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一般理化性質(zhì)紫外吸收性質(zhì)DNA的變性DNA的復(fù)性核酸分子雜交核酸的理化性質(zhì)核酸一、一般的理化性質(zhì)能進(jìn)行兩性解離,線性大分子,粘度高??捎秒娪具M(jìn)行分離二、核酸的紫外吸收特性在260nm有最大紫外吸收三、DNA的變性(denaturation)定義:在某些理化因素作用下,維系DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的氫鍵斷裂,DNA雙鏈解開(kāi)成兩條單鏈的過(guò)程。DNA變性后在A260nm吸光度增加,稱為增(高)色效應(yīng)熱變性:加熱使DNA變性。解鏈曲線有50%DNA發(fā)生解鏈的溫度稱為解鏈溫度(熔點(diǎn),融解溫度,Tm值)DNA越長(zhǎng),G和C的含量越高,Tm值高。四、DNA的復(fù)性(renaturation)當(dāng)變性條件緩慢去除后,解開(kāi)的兩條DNA互補(bǔ)鏈可恢復(fù)原來(lái)的雙螺旋結(jié)構(gòu),這一現(xiàn)象稱為復(fù)性。DNA復(fù)性時(shí),其溶液OD260降低,稱為減色效應(yīng)DNA的變性與復(fù)性是可逆的熱變性的DNA經(jīng)緩慢冷卻后可以復(fù)性,稱為退火(annealing)。不同來(lái)源的DNA單鏈之間或與RNA鏈之間,只要存在著一定程度的堿基配對(duì)關(guān)系,就有可能形成雜化雙鏈(heteroduplex),這種現(xiàn)象稱為核酸分子雜交。五、核酸分子雜交(hybridization)DNA-DNA雜交雙
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