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文檔簡介
高二生物植物細(xì)胞工程技術(shù)課件第一頁,共五十頁,2022年,8月28日細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物
學(xué)的原理和方法,通過細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平
上的操作,按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺
傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程第二頁,共五十頁,2022年,8月28日前者是細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上生物技術(shù),
后者是分子水平上的生物技術(shù)??寺《嗬蜓蚣夹g(shù)是________水平上的技術(shù),培育抗蟲棉是________水平上的技術(shù)。細(xì)胞分子第三頁,共五十頁,2022年,8月28日植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是:植物細(xì)胞工程
常用的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物細(xì)胞的全能性第四頁,共五十頁,2022年,8月28日
植物細(xì)胞具有全能性。2、什么是細(xì)胞的全能性?概念:具有某種生物全部遺傳信息的任何一個細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能,也就是說,每個生物細(xì)胞都具有全能性的特點。1、為什么已分化的植物組織或細(xì)胞能培養(yǎng)成完
整植物體?第五頁,共五十頁,2022年,8月28日原因:生物的每一個細(xì)胞都有本物種的全套遺傳物質(zhì),都有發(fā)育成完整個體的全套基因。3、已分化的細(xì)胞為什么具有發(fā)育成完整個體的潛能?第六頁,共五十頁,2022年,8月28日第七頁,共五十頁,2022年,8月28日4:為什么植物的花瓣在植物體內(nèi)沒有能發(fā)育
成完整的植株呢?A.細(xì)胞失去了全能性B.細(xì)胞中的基因部分丟失C.細(xì)胞中的基因進行選擇性表達D.細(xì)胞中的基因變異不同
這是基因在特定的時間和空間條件下選擇性
表達的結(jié)果.在個體發(fā)育的不同時期,生物體的
不同部位的細(xì)胞表達的基因是不相同的,合成的
蛋白質(zhì)也不一樣,從而形成了不同的組織和器官.第八頁,共五十頁,2022年,8月28日當(dāng)植物細(xì)胞脫離了原來所在植物體的器官或組織而處于離體狀態(tài)時,在一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他適宜外界條件的作用下,就可能表現(xiàn)出全能性,發(fā)育成完整的植株。
在生物的個體發(fā)育中,由于基因在特定時
間和空間下選擇性地表達而形成不同器官,因
此,要實現(xiàn)細(xì)胞的全能性,首先必須使生物體
的細(xì)胞處于離體狀態(tài)。第九頁,共五十頁,2022年,8月28日差異:②植物細(xì)胞全能性動物細(xì)胞全能性受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞>>①受精卵的全能性最高>5、生物體所有細(xì)胞全能性都一致嗎?第十頁,共五十頁,2022年,8月28日細(xì)胞的分化程度越高,細(xì)胞的全能性
越弱,細(xì)胞的分裂、分化能力越弱1、下列人體細(xì)胞中全能性最高的是()A.神經(jīng)細(xì)胞
B.造血干細(xì)胞
C.胚胎干細(xì)胞
D.肌肉細(xì)胞C第十一頁,共五十頁,2022年,8月28日2、下列關(guān)于細(xì)胞全能性的說法不
正確的是()DEA.受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞形成完整個體,因此全能性最高B.生物體內(nèi),細(xì)胞不能表現(xiàn)出全能性,是因為細(xì)胞中的基因選擇性表達C.菊花花瓣或葉片的任何一個活細(xì)胞都具有全能性D.哺乳動物成熟的紅細(xì)胞也有全能性E、用菊花的一個葉肉細(xì)胞培養(yǎng)出了菊花葉片體現(xiàn)了葉肉細(xì)胞的全能性第十二頁,共五十頁,2022年,8月28日第十三頁,共五十頁,2022年,8月28日
植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制條件
下,將離體的植物器官、組織、細(xì)胞,培養(yǎng)在人
工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)
其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成完整的植株。第十四頁,共五十頁,2022年,8月28日細(xì)胞離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件避免雜菌在上面迅速生長消耗營養(yǎng),且有些雜菌會
危害培養(yǎng)物的生長。2:在植物組培過程中,為什么要進行一系列的消毒、滅菌,并要求無菌操作?1:植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件有哪些?閱讀教材:
請根據(jù)書上實驗過程,討論下列問題,并概
括出植物組織培養(yǎng)技術(shù)的流程簡圖。胡蘿卜根形成層容易誘導(dǎo)成愈傷組織,其他部分如葉、花也能培養(yǎng)成小植株,只是稍微困難些。3:為什么切取胡蘿卜根的形成層,其他部分也能培養(yǎng)成小植株嗎?第十五頁,共五十頁,2022年,8月28日是一種由相對沒有分化的活的薄壁細(xì)胞團組成的新生細(xì)胞(細(xì)胞排
列疏松、無規(guī)則)第十六頁,共五十頁,2022年,8月28日4:產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞與葉細(xì)胞在染色體的數(shù)目上是否相同?5:染色體上所含的遺傳物質(zhì)與葉細(xì)胞是否相同?6:細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與葉細(xì)胞是否相同?相同相同不同在有光時,往往容易形成維管組織,而不
易形成愈傷組織。7:為什么誘導(dǎo)愈傷組織的過程中應(yīng)避光培養(yǎng)?第十七頁,共五十頁,2022年,8月28日細(xì)胞分裂素/生長素基本相等時:維持愈傷組織的生長細(xì)胞分裂素/生長素維持在高水平時:誘導(dǎo)芽的形成細(xì)胞分裂素/生長素的比例低時:誘導(dǎo)根的形成資料18:閱讀Ms培養(yǎng)基配方,分析各成分的用途在實際操作中是否還應(yīng)在其基礎(chǔ)上添加其他物質(zhì)?第十八頁,共五十頁,2022年,8月28日誘導(dǎo)根的形成使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素或使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂但不分化先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素細(xì)胞分裂也分化同時使用分化頻率加快資料2植物激素對脫分化和再分化起到?jīng)Q定性的作
用,培養(yǎng)基中植物激素的種類、濃度、比例和使用
順序都會影響實驗結(jié)果。第十九頁,共五十頁,2022年,8月28日幾個關(guān)鍵詞:外植體:脫分化:從活植物體上切下進行培養(yǎng)的那部分組織或器官已經(jīng)分化的細(xì)胞,在一定的條件
下,重新恢復(fù)到原始未分化狀態(tài)細(xì)胞分化:在發(fā)育過程中,具有全能性的細(xì)
胞(如受精卵細(xì)胞)逐步轉(zhuǎn)變成形
態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能各異的組織細(xì)胞的
過程第二十頁,共五十頁,2022年,8月28日再分化:愈傷組織:胚狀體:去分化的細(xì)胞,在一定的條件
下,又重新分化成各種特異性的
組織細(xì)胞的過程在人工培養(yǎng)基上由外植體長
出來的一團無序生長的薄壁細(xì)
胞(細(xì)胞排列疏松、無規(guī)則)具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)第二十一頁,共五十頁,2022年,8月28日離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)愈傷組織脫分化根、芽(試管苗)植物體再分化優(yōu)勢?繁殖速度快不受季節(jié)限制
工廠化生產(chǎn)幼苗無毒保持優(yōu)良性狀第二十二頁,共五十頁,2022年,8月28日第二十三頁,共五十頁,2022年,8月28日第二十四頁,共五十頁,2022年,8月28日第二十五頁,共五十頁,2022年,8月28日第二十六頁,共五十頁,2022年,8月28日第二十七頁,共五十頁,2022年,8月28日第二十八頁,共五十頁,2022年,8月28日第二十九頁,共五十頁,2022年,8月28日第三十頁,共五十頁,2022年,8月28日第三十一頁,共五十頁,2022年,8月28日第三十二頁,共五十頁,2022年,8月28日
在
條件下,將
,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)生
、叢芽,最終形成
。1、概念無菌和人工控制離體的植物器官、組織、細(xì)胞愈傷組織完整的植株細(xì)胞離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件(一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的pH、適時光照等)2、條件:3、原理:細(xì)胞的全能性4、過程:第三十三頁,共五十頁,2022年,8月28日AA.花粉培養(yǎng)成單倍體植株B.芽發(fā)育成枝條C.根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)D.未受精的卵發(fā)育成雄蜂1.下列屬于組織培養(yǎng)的是:()第三十四頁,共五十頁,2022年,8月28日CA.消毒滅菌B.適宜的溫度C.充足的光照D.適宜的養(yǎng)料和激素2.在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形
成愈傷組織的過程中,下列哪一項條件是不
需要的()第三十五頁,共五十頁,2022年,8月28日CA.具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞B.離體狀態(tài)C.導(dǎo)入外源基因D.一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素3.要將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株,不需要()第三十六頁,共五十頁,2022年,8月28日
A.受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞形成完整個體,因此全能性最高
B.生物體內(nèi)細(xì)胞由于分化全能性不能表達
C.卵細(xì)胞和受精卵一樣,細(xì)胞未分化,全能性很高
D.植物細(xì)胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)出全能性4.有關(guān)全能性的表述中,不正確的是()C第三十七頁,共五十頁,2022年,8月28日無機營養(yǎng)成分:C、H、O等大量元素及部分微量元素。有機營養(yǎng)成分:含N物質(zhì)包括維生素和氨基酸;碳源:2%—5%的蔗糖。瓊脂起支持作用。相關(guān)激素:生長素,
細(xì)胞分裂素和赤霉素等。pH值調(diào)
整如5.0-6.0。資料一:植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基基本成分第三十八頁,共五十頁,2022年,8月28日在生長素存在的情況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢。使用順序影響實驗結(jié)果:先使用生長素,后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化;先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素細(xì)胞既分裂也分化;同時使用分化頻率提高。激素用量的比例影響實驗結(jié)果:生長素用量比細(xì)胞分裂素用量比值高時,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低時,有利于芽的分化,抑制根的形成;比值適中時,促進愈傷組織的生長。資料二:第三十九頁,共五十頁,2022年,8月28日思考:
利用以上資料概括脫分化和再分化需要什么外界條件?愈傷組織的形成需要有外界刺激因素和激素誘導(dǎo),需要加入適當(dāng)營養(yǎng)物質(zhì)和植物生長調(diào)節(jié)劑,如無機鹽、糖類、植物激素等。并用適當(dāng)比例的營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)愈傷組織。第四十頁,共五十頁,2022年,8月28日培養(yǎng)過程中,在培養(yǎng)基上需加入蔗糖,培養(yǎng)時需要光照,那么,培養(yǎng)的植物到底是自養(yǎng)型還是異養(yǎng)型?光的作用是什么?對于上述疑問,某研究性學(xué)習(xí)小組進行了下列實驗:一組在培養(yǎng)基中加30%的蔗糖,另一組不加蔗糖,接種后,每組再分成兩個小組,分別在光下和暗中培養(yǎng)。1個月后,觀察植物體生長、分化情況,結(jié)果為下表:第四十一頁,共五十頁,2022年,8月28日培養(yǎng)條件
加蔗糖不加蔗糖光正常生長,分化不生長,死亡暗只生長,不分化不生長,死亡蔗糖為生長、分化的必需成分(提供能量),光促進細(xì)胞分化。第四十二頁,共五十頁,2022年,8月28日
將不同種植物的體細(xì)胞,在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。(不同種生物之間存在著生殖隔離,所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點的)三、植物體細(xì)胞雜交第四十三頁,共五十頁,2022年,8月28日
1972年卡爾森等通過兩個煙草品種之間原生質(zhì)體的融合,獲得了第一個體細(xì)胞雜種。背景資料1978年梅爾徹斯(Melchers)等首次獲得了番茄和馬鈴薯的屬間體細(xì)胞雜種——“馬鈴薯番茄”。
目前,已得到栽培煙草與野生煙草、栽培大豆與野生大豆、秈稻與野生稻、秈稻與粳稻、小麥與鵝冠草等細(xì)胞雜種及其后代,獲得了有價值的新品系或育種上有用的新材料。第四十四頁,共五十頁,2022年,8月28日(1)要想讓兩個來自不同植物的體細(xì)胞融合在一起,遇到的第一個障礙是什么?(2)有沒有一種溫和的去細(xì)胞壁的方法?(3)為什么兩個原生質(zhì)體能發(fā)生融合,這與細(xì)胞膜的什么特性有關(guān)?(4)融合的過程是怎樣的?融合完成的標(biāo)志是什么?(5)雜種細(xì)胞遺傳物質(zhì)有什么特點?融合后除雜種細(xì)胞外還有哪些融合細(xì)胞?(6)如果兩個來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生融合形成了雜種細(xì)胞,下一步該對此細(xì)胞做如何處理?第四十五頁,共五十頁,2022年,8月28日植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B去掉細(xì)胞壁去掉細(xì)胞壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合雜合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂分化發(fā)育愈傷組織雜種植株植物體細(xì)胞雜交過程植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞融合第四十六頁,共五十頁,2022年,8月28日原生質(zhì)體制備(酶解法去細(xì)胞壁)原生質(zhì)體融合(人工誘導(dǎo))
雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng)(形成愈傷組織)雜種植株的再生與鑒定物理法:離心、振動、電刺激等化學(xué)法:聚乙二醇等試劑纖維素酶、果膠酶等第四十七頁,共五十頁,2022年,8月2
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