新課動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課件

專題2細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體蛇身馬首鹿角獸腳鷹爪魚鱗虎須鬣尾（lie）動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交過程：植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B去除細(xì)胞壁去除細(xì)胞壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B誘導(dǎo)融合融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂（脫分化）分化發(fā)育（再分化）愈傷組織雜種植株原生質(zhì)體的制備原生質(zhì)體的融合篩選組織培養(yǎng)

細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合

受精作用A細(xì)胞B細(xì)胞人工誘導(dǎo)1.1動(dòng)物細(xì)胞融合的概念雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合（也稱細(xì)胞雜交）：是指兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成一個(gè)單核細(xì)胞的過程。一、動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性滅活病毒、PEG、電激等融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，形成完整的雜交細(xì)胞誘導(dǎo)的手段？融合后細(xì)胞的類型？AB雜種細(xì)胞遺傳物質(zhì)有什么特點(diǎn)？三種AA、AB、BB（A、B）含兩種生物的遺傳物質(zhì)1.2動(dòng)物細(xì)胞融合過程原理？1.2動(dòng)物細(xì)胞融合過程為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑？滅活喪失感染性保留融合活性滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。

滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。P52生物技術(shù)資料卡意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。這一項(xiàng)技術(shù)成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。應(yīng)用：最重要的用途是：制備單克隆抗體小結(jié)：一、動(dòng)物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）1.概念：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。2.結(jié)果：形成含有2或多個(gè)細(xì)胞遺傳物質(zhì)的單核雜交細(xì)胞3.融合原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性4.誘導(dǎo)方式物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒5.意義：突破有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能廣泛應(yīng)用多個(gè)領(lǐng)域重要用途：制備單克隆抗體強(qiáng)調(diào)：效應(yīng)B淋巴細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，下文將其簡(jiǎn)稱為B淋巴細(xì)胞抗體：能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞（即效應(yīng)B細(xì)胞）。溫故知新二、單克隆抗體B淋巴細(xì)胞效應(yīng)B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)記憶B淋巴細(xì)胞分化抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法：從血清中分離抗體該法制備抗體的特點(diǎn)（缺陷）：

產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。多種效應(yīng)B細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)多種抗體抗原

抗原動(dòng)物體刺激漿細(xì)胞

抗體抗體不純抗原不純?nèi)绾谓鉀Q這個(gè)問題呢？反復(fù)注射思考：

科學(xué)家的設(shè)想：克?。o性繁殖）單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群，產(chǎn)生大量高純度抗體。存在的困難：體外培養(yǎng)的B淋巴細(xì)胞不可無限增殖問題1：哪種細(xì)胞可以無限增殖呢？骨髓瘤細(xì)胞問題2：怎樣讓細(xì)胞既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體呢？

B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合,制備單克隆抗體怎樣獲得大量高純度抗體呢？一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計(jì)方案：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖的細(xì)胞1975年英國科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)①為什么給小鼠注射特定的抗原蛋白？②會(huì)有幾種融合方式？③雜交瘤細(xì)胞是如何篩選出來的？有何特點(diǎn)？④是否所有的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生專一性抗體？⑤如何大規(guī)模進(jìn)行培養(yǎng)得到大量的單克隆抗體？雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？

本過程利用的哪些技術(shù)？

用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體由于該細(xì)胞群是單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆得來的，所以產(chǎn)生的抗體必然是化學(xué)性質(zhì)單一的，特異性強(qiáng)的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個(gè)細(xì)胞克隆的含義，只不過克隆的不是B淋巴細(xì)胞，而是雜交瘤細(xì)胞。）

細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)單抗制備過程分哪幾步？請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來。順序是？

你學(xué)會(huì)了嗎？2.3單克隆抗體的應(yīng)用診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。（如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）兩個(gè)過程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程單克隆抗體制備過程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法－－滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞－－雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)－－單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)本節(jié)小結(jié)重點(diǎn)【例1】能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是（）A.離心B.滅活的病毒C.電刺激D.振動(dòng)【例2】融合后的雜交細(xì)胞的遺傳物質(zhì)有何特點(diǎn)（）具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息B.能無限增殖C.可形成新個(gè)體D.培養(yǎng)過程會(huì)貼壁【例3】動(dòng)物細(xì)胞融合的作用中最重要的是（）A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和B.制備單克隆抗體C.培育新物種D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞

BB初試牛刀AB體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

7.下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案制備單克隆抗體不能，沒有注射抗原，無法獲得產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞。(1)該實(shí)驗(yàn)方案的目的是：(2)該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？(3)A是從小鼠的脾臟中取得__________該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______。