分析靈敏度及其評估方法

分析靈敏度及其評估方法第一頁，共十五頁，2022年，8月28日一、現(xiàn)狀第二頁，共十五頁，2022年，8月28日二、檢測限檢測系統(tǒng)或方法可檢測的最低分析物濃度為檢測限或稱分析靈敏度；確定檢測系統(tǒng)或方法的檢測限是實驗室的重要任務之一；cTn升高是診斷急性心梗的重要依據(jù)，在國外發(fā)表的“心臟標志物應用指南”中明確要求實驗室必須確定其檢測低限和在低濃度時的變異情況PSA是監(jiān)測患者治療后復發(fā)的重要信息，長期以來，臨床要求明確報告PSA有意義的最小量。核酸檢測報告的陰性、陽性報告也要求，能檢出的最小拷貝的核酸量可相當于多少病毒。第三頁，共十五頁，2022年，8月28日三、如何評價分析靈敏度1.檢測低限在臨床檢驗工作中,常用下式計算樣品中某分析物的含量：樣品單次檢測可以達到的非空白檢測響應量對應的分析物量。通常分析生理鹽水、蒸餾水或“0”濃度校準品至少10次；計算均值、標準差，2倍或3倍標準差即為檢測低限。第四頁，共十五頁，2022年，8月28日即：第五頁，共十五頁，2022年，8月28日2.生物檢測限某樣品單次檢測可能具有的最小響應量剛大于空白檢測低限響應量，該樣品內(nèi)含有的分析濃度為生物檢測限。通常制備幾份檢測限樣品，濃度界于預期檢測限濃度附近,至少檢測10次，計算均值、標準差。度量時，以檢測低限加2倍或3倍檢測限樣品標準差的方式，確定檢測系統(tǒng)或方法可定量報告分析物的最低濃度。第六頁，共十五頁，2022年，8月28日第七頁，共十五頁，2022年，8月28日3.功能靈敏度以天間重復CV為20%時對應檢測限樣品具有的平均濃度需用多個檢測限濃度來確定在低濃度處的精密度表現(xiàn)，從中選擇具有或最接近CV20%的對應濃度為可定量報告的最低濃度。對一批內(nèi)含低分析物濃度的人混合血清進行至少10批天間檢測，求均值、標準差和CV。第八頁，共十五頁，2022年，8月28日第九頁，共十五頁，2022年，8月28日四、分析靈敏度應用示例酶免法測定血清甲狀腺球蛋白，用無甲狀腺球蛋白的樣品作為空白樣品，將純化的甲狀腺蛋白加入該血清，并用空白血清作系列稀釋，組成0、0.25、0.50、1.0、2.0、4.0、8.0ug/L的甲狀腺球蛋白系列樣品。空白樣品批內(nèi)重復測定12次，其他樣品日間重復測定12次。第十頁，共十五頁，2022年，8月28日第十一頁，共十五頁，2022年，8月28日計算檢測低限：第十二頁，共十五頁，2022年，8月28日第十三頁，共十五頁，2022年，8月28日上述方法的缺點第十四頁，共十五頁，2022年，8月28日EP-17A(ProtocolsforDeterminationofLimitsofDetectionandLimitsofquantitation;App