高中生物選修三動物細胞融合和單克隆抗體

關于高中生物選修三動物細胞融合和單克隆抗體第1頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日

回憶已學知識，你是否已經(jīng)見到過動物細胞融合的實例？人-鼠(想像圖)第2頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體第3頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日鼠細胞人細胞人工誘導一、動物細胞融合雜交細胞動物細胞融合（技術）：是指（在一定的條件下）兩個或多個細胞融合形成一個細胞的過程。1、概念：第4頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日2、誘導融合的因素化學法：聚乙二醇(PEG)誘導融合.物理法：電激融合生物法：滅活的病毒誘導融合.病毒顆粒黏附細胞表面細胞膜連接細胞膜被病毒顆粒穿通細胞融合、形成雜種細胞

為什么滅活的病毒能作誘導劑？滅活喪失感染性但保留融合活性第5頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日獲得雜種植株物理、化學方法（同左）滅活的病毒

物理（離心、振蕩、電激）化學（聚乙二醇）直接誘導細胞融合去壁—原生質體融合—誘導新壁—雜種植株細胞膜的流動性細胞膜的流動性結果誘導方法步驟融合的原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物、動物細胞融合的比較獲得雜交細胞小結第6頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日3、動物細胞融合技術的意義和應用第7頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日問題：抗體由什么細胞產(chǎn)生？其化學本質是什么？與抗原作用的特點？主要分布在哪里？二、單克隆抗體的制備第8頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法：從血清中分離抗體

該法制備抗體的特點：

產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差。多種漿細胞動物體內多種抗體抗原第9頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日提示：每一個效應B淋巴細胞只分泌一種化學性質單一，特異性強的抗體。如果利用單個效應B淋巴細胞進行無性繁殖（克?。?，形成細胞群，這樣的細胞群就有可能產(chǎn)生出化學性質單一、特異性強的抗體——單克隆抗體。問題：怎樣獲得化學性質單一、特異性強的抗體呢？第10頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日材料：效應B細胞在體內只能由B淋巴細胞增殖、分化而來,不再進行分裂,在體外培養(yǎng)的條件下，也很難分裂。思考：用什么方法才能讓B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖?第11頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)技術動物細胞融合技術單克隆抗體

既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖的細胞骨髓瘤細胞能無限增殖+一個漿細胞只分泌一種特異性抗體設計方案：米爾斯坦科勒第12頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日讀下面一段文字資料，找出單克隆抗體的概念

人們發(fā)現(xiàn)，在動物發(fā)生免疫反應的過程中，體內的B細胞可以產(chǎn)生多達百萬種以上的特異性抗體，但是每個B細胞只分泌一種化學性質單一、特異性強的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個B細胞進行無性繁殖，即克隆。單克隆抗體的概念單:單個細胞克隆:無性繁殖單克隆抗體:單個細胞克隆產(chǎn)生的化學性質單一特異性強的抗體第13頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日單克隆抗體的制備問題思考Q1Q2細胞兩兩融合后，有哪些類型？B-B;B-瘤;瘤-瘤哪種是需要的類型，要篩選嗎？第14頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日①細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。②人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。

③鼠骨髓瘤細胞中只有D途徑，沒有S途徑，可是能不斷分裂增殖。你想到篩選雜交瘤細胞的方案了么？

小資料：第15頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日單克隆抗體的制備問題思考Question經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細胞群進行克隆是否就得到產(chǎn)生純度高的抗體？還需怎么辦？第16頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日有限稀釋法稀釋多次稀釋對能產(chǎn)生特異性抗體的單個雜交瘤細胞進行克隆，即單細胞克隆。由它產(chǎn)生的抗體，即單克隆抗體。將培養(yǎng)皿孔內的上清液取出，檢測抗體。多孔細胞培養(yǎng)板第17頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日單克隆抗體雜交細胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細胞第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體4.單抗制備過程中應用了那些技術？動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)1.此過程中至少進行了幾次篩選？目的相同嗎？3.單克隆抗體的優(yōu)點？特異性強，靈敏度高，可大量制備。2.最終從哪兒提取單克隆抗體？第18頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日（1）作為診斷試劑——最廣泛應用準確、高效、簡易、快速（如同位素標記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）三、單克隆抗體的應用第19頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日（2）治療疾病和運載藥物生物導彈=單克隆抗體+藥物（治療腫瘤）(“生物導彈”—單抗導向，藥物為彈頭)單克隆抗體的應用療效高、副作用小第20頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日1、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細胞

C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞D.沒經(jīng)過免疫的Ｂ淋巴細胞A鞏固練習2.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是（）誘導融合的方法完全相同B.所用的技術手段基本相同C.操作步驟基本相同D.都能形成雜種細胞D第21頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日3.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是（）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合B.由小鼠一個B淋巴細胞誘導融合而成C.由小鼠一個B淋巴細胞與肌瘤細胞誘導融合而成D.由小鼠一個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導融合而成D4.只能使動物細胞融合的常用誘導方法是（）

A．PEG

B．滅活的病毒C．電刺激D．離心B第22頁，共25頁，2023年，2月20日，星期日5.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（）①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A.②④B.①③⑤

C.①②③④

D.②③C6.“生物導彈”是