——

大腸埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－）動(dòng)力及尿毒酶試驗(yàn)大腸埃希菌奇異變形桿菌指示劑：酚紅大腸埃希菌對(duì)照-吲哚試驗(yàn)枸椽酸鹽利用試驗(yàn)大腸埃希菌甲基紅試驗(yàn)VP試驗(yàn)大腸埃希菌大腸埃希菌對(duì)照-對(duì)照+對(duì)照+結(jié)果；

IMViC試驗(yàn)（＋＋－－）

3、抗原結(jié)構(gòu)：O抗原：171種H抗原：56種K抗原：100種大腸埃希菌血清型：按O:K:H的順序，以數(shù)字表示

O111∶K58∶H2O157∶H7（二）實(shí)驗(yàn)室檢查一）標(biāo)本采集根據(jù)不同感染部位采集不同標(biāo)本腸外標(biāo)本有尿液、血液、膿液、創(chuàng)口滲出液、腦脊液、痰等

泌尿系統(tǒng)除確定大腸桿菌外，還應(yīng)計(jì)數(shù)，每毫升尿含菌量≥10時(shí)，才有診斷價(jià)值

腹瀉病人取糞便、肛拭標(biāo)本53）、檢驗(yàn)方法：①涂片、染色、鏡檢：腸外標(biāo)本②分離培養(yǎng)：腸道標(biāo)本:接種弱選擇培養(yǎng)基腸外標(biāo)本:接種血平板與弱選擇培養(yǎng)基標(biāo)本量較少先用肉湯增菌

③鑒定：

：主要根據(jù)生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定初步鑒定：菌落特征可疑菌落涂片、染色、鏡檢挑取可疑菌落做生化反應(yīng)：

IMViC++-

-，脲酶陰性，KIA上發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，大多數(shù)分解乳糖，硫化氫陰性，動(dòng)力陽(yáng)性，可初步鑒定為大腸埃希菌微生物學(xué)檢驗(yàn)最終鑒定：全面生化反應(yīng)亦可用腸桿菌科診斷試劑盒埃希菌屬內(nèi)各菌種的鑒別微生物學(xué)檢驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)：

一般不做僅作為腸內(nèi)感染的大腸埃希菌鑒定手段之一引起腹瀉及腸道感染的大腸埃希菌血清型1）ETEC的檢測(cè)

分離培養(yǎng)+生化反應(yīng)+血清學(xué)分型+腸毒素測(cè)定生化反應(yīng)符合大腸桿菌特征；血清學(xué)鑒定符合ETEC血清型；（可不做）檢出大腸桿菌不耐熱腸毒素（LT）和／或耐熱腸毒素（ST）：目前臨床主要采用ELISA法的商品試劑盒報(bào)告產(chǎn)毒大腸埃希菌應(yīng)有腸毒素試驗(yàn)的結(jié)果

2）EPEC的檢測(cè)：

分離培養(yǎng)+生化反應(yīng)+血清學(xué)分型生化反應(yīng)符合大腸桿菌特征；血清學(xué)鑒定符合EPEC血清型：O多價(jià)血清（+）呈陽(yáng)性的多價(jià)血清中的各單價(jià)血清做玻片凝集確定血清型H抗原測(cè)定報(bào)告腸致病性大腸埃希氏菌應(yīng)有血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果多價(jià)血清名稱檢測(cè)的血清型多價(jià)1(EPEC)O1，O26，O86，O111，O119，O127，O128多價(jià)2(EPEC)O44，O55，O125，O126，O146，O166多價(jià)3(EPEC)O18，O114，O142，O151，O157(EHEC)，O158多價(jià)4(ETEC)O6，O27，O78，O148，O159，O168多價(jià)5(ETEC)O20，O25，O63，O153，O167多價(jià)6(ETEC)O8，O15，O115，O169多價(jià)7(EIEC)O28，O112ab，O124，O136，O144多價(jià)8(EIEC)O29，O143，O152，O164多價(jià)9O45(ETEC)，O85(ETEC)，O149(ETEC)，O88(EPEC）O113(EHEC)，O117(EHEC)多價(jià)10(STEC)O91，O118，O138，O1453）EIEC的檢測(cè)：

分離培養(yǎng)+生化反應(yīng)+血清學(xué)分型+毒力試驗(yàn)

生化反應(yīng)結(jié)果：發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵乳糖，除O124外無(wú)動(dòng)力，賴氨酸脫羧酶陰性。血清學(xué)鑒定符合EIEC血清型；豚鼠眼結(jié)膜試驗(yàn)陽(yáng)性：可疑EIEC菌落豚鼠眼結(jié)膜

與志賀菌鑒別！報(bào)告性大腸埃希菌應(yīng)有豚鼠角膜試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)的結(jié)果EIEC的檢測(cè)多數(shù)EIEC動(dòng)力陰性，不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵乳糖應(yīng)與志賀菌屬相鑒別

醋酸鈉利用試驗(yàn)葡萄糖銨利用試驗(yàn)粘質(zhì)酸產(chǎn)酸試驗(yàn)EIEC+++志賀菌屬--

-葡萄糖銨鹽試驗(yàn)

陽(yáng)性：黃綠色陰性：藍(lán)色

4）EHEC的檢測(cè)：目前最具代表性的是O157：H7一個(gè)血清型

分離培養(yǎng)+生化反應(yīng)+血清學(xué)分型生化反應(yīng)：符合標(biāo)準(zhǔn)大腸埃希菌，遲緩發(fā)酵山梨醇，在山梨醇麥康凱瓊脂平板上無(wú)色菌落；血清學(xué)鑒定：O157和H7抗血清做玻片凝集和試管凝集試驗(yàn)，其血清型為O157：H7

志賀毒素鑒定:PCR

曾在世界范圍內(nèi)多次爆發(fā)流行許多國(guó)家將O157∶H7當(dāng)作傳染性病原菌進(jìn)行監(jiān)測(cè)疑為O157:H7感染的標(biāo)本應(yīng)使用山梨醇麥康凱瓊脂，35℃培養(yǎng)24~48h選擇無(wú)色菌落進(jìn)行毒素測(cè)定。O157:H7山梨醇麥康凱瓊脂O157:H7麥康凱瓊脂O157:H7EIEC的檢測(cè)E.coliO157:H7ID顯色培養(yǎng)基典型菌落O157：H7墨綠色菌落血液、腦脊液、中段尿（計(jì)數(shù)細(xì)菌）、膽汁、膿液、痰、分泌物（除膿、痰外均需肉浸湯增菌培養(yǎng)）革蘭染色鏡檢血瓊脂MAC35℃18～24h挑選可疑菌落初步鑒定：革蘭染色、菌落特征、氧化酶試驗(yàn)IMViC、KIA、MIU最終鑒定：系統(tǒng)生化反應(yīng)結(jié)果報(bào)告二）檢驗(yàn)程序1、腸外感染糞便、直腸拭子MACEMBETEC：血清學(xué)鑒定腸毒素測(cè)定報(bào)告檢出或未檢出ETECEPEC、EIEC、EHEC：菌落與分組O多價(jià)血清作玻片凝集不凝集強(qiáng)凝集報(bào)告未檢出EPEC或EIEC或EHEC血清學(xué)分型等結(jié)果報(bào)告35℃18～24h挑選可疑菌落初步鑒定：革蘭染色菌落特征氧化酶試驗(yàn)IMViCKIA、MIU最終鑒定：系統(tǒng)生化反應(yīng)腸內(nèi)感染

大腸埃希菌鑒定依據(jù)腸道選擇培養(yǎng)基上為乳糖發(fā)酵菌落KIA上發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、大多數(shù)分解乳糖，不產(chǎn)硫化氫IMViC++--，MIU++—致病性大腸埃希菌除生化反應(yīng)符合外，必須做血清學(xué)鑒定或毒力測(cè)定

第三節(jié)沙門(mén)菌屬

Salmonella一大群人與動(dòng)物腸道中的寄生菌菌群菌型甚多，僅少數(shù)對(duì)人致病與人類有關(guān)系的主要有:

傷寒沙門(mén)菌(D群)

副傷寒A沙門(mén)菌(A群)

副傷寒B沙門(mén)菌(B群)

鼠傷寒沙門(mén)菌(B群)

豬霍亂沙門(mén)菌(C群)沙門(mén)菌屬腸道沙門(mén)菌邦戈沙門(mén)菌22

合計(jì)2579（2007年)亞種Ⅰ腸道亞種

1531亞種Ⅱ薩拉姆亞種505亞種Ⅲa亞利桑那亞種99亞種Ⅲb雙亞利桑那亞種336亞種Ⅳ豪頓亞種73亞種Ⅵ英迪加亞種13致病沙門(mén)菌多為腸道亞種一、分類

Kauffmann-White沙門(mén)菌血清分型系統(tǒng)二、臨床意義：致病因素1.侵襲力菌毛——吸附

Vi抗原——微莢膜（抗吞噬）2.內(nèi)毒素3.腸毒素個(gè)別（鼠傷寒沙門(mén)菌）產(chǎn)生與ETEC腸毒素相似致病種類：1.傷寒、副傷寒;

攜帶者2.非傷寒型沙門(mén)菌感染(1)胃腸炎(2)腸外感染;菌血癥膽囊-----腸道-------糞排菌皮膚----血栓出血--玫瑰疹腎-----尿肝脾-----腫大骨髓傷寒沙門(mén)和副傷寒桿菌小腸腸系膜淋巴結(jié)

進(jìn)入血液再次進(jìn)入血液第一次菌血癥第二次菌血癥病程第1周傷寒和副傷寒的致病過(guò)程第二次菌血癥病程2，3周全身單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)

（肝、脾、骨髓與淋巴結(jié)中的巨噬細(xì)胞吞噬）

+大量生長(zhǎng)繁殖小腸巨噬細(xì)胞吞噬+繁殖三、微生物學(xué)檢查（一）生物學(xué)性狀：1、共性：2、個(gè)性：1)、本菌較為細(xì)長(zhǎng)，周身鞭毛 2)、培養(yǎng)及生化

不發(fā)酵乳糖發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒沙門(mén)菌不產(chǎn)氣）

多數(shù)H2S+，動(dòng)力+，尿素（-）（副傷寒A不產(chǎn)H2S

）

KIAKA++MIU+--IMViC-+-+（傷寒/豬霍亂沙門(mén)菌：CIT(-)）

傷寒沙門(mén)菌鍍銀染色×1000傷寒沙門(mén)菌：KIA（KA－＋）MIU（＋－－）IMViC（－＋－－）麥康凱平板：不發(fā)酵乳糖形成不透明無(wú)色菌落SS（Salmonellashigella）平板：產(chǎn)生H2S,黑色菌落傷寒沙門(mén)菌Ｍac37℃18hSS(salmonella-shigella)配方牛肉浸粉：5g蛋白胨：5g乳糖：10g膽鹽：8.5g煌綠：0.33mg枸椽酸鈉：8.5g硫代硫酸鈉：8.5g枸椽酸鐵：1.0g中性紅：0.025g瓊脂：13.5g蒸餾水：1000mlSS培養(yǎng)基（沙門(mén)志賀培養(yǎng)基）乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠等抑制劑選擇抑制作用（強(qiáng)選）大腸埃希菌產(chǎn)酸桃紅色乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門(mén)菌無(wú)色乳糖不發(fā)酵菌落膽鹽、煌綠：抑制大腸埃希菌及G+菌，提高腸道致病菌檢出率乳糖發(fā)酵中性紅呈紅色乳糖不發(fā)酵H2S（+）菌株中心黑色的菌落傷寒沙門(mén)菌SS37℃18h

（3)

抗原構(gòu)造：極為復(fù)雜

O抗原耐熱、刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM

共有58種,表示方法：用字母O和阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)記，O1,O2,O3……….O67

如：傷寒桿菌：O9、O12

沙門(mén)氏菌的分群及表示方法沙門(mén)菌分群的依據(jù):含有共同O抗原的血清型歸為一個(gè)群大寫(xiě)字母及相關(guān)符號(hào)表示：A、B、C、D、E、F……Z、O51~O63、O65~O67

沙門(mén)氏菌中的主要菌群及其群特異性抗原A群----O2B群----O4C群----O6D群----O9F群----O11

E群----O3

H抗原:

分型的依據(jù)

刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG

鞭毛抗原H：分第1相和第2相第一相：特異相

表示方法：a,b,c……,z,z1,z2,z3……,z65

第二相：非特異相，表示為1，2，3，……，其中也有用小寫(xiě)字母a、n、x等表示僅有一相H抗原的沙門(mén)菌稱為單相菌同時(shí)有第一相和第二相抗原的細(xì)菌稱雙相菌③

表面抗原：Vi抗原（virulence）：熱不穩(wěn)定毒力有關(guān)抗原性弱，刺激機(jī)體產(chǎn)生短暫低效價(jià)抗體伴隨活菌一起存在測(cè)定Vi抗體有助于檢出帶菌者

有Vi抗原的菌株不被相應(yīng)的抗O血清凝集，稱為O不凝集性，破壞Vi抗原：60℃30min，100℃5minM抗原5抗原5)、本屬細(xì)菌易于變異

①S—R變異

②H—O變異

③位相變異（雙相菌變?yōu)閱蜗嗑?/p>

④V—W變異：有Vi抗原的菌株(V型)失去Vi抗原(W型)，即細(xì)菌與抗O血清凝集而不再與抗Vi血清凝集，稱為V-W變異

）

4)、抵抗力：對(duì)膽鹽和煌綠有抵抗力三、實(shí)驗(yàn)檢查：1.標(biāo)本采集①病程第一周內(nèi)采集靜脈血，因此時(shí)患者處于菌血癥時(shí)期。②第2～3周采集糞便、尿標(biāo)本，此時(shí)細(xì)菌由血流經(jīng)膽汁進(jìn)入腸腔，部分由糞便排出，而進(jìn)入腎的細(xì)菌則隨尿液排出體外。③病程第4周后，為恢復(fù)期慢性帶菌狀態(tài)，仍可作糞便培養(yǎng)。④全程可取骨髓做培養(yǎng)。2.直接檢查(1)顯微鏡檢查：(2)抗原檢測(cè):3.分離培養(yǎng)與鑒定增菌培養(yǎng)基：血標(biāo)本、骨髓：膽汁葡萄糖肉湯糞標(biāo)本：革蘭陰性增菌肉湯(Gramnegative,GN)常用培養(yǎng)基：血標(biāo)本——BAP,Mac;

糞標(biāo)本——Mac+SS瓊脂菌落特點(diǎn)：EMB上無(wú)色或不透明琥珀色

MAC上較小、無(wú)色透明

SS上不透明或透明、無(wú)色或中央為黑色的菌落

XLD上呈紅色或中央為黑色的菌落最后鑒定：

①全面生化試驗(yàn)②血清學(xué)分型鑒定（1）生化鑒定初步鑒定：KIAKA++（傷寒沙門(mén)菌發(fā)酵葡萄糖不產(chǎn)氣）

MIU+--IMViC-+-+

吲哚陰性、動(dòng)力陽(yáng)性、VP陰性、枸櫞酸鹽陰性、鳥(niǎo)氨酸陽(yáng)性凡臨床分離菌乳糖陽(yáng)性、吲哚陽(yáng)性或脲酶陽(yáng)性者均不考慮為沙門(mén)菌(2)血清學(xué)分型

95%以上的沙門(mén)菌臨床分離株屬A—F群

第一步：A—F群多價(jià)診斷血清凝集試驗(yàn)（+）---該菌屬于A—F群沙門(mén)菌第二步：A，B，C，D，E，F(xiàn)各單價(jià)因子血清凝集試驗(yàn)

鑒定血清群（A、B、C、D、E、F群)-----判定其屬于沙門(mén)氏菌屬何群第三步：H因子血清凝集試驗(yàn)鑒定血清型

----判定為何種血清型例:A-F多價(jià)O（＋）：?jiǎn)蝺r(jià)因子血清凝集:O9（＋）D群

H因子血清凝集:d（＋）

A-F多價(jià)O（－），做Vi血清因子凝集：（＋）濃菌液沸水煮沸30min，再用A-F多價(jià)O血清定群；（－）繼續(xù)以A-F以外的多價(jià)O血清凝集分型。血清凝集注意：確定O群后，一定要用H因子再做凝集；最終結(jié)果要以凝到H相后才能報(bào)告全名為腸道沙門(mén)菌腸道亞種傷寒血清型(或簡(jiǎn)稱沙門(mén)菌傷寒血清型)傷寒沙門(mén)氏菌

(9,12:d:-)主要沙門(mén)氏菌抗原結(jié)構(gòu)表群菌名O抗原H抗原第一相第二相A甲型副傷寒菌1.212.a_B乙型副傷寒菌1.4.5.12.b1.2鼠傷寒桿菌1.4.5.12.i1.2C希氏傷寒菌6.7.Vic1.5丙型副傷寒菌6.7c1.5D傷寒桿菌9.12.Vid--腸炎桿菌1.9.12g.m--E鴨沙門(mén)氏菌3.10.e.h1.6傷寒沙門(mén)菌(D群)甲型副傷寒沙門(mén)菌(A群)乙型副傷寒沙門(mén)菌(B群)鼠傷寒沙門(mén)菌(B群)豬霍亂（或丙型副傷寒）沙門(mén)菌(C群)③Vi噬菌體分型：非常規(guī)項(xiàng)目4、抗體檢測(cè)：肥達(dá)反應(yīng)（Widaltest）1)原理：已知的傷寒沙門(mén)菌、副傷寒沙門(mén)菌O，H標(biāo)準(zhǔn)抗原血清中相應(yīng)的抗體2)診斷標(biāo)準(zhǔn)：傷寒沙門(mén)菌:抗O(IgM)＞1:80,抗H＞1:160,副傷寒沙門(mén)菌H抗原:抗O(IgM)＞1:80,抗A，B，C＞1:80動(dòng)態(tài)觀察：雙份血清抗體四倍升高有診斷意義3)應(yīng)用：輔助診斷傷寒、副傷寒A，B，C。肥達(dá)反應(yīng)(Widaltest)O凝集（1:20～1:1280，效價(jià)1:80）H凝集（1:20～1:1280，效價(jià)1:320）生理鹽水＋待檢血清＋診斷抗原O抗原傷寒H甲型副傷寒H乙型副傷寒H觀察結(jié)果1:201:401:801:1601:3201:640

傷寒O1：160，傷寒H1：320肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果分析O抗體（IgM），H抗體（IgG）O、H抗體均升高，患傷寒的可能性大O、H抗體不升高，患傷寒的可能性小只有H升高，則可能是預(yù)防接種過(guò)或非特異性回憶反應(yīng)只有O升高而H不高，則可能是感染早期或其他沙門(mén)菌的交叉反應(yīng)沙門(mén)菌檢驗(yàn)程序

、

血清學(xué)定群、定型終報(bào)：分離出傷寒沙門(mén)菌沙門(mén)菌鑒定依據(jù)沙門(mén)菌鑒定主要依靠生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定腸道選擇平板上無(wú)色半透明菌落KIA：KA++MIU：+--

IMViC-+-+與A-F多價(jià)O診斷血清和相應(yīng)O因子血清、H因子血清凝集注意Vi抗原的存在第四節(jié)志賀菌屬（Shigella）一、抗原與分類根據(jù)O抗原分類：分為四個(gè)血清群菌種群型亞型痢疾志賀菌A1~10福氏志賀菌B1~6，X，Y變種鮑氏志賀菌C1~15宋內(nèi)志賀菌D1

二、臨床意義：致病物質(zhì)1、侵襲力：菌毛—有利于菌粘附至腸粘膜2、毒素：內(nèi)毒素腸粘膜通透性升高→毒素吸收→發(fā)熱、神志障礙、休克破壞腸粘膜→炎癥、潰瘍、膿血粘液便腸壁植物神經(jīng)→腸蠕動(dòng)失調(diào)、痙攣→腹痛、里急后重內(nèi)毒素血癥外毒素（A群Ⅰ、Ⅱ型）志賀毒素ST(VT)有3種毒性，與內(nèi)毒素協(xié)同作用，加重局部和全身癥狀局部（腸壁）全身所致疾病1、急性細(xì)菌性痢疾急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢2、慢性細(xì)菌性痢疾3、攜帶者

感染灶局限于結(jié)腸粘膜層，一般不入血四、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）生物學(xué)性狀：1、共性（略）2、個(gè)性：1)有菌毛，無(wú)鞭毛，無(wú)動(dòng)力（與其它腸道致病菌主要區(qū)別點(diǎn)）2)能分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖3)無(wú)H抗原4)在麥康凱平板上形成無(wú)色中等大小菌落（乳糖不發(fā)酵菌落）

宋內(nèi)志賀菌常形成粗糙型菌落

5)抵抗力較其它腸桿菌科細(xì)菌為低,對(duì)酸敏感（革蘭染色）宋內(nèi)志賀菌大腸埃希桿菌:粉紅色，乳糖發(fā)酵菌落福氏痢疾桿菌:菌落小，無(wú)色透明，非乳糖發(fā)酵菌(MAC,18hr,37℃)SSAgar(SalmonellaShigellaAgar)志賀菌KIA（KA－－）MIU（－－－）志賀菌IMViC試驗(yàn)（－＋－－）（二）實(shí)驗(yàn)檢查1.標(biāo)本采集發(fā)病早期（治療前）采集粘液膿血便肛拭子

床邊接種或立即送檢2.分離培養(yǎng)：選擇麥康凱和SS瓊脂分離培養(yǎng)

菌落：麥康凱:乳糖不發(fā)酵無(wú)色半透明的菌落SS瓊脂:無(wú)色菌落3.鑒定：①

初步鑒定：

KIAK

A－－

MIU－－/+－

IMViC－/++－-②

最終鑒定全面生化反應(yīng)+血清學(xué)鑒定

血清學(xué)分型與生化反應(yīng)不一致者均為非志賀菌③血清學(xué)鑒定：第一步：該屬4群細(xì)菌的多價(jià)診斷血清做玻片凝集試驗(yàn)（A群1，2型，B群1—6型，C群1—6型，D群）第二步：定型診斷血清進(jìn)行分型：

A群：痢疾志賀菌：共10個(gè)血清型O1~O10B群：福氏志賀菌：共6個(gè)血清型和X，Y2變型

C群：鮑特志賀菌：共15個(gè)血清型

D群：僅一個(gè)血清型

4毒力試驗(yàn)：豚鼠眼結(jié)膜試驗(yàn)志賀菌檢驗(yàn)程序

將待檢標(biāo)本接種腸道選擇平板，35℃培養(yǎng)18～24小時(shí)若標(biāo)本含菌量少，可先增菌（GN增菌液）4～6小時(shí)再分離培養(yǎng)挑取無(wú)色半透明菌落，進(jìn)行初步生化反應(yīng)鑒定符合志賀菌生化反應(yīng)特征可進(jìn)行血清學(xué)鑒定血清學(xué)鑒定先用志賀氏多價(jià)診斷血清作玻片凝集試驗(yàn)，若凝集再用A、B、C、D群診斷血清鑒定到種、型血清學(xué)鑒定需注意K抗原的阻斷作用，并應(yīng)考慮是否為EIEC終報(bào)：分離出福氏志賀菌2a型志賀菌鑒定依據(jù)腸道選擇平板上無(wú)色半透明菌落KIA：KA--MIU