毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑

中藥制劑的雜質(zhì)檢查技術(shù)——毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑目錄

基礎(chǔ)知識(shí)1必備知識(shí)2拓展知識(shí)3基礎(chǔ)知識(shí)

殘留溶劑指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過(guò)程中使用的，但在工藝過(guò)程中未能完全去除的有機(jī)溶劑。《中國(guó)藥典》2015年版將藥品中常見(jiàn)的殘留溶劑分成了四類(lèi)，并以附表的形式列出了其名稱(chēng)及限度。

第一、第二、第三類(lèi)溶劑的殘留限度應(yīng)符合附表中的規(guī)定；

對(duì)其他溶劑，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)工藝的特點(diǎn)，制定相應(yīng)的限度，使其符合產(chǎn)品規(guī)范、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）或其他基本的質(zhì)量要求。本法照《中國(guó)藥典》2015年版四部通則氣相色譜法（通則0521）測(cè)定。色譜柱——毛細(xì)管柱除另有規(guī)定外，極性相近的同類(lèi)色譜柱之間可以互換使用。（1）非極性色譜柱：固定液為100%的二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱。（2）極性色譜柱：固定液為聚乙二醇（PEG-20M）的毛細(xì)管柱。（3）中極性色譜柱：固定液為（35%）二苯基-（65%）甲基聚硅氧烷、（50%）二苯基-（50%）二甲基聚硅氧烷、（35%）二苯基-（65%）二甲基聚硅氧烷、（14%）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚硅氧烷、（6%）氰丙基苯基-（94%）二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱等。（4）弱極性色譜柱：固定液為（5%）苯基-（95%）甲基聚硅氧烷、（5%）二苯基-（95%）二甲基硅氧烷共聚物的毛細(xì)管柱等。必備知識(shí)毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑系統(tǒng)適用性試驗(yàn)（1）用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算，毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)一般不低于5000。（2）色譜圖中，待測(cè)物色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。（3）以?xún)?nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不大于5%；若以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)物峰面積的RSD應(yīng)不大于10%。必備知識(shí)毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑供試品溶液的制備除另有規(guī)定外，精密稱(chēng)取供試品0.1～1g；通常以水為溶劑；對(duì)于非水溶性藥物，可采用N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或其他適宜溶劑；根據(jù)供試品和待測(cè)溶劑的溶解度，選擇適宜的溶劑且應(yīng)不干擾待測(cè)溶劑的測(cè)定。根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿(mǎn)足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要。必備知識(shí)毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取各品種項(xiàng)下規(guī)定檢查的有機(jī)溶劑適量，采用與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對(duì)照品溶液；如用水作溶劑，應(yīng)先將待測(cè)有機(jī)溶劑溶解在50%二甲基亞砜或N，N-二甲基甲酰胺溶液中，再用水逐步稀釋。若為限度檢查，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定確定對(duì)照品溶液的濃度；若為定量測(cè)定，為保證定量結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的實(shí)際殘留量確定對(duì)照品溶液的濃度；通常對(duì)照品溶液色譜峰面積不宜超過(guò)供試品溶液中對(duì)應(yīng)的殘留溶劑色譜峰面積的2倍。必要時(shí)，應(yīng)重新調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡芤旱臐舛取１貍渲R(shí)毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑測(cè)定法

當(dāng)需要檢查有機(jī)溶劑的數(shù)量較多，且極性差異較大時(shí)，可采用此法。色譜條件：柱溫一般先在40℃維持8分鐘，再以每分鐘8℃的升溫速率升至120℃，維持10分鐘；以氮?dú)鉃檩d氣，流速為每分鐘2.0ml；以水為溶劑時(shí)頂空瓶平衡溫度為70～85℃，頂空瓶平衡時(shí)間為30～60分鐘；進(jìn)樣口溫度為200℃；如采用FID檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度為250℃。具體到某個(gè)品種的殘留溶劑檢查時(shí)，可根據(jù)該品種項(xiàng)下殘留溶劑的組成調(diào)整升溫程序。測(cè)定法：取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。必備知識(shí)毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑計(jì)算（1）限度檢查除另有規(guī)定外，按各品種項(xiàng)下規(guī)定的供試品溶液濃度測(cè)定。以?xún)?nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，供試品溶液所得被測(cè)溶劑峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比不得大于對(duì)照品溶液的相應(yīng)比值。以外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，供試品溶液所得被測(cè)溶劑峰面積不得大于對(duì)照品溶液的相應(yīng)峰面積。（2）定量測(cè)定

按內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法計(jì)算各殘留溶劑的量。必備知識(shí)毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑注意事項(xiàng)（1）除另有規(guī)定外，頂空條件的選擇：①應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的沸點(diǎn)選擇頂空平衡溫度。對(duì)沸點(diǎn)較高的殘留溶劑，通常選擇較高的平衡溫度；但此時(shí)應(yīng)兼顧供試品的熱分解特性，盡量避免供試品產(chǎn)生的揮發(fā)性熱分解產(chǎn)物對(duì)測(cè)定的干擾。②頂空平衡時(shí)間一般為30～45分鐘，以保證供試品溶液的氣-液兩相有足夠的時(shí)間達(dá)到平衡。頂空平衡時(shí)間通常不宜過(guò)長(zhǎng)，如超過(guò)60分鐘，可能引起頂空瓶的氣密性變差，導(dǎo)致定量準(zhǔn)確性的降低。③對(duì)照品溶液與供試品溶液必須使用相同的頂空條件。

必備知識(shí)毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑注意事項(xiàng)（2）定量方法的驗(yàn)證當(dāng)采用頂空進(jìn)樣時(shí)，供試品與對(duì)照品處于不完全相同的基質(zhì)中，故應(yīng)考慮氣液平衡過(guò)程中的基質(zhì)效應(yīng)（供試品溶液與對(duì)照品溶液組成差異對(duì)頂空氣-液平衡的影響）。由于標(biāo)準(zhǔn)加入法可以消除供試品溶液基質(zhì)與對(duì)照品溶液基質(zhì)不同所致的基質(zhì)效應(yīng)的影響，故通常采用標(biāo)準(zhǔn)加入法驗(yàn)證定量方法的準(zhǔn)確性；當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)加入法與其他定量方法的結(jié)果不一致時(shí)，應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)加入法的結(jié)果為準(zhǔn)。

必備知識(shí)毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法測(cè)定殘留溶劑注意事項(xiàng)（3）頂空平衡溫度一般應(yīng)低于溶解供試品所用溶劑的沸點(diǎn)10℃以下，能滿(mǎn)足檢測(cè)靈敏度即可；對(duì)于沸點(diǎn)過(guò)高的溶劑，如甲酰胺、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、乙二醇、N-甲基吡咯烷酮等，用頂空進(jìn)樣測(cè)定的靈敏度不如直接進(jìn)樣，一般不宜用頂空進(jìn)樣方式測(cè)定。

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