第九章動(dòng)物細(xì)胞融合

細(xì)胞雜交(cellhybridization)：2個(gè)不同 此后：人們用仙臺成功誘導(dǎo)了許多其它不學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、藥學(xué)等多學(xué)科的研究工

最早采用的融合劑。某些被膜中有融合蛋白（fusionprotein），不僅可介導(dǎo)同宿主常用：仙臺、新城雞瘟、皰疹病 β-丙內(nèi)酯），使 混勻，冰浴搖蕩混勻，冰浴搖蕩103737℃水浴靜置15-20 毒可能細(xì)胞、干擾細(xì)胞的生命活動(dòng)，也可能會人。脂、鈣離子、水溶性高分子化合物（如易操作。一般用分子量4000的PEG，濃度PEGNa2HPO42H2O1.77g，NaH2PO2H2OAlsver液：葡萄糖2.05g檸檬酸鈉0.8gNaCl 血細(xì)胞：用注射器取2mlAlsver液，再從翼0.85%的NaCl液，混勻后以1200r/min離心5分鐘。去上清，再重復(fù)兩次，最后一次離心10分鐘。調(diào)節(jié)細(xì)胞密度：GKN液懸浮血球細(xì)胞，并使4誘導(dǎo)融合：取0.5ml“3”液，加入0.5ml50%的 物理方法(電融合)第三節(jié) 4. 4. ；H)和胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine；T，胸苷)為（Hypoxanthineguaninephosphoribosyl 合成相應(yīng)的脫氧核苷酸,dATP、dGTP、 T

ATK

培養(yǎng)基上，細(xì)胞從頭合成核苷酸途徑被阻斷，正常細(xì)胞可以利用補(bǔ)救途徑合成核苷 （HGPRT-）的缺陷細(xì)胞 （TK-）缺陷細(xì)胞，則不能 、增殖，因

人

TK+和TK+和第四節(jié)第四節(jié)克隆化培養(yǎng)(clonalculture)：培養(yǎng)單個(gè)含有個(gè)細(xì)胞。取0.01細(xì)胞液在培養(yǎng)板(如孔板) cells/ml.取0.01ml的3）細(xì)胞液于培養(yǎng)板小孔，加0.1培蓋片分離法（適用貼壁細(xì)胞 ActivatedCellSorter，F(xiàn)ACS）分離雜交細(xì)胞。器中。5000cells/s物質(zhì)。如微生物、動(dòng)物 抗體：(1)效率低、成本高；(2)為多克隆抗體；(3)質(zhì)量無法控制，不能標(biāo)準(zhǔn)化。 醫(yī)學(xué)診斷:廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫、放射免疫 克隆抗體吸附在一個(gè)惰性的固相基質(zhì)（如Speharose） 就成為“生物”。把這種抗體“”注射到患者的血液中，它就會在患者體內(nèi)追藥物和破壞癌細(xì)胞，而且很少損傷正常組織細(xì)胞。這種抗體“”具有高度選擇性， 高、力強(qiáng)大、副作用小等單克隆抗體的 1975年，Kohler（德國）和Milstein（阿根廷、英國 1984年，G.Kohler、C1984年，G.Kohler、C.Milstein和NielsK.

GeorgesJ.F. 交瘤細(xì)胞（術(shù)(hybridomatechnology）。

片，即可獲得所需要的單克隆抗體。 （c