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離體腸段平滑肌生理演示文稿當(dāng)前1頁,總共23頁。(優(yōu)選)離體腸段平滑肌生理當(dāng)前2頁,總共23頁。實(shí)驗(yàn)原理哺乳動(dòng)物消化管平滑肌具有肌組織共有的特性,如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性等。但是消化道平滑肌肉有其特點(diǎn),即興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性、自動(dòng)節(jié)律性,對(duì)化學(xué)、溫度和機(jī)械牽張刺激較敏感等。將離體組織器官至于模擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中,可以在一定時(shí)間內(nèi)保持其功能。本實(shí)驗(yàn)以臺(tái)氏液作灌流液,在體外觀察及記錄家兔離體腸段的一般生理特性。當(dāng)前3頁,總共23頁。生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常用的生理溶液有生理鹽水、任氏液(Rinne)、樂氏液(Locke)及臺(tái)氏液(Tyrode)。這些生理溶液是為了在進(jìn)行離體器官或組織實(shí)驗(yàn)時(shí),使標(biāo)本盡可能處于近似在體內(nèi)的環(huán)境中,以保證其正常的功能活動(dòng)。而用于灌流組織的液體,其電解質(zhì)成分、晶體滲透壓、pH、緩沖能力、溫度及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)與組織液相近。當(dāng)前4頁,總共23頁。實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:家兔器械、藥品:電熱恒溫水浴鍋、浴槽、張力換能器、生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、注射器、培養(yǎng)皿、溫度計(jì)、燒杯、螺絲夾、臺(tái)氏液、0.01%去甲腎上腺素、0.01%乙酰膽堿、阿托品。當(dāng)前5頁,總共23頁。方法和步驟1、標(biāo)本制備流程
擊昏家兔:用木槌猛擊兔頭枕部,使其昏迷。立即剖開腹腔,找出胃幽門與十二指腸交界處,快速取長(zhǎng)20~30cm的腸管,先將與該腸管相連的腸系膜沿腸緣剪去,置于供氧臺(tái)氏液中輕輕漂洗,把腸內(nèi)容物基本洗凈。將腸管分成數(shù)段,每段長(zhǎng)2-3cm,兩端各系一條線,保存于供氧的38℃左右的臺(tái)氏液中。當(dāng)前6頁,總共23頁。2、儀器安裝與調(diào)試實(shí)驗(yàn)安裝恒溫水浴鍋控制加熱,恒溫工作點(diǎn)定在38℃。將充滿氧氣的道氏袋與通氣鉤相連接,將腸段一端系在通氣管鉤上,另一端與張力換能器相連??刂仆饬浚寡鯕鈴耐夤芮岸顺蕟蝹€(gè)而不是成串逸出。儀器調(diào)試:選擇“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”中的“消化實(shí)驗(yàn)”選中“消化道平滑肌生理特性”。當(dāng)前7頁,總共23頁。當(dāng)前8頁,總共23頁。3、觀察項(xiàng)目(附部分參考實(shí)驗(yàn)結(jié)果)待標(biāo)本穩(wěn)定后,記錄小腸平滑肌收縮的對(duì)照曲線。停止供氣1min,記錄曲線變化。出現(xiàn)明顯變化后立即供氣。當(dāng)前9頁,總共23頁。當(dāng)前10頁,總共23頁。將藥液管中的臺(tái)氏液全部換成25度的臺(tái)氏液,觀察變化。再更換38度臺(tái)氏液,觀察有何反應(yīng)。當(dāng)前11頁,總共23頁。當(dāng)前12頁,總共23頁。同法將藥液管中的臺(tái)氏液全部換成45度的臺(tái)氏液,觀察變化。再更換38度臺(tái)氏液,觀察有何反應(yīng)。當(dāng)前13頁,總共23頁。當(dāng)前14頁,總共23頁。4)記錄對(duì)照腸段運(yùn)動(dòng)曲線后,加入2滴腎上腺素(1:10
000),觀察并記錄曲線變化。當(dāng)前15頁,總共23頁。當(dāng)前16頁,總共23頁。5)記錄對(duì)照腸段運(yùn)動(dòng)曲線后加入1—2滴乙酰膽堿(1:100000),觀察并記錄曲線變化。
當(dāng)前17頁,總共23頁。當(dāng)前18頁,總共23頁。6)記錄對(duì)照腸段運(yùn)動(dòng)曲線后加入3滴阿脫品后立即加入與前面同樣劑量的乙酰膽堿,記錄并觀察曲線變化。當(dāng)前19頁,總共23頁。注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)過程中,臺(tái)氏液應(yīng)保持38℃,浴槽內(nèi)液面高度應(yīng)保持恒定。通氣管的氣泡逸出速度不可太快,以單個(gè)氣泡陸續(xù)出現(xiàn)為宜。否則會(huì)影響腸段運(yùn)動(dòng)的曲線記錄。每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)效果明顯后,立即更換新鮮臺(tái)氏液,一般應(yīng)沖洗2-3次,待腸段恢復(fù)正常活動(dòng)后再進(jìn)行下一項(xiàng)目。放大器零點(diǎn)調(diào)好后不要再移動(dòng)旋鈕,以免影響基線。當(dāng)前20頁,總共23頁。結(jié)論消化道平滑肌具有自律性,但其收縮緩慢,節(jié)律性不規(guī)則。消化道平滑肌具有一定的緊張性。消化道平滑肌的活動(dòng)易受溫度、pH值及其它化學(xué)因素、藥物因素的影響。當(dāng)前21頁,總共23頁。實(shí)驗(yàn)討論(參考)正常情況下,我們觀察到離體小腸平滑肌在臺(tái)氏液中可以自動(dòng)地、緩慢地收縮,但其節(jié)律性很不規(guī)則。小腸平滑肌自律性產(chǎn)生的離子基礎(chǔ)尚未完全清楚。目前認(rèn)為,它的產(chǎn)生可能與細(xì)胞膜上生電性鈉泵的活動(dòng)具有波動(dòng)性有關(guān),當(dāng)鈉泵的活動(dòng)暫時(shí)受抑制時(shí),膜便發(fā)生去極化;當(dāng)鈉泵活動(dòng)恢復(fù)時(shí),膜的極化加強(qiáng),膜電位便又回到原來的水平。
當(dāng)前22頁,總共23頁。在浴槽中加入0.01%乙酰膽堿(Ach)2滴(約0.2ml)后,可見離體腸管活動(dòng)增強(qiáng),描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變快,幅度增加。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機(jī)理,目前認(rèn)為與消化道平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生動(dòng)作電位的離子基礎(chǔ)是Ca2+的內(nèi)流有關(guān)。乙酰膽堿可與肌膜上的M受體結(jié)合,使得兩類通道開放:一類為電位敏感性Ca2+專用通道,另一類為特異性受體活化Ca2+專用通道。前一類通道對(duì)Ach敏感,小劑量Ach即引起開放;后一類
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