李氏菌選擇性培養(yǎng)基使用說明

/品種名稱：026０3０改良的McＢride瓊脂（MMA)２50ｇ干粉培養(yǎng)基別名：李氏菌選擇性培養(yǎng)基MｃＢｒideListeriａAｇａr，Moｄified用途:用于單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。單核李斯特氏菌：單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病，感染后主要表現(xiàn)為敗血癥、腦膜炎和單核細(xì)胞增多。它廣泛存在于自然界中，食品中存在的單增李氏菌對人類的安全具有危險,該菌在4℃的環(huán)境中仍可生長繁殖，是冷藏食品威脅人類健康的主要病原菌之一。原理:胰胨、多價胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子；葡萄糖提供碳源；氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸氫二鈉為緩沖劑；甘氨酸、氯化鋰、苯乙醇和復(fù)達(dá)欣可抑制非李斯特氏菌以外的部分革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。圖鑒：培養(yǎng)基配方（每升）：胰胨5g多價胨5g牛肉膏粉3ｇ葡萄糖1g氯化鈉5g磷酸氫二鈉1g甘氨酸1０g氯化鋰0．5ｇ瓊脂１5ｇ最終pH７。３±0.２使用方法：1、稱取本培養(yǎng)基45．5g,加入1000mL蒸餾水或去離子水,加入2．5mL苯乙醇，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，12１℃滅菌15分鐘,待冷至5０℃，如需增強(qiáng)對其它雜菌的抑制作用，每10０ｍL培養(yǎng)基可加入3ｍg/ｍL復(fù)達(dá)欣水溶液(0.０3g復(fù)達(dá)新中加入１0ｍＬ滅菌蒸餾水或去離子水,過濾除菌)1ｍL，搖勻后傾注滅菌平皿，備用。2、分離。取增菌液一環(huán)，劃線接種于選擇性培養(yǎng)基ＭMA平板上，于35℃培養(yǎng)24—48h.3、斜射光鏡檢：準(zhǔn)備解剖鏡、斜射燈、平面鏡，使光源以４5°角照射到平面鏡上，再反射為解剖鏡光源。將MMA平板放在解剖鏡載物臺上,通過目鏡垂直向下觀察，李斯特氏菌菌落在此平板上，呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)灰色，扁平圓潤，稍有凸起，邊緣整齊，菌落較小，約為0．5mm左右。使用解剖鏡觀察并挑取五個可疑菌落劃線接種到胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂（ＴＳA－YE)平板上，于３0℃培養(yǎng)24－48ｈ，純培養(yǎng)后進(jìn)行鑒定.質(zhì)量控制：質(zhì)控菌株接種于30℃培養(yǎng)24—48h，結(jié)果如下：菌名菌號生長狀況培養(yǎng)特征單核細(xì)胞增生李斯特氏菌CMCC(B）540０2良好用45°斜射光鏡檢,可見藍(lán)色或藍(lán)灰色小菌落，扁平圓潤,略凸起，邊緣整齊大腸埃希氏菌ATCC2592受抑制——糞鏈球菌CMCＣ(B）32223