鐵皮石斛組織培養(yǎng)

關于鐵皮石斛組織培養(yǎng)第1頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo鐵皮石斛的組織培養(yǎng)鐵皮石斛，為蘭科多年生附生草本植物。生于海拔達1600米的山地半陰濕的巖石上，喜溫暖濕潤氣候和半陰半陽的環(huán)境，不耐寒。一般均能耐－5℃的低溫。石斛可分為黃草、金釵、馬鞭等數(shù)十種，鐵皮石斛為石斛之極品，它因表皮呈鐵綠色而得名。第2頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo鐵皮石斛的組織培養(yǎng)技術路線外植體叢生芽培養(yǎng)基生根發(fā)育完整植株第3頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo蔗糖：30g瓊脂：6.8g初代培養(yǎng)基的設計誘導培養(yǎng)基

MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+瓊脂6.8%【pH值5.2~5.6】MS母液：I-V50ml,5ml,5ml,5ml5ml。激素母液：BA10ml,NAA5ml第4頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo蔗糖：30g瓊脂：6.8g土豆汁150ml繼代培養(yǎng)基的設計增殖培養(yǎng)基

MS+BA0.5ml+NAA0.2+土豆汁10%~20%【pH值5.2~5.6】取MS母液：IV50ml,5ml,5ml,5ml,5ml;激素母液：BA5ml,NAA2ml第5頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogoNAABAIAA增殖培養(yǎng)將建立的無菌系中的小苗轉入增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)。增殖培養(yǎng)基以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度的生長調節(jié)劑BA、NAA、IAA、IBA及土豆汁和香蕉汁等附加物。土豆汁香蕉汁IBA第6頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo蔗糖：30g瓊脂：6.8g香蕉汁：200ml活性炭：20g生根培養(yǎng)基的設計生根培養(yǎng)基1/2MS+NAA0.2~0.5mg/L+香蕉汁20%+活性炭2.0%【pH值5.2~5.6】取MS母液：IV25ml,5ml,5ml,5ml,5ml;激素母液：NAA2~5ml第7頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogoYourTexthere生根培養(yǎng)將叢生芽無菌操作切下單株放在生根培養(yǎng)基中于適宜條件下培養(yǎng)，約1~2周后即生根，以長成完整植株。第8頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo優(yōu)選1年生鐵皮石斛植株上生長健壯的莖段外植體的選擇接種小芽苗多易于在苗基部形成叢生芽。苗的高度為1～2cm時,叢生芽增殖倍數(shù)最高數(shù)。生長發(fā)育健壯苗優(yōu)先123第9頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo外植體的處理Text1Text2Text3摘去葉片和膜質葉鞘，剪成約2cm長帶節(jié)的小段。用洗潔劑清洗后置流水下沖20~30

min。在超凈工作臺上用75%的酒精消30s0.1%HgCl2滅菌5min后，用無菌水沖洗5~6次，放入墊有干無菌濾紙的培養(yǎng)皿中，以吸去多余水分，莖段兩端各切0.2~0.3cm。第10頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo接種實驗一、接種準備工作1、超凈工作臺開紫外燈照射10-20min送風2、外植體消毒（繼代培養(yǎng)采用已建立的無菌培養(yǎng)物作為材料）3、工具消毒二、接種操作1、用消毒工具、器皿，切取鐵皮石斛幼莖段2cm2、接種環(huán)燒紅，沾一下培養(yǎng)基3、鑷取莖段插于培養(yǎng)基中4、封口、標記第11頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo各時期的培養(yǎng)條件莖段的誘導時間在5~11天之間培養(yǎng)溫度23~25℃，光照強度2000lx，光照時間10h/d第12頁，共14頁，2023年，2月20日，星期六CompanyLogo參考文獻[1]鄭寬瑜,鄧君浪,趙培快繁技術體系研究[J].云南農(nóng)業(yè)科技,2009,(S2):57-59。[2]周根余,謝薇,程磊.影響鐵皮石斛原球莖生長的若干因素[J].江西科學,1999,17(4):231-235.[3]葉紀溝.鐵皮石斛試管苗的人工栽培研究[J].中國藥業(yè),2001,10(1):53。[4]李銘宗.鐵皮石斛的生物學特性和人工栽培[J].福建熱作科技,1999,24(1):29-31。[5]張明,夏鴻西,朱利泉,等