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糞便檢驗-隱血試驗(OBT)教學(xué)培訓(xùn)課件隱血:上消化道出血量小于5ml,糞便中無可見的血液,且因紅細(xì)胞被破壞,顯微鏡檢查也觀察不到紅細(xì)胞,這種肉眼及顯微鏡均不能證明的出血稱為隱血。隱血試驗:通過化學(xué)法或免疫法等方法來證實隱血是否存在。檢測方法:化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法干化學(xué)試帶法單克隆膠體金試帶法概述01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法
血紅蛋白含有類似過氧化物酶的作用,催化供氫體,將供氫體中的氫轉(zhuǎn)移給過氧化氫生成水,供氫體脫氫(氧化)后形成發(fā)色基團而呈色。呈色的深淺可反映血紅蛋白量(出血量)的多少。檢測原理檢測方法用竹簽挑取少許糞便于濾紙片上,滴加鄰聯(lián)甲苯胺冰乙酸液2~3滴,再加H2O2(1mol/L)2~3滴,于標(biāo)本上立即觀察結(jié)果,報告。01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法
根據(jù)出現(xiàn)顏色的時間及顏色的深淺來判讀結(jié)果:(---)2分鐘后仍不顯色(+)10秒后由淺藍(lán)漸變深藍(lán)(++)初顯淺藍(lán)褐色漸變成明顯藍(lán)褐色(+++)立即呈現(xiàn)藍(lán)褐色(++++)立即呈現(xiàn)黑藍(lán)色結(jié)果示意圖01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法
除鄰聯(lián)甲苯胺法外還有以下化學(xué)方法:鄰甲苯胺法、還原酚酞法、聯(lián)苯胺法、愈創(chuàng)木酯法、匹拉米洞法、無色孔雀綠法等。01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法影響因素此操作簡便易行,但缺乏特異性和準(zhǔn)確性,常見的影響因素有1、動物性食品因含有血紅蛋白和肌紅蛋白或其他酶,可使隱血試驗出現(xiàn)假陽性。2、大量生食蔬菜中含有植物光氧化物酶也可使結(jié)果出現(xiàn)假陽性。3、如服用大量維生素C或其他具有還原作用的藥物,則可使過氧化物酶被還原,不能再氧化色原物,故可出現(xiàn)假陰性。4、血液在腸道中停留過久,血紅蛋白被細(xì)菌降解也會導(dǎo)致假陰性等。01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法質(zhì)量保證試驗前3天必須禁食動物血、肉、肝,是為了避免假陽性。禁服鐵劑、維生素C是為了避免假陰性。1H2O2最好新鮮配制。所用的器具要清潔。每天做陽性對照和陰性對照。23402免疫法主要方法:酶聯(lián)免疫吸附法膠體金法免疫斑點法膠乳凝聚法反向間接血凝法等用膠體金(有顏色)等標(biāo)記物標(biāo)記抗人血紅蛋白抗體,與糞便中的血紅蛋白(紅細(xì)胞內(nèi)容物)結(jié)合,在指定位置出現(xiàn)顏色變化,根據(jù)顏色的有無及深淺判斷陰性、弱陽性、陽性、強陽性。02免疫法膠體金法結(jié)果判讀:02免疫法影響因素此操作具有快速、方便、特異、靈敏和特異性高等優(yōu)點假陽性:因靈敏度而引起:1.胃腸道生理性失血(<2ml/24h);2.服用刺激胃腸道的藥物引起的消化道出血(2~5ml/24h)。假陰性:消化道出血后,血紅蛋白在胃腸道中被消化酶級細(xì)菌作用后分解而使免疫原性減弱、消失或改變。主要用于下消化道出血檢驗,而40~50%上消化道出血不能檢出;大量出血時,血紅蛋白(抗原)濃度過高造成的與單克隆抗體不匹配(即后帶效應(yīng)),亦可出現(xiàn)假陰性。02免疫法質(zhì)量保證試驗前3天必須禁食動物血、肉、肝,是為了避免假陽性。禁服鐵劑、維生素C是為了避免假陰性。1每天做陽性對照和陰性對照。203參考值:陰性。臨床意義:糞便隱血試驗陽性對消化道出血的診斷有重要的價 值。如消化性潰瘍、藥物(如阿司匹林、糖皮質(zhì)激素、 吲哚美辛等)對胃黏膜的損傷、腸結(jié)核、克羅恩病、 潰瘍性結(jié)腸炎、鉤蟲病、結(jié)腸息肉以及消化道腫瘤, 糞便隱血試驗常為陽性。參考值及臨床意義03隱血試驗可作為消化道腫瘤普查的一
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