金品腫痛系列藥物的透皮能力測試,藥理學(xué)論文

金品腫痛系列藥物的透皮能力測試,藥理學(xué)論文金品腫痛系列藥物為云南省藥物研究所自主研發(fā)的特色外用系列藥物,同時(shí)也為云南彝醫(yī)傳統(tǒng)用藥,是云南省藥物研究所根據(jù)彝族秘方經(jīng)科學(xué)驗(yàn)證后開發(fā),研制而成的民族藥.現(xiàn)該制劑存在多種劑型,為比擬各類劑型的優(yōu)劣性,指導(dǎo)臨床用藥,對金品腫痛系列藥物不同劑型,不同給藥方式的體外透過情況進(jìn)行研究.由于金品腫痛系列藥物主要為外用制劑,使用經(jīng)過中主要給藥途徑為經(jīng)皮給藥,因此皮膚的屏障作用是決定藥物浸透速度的關(guān)鍵,藥物的透皮能力對藥物的吸收有直接影響.金品腫痛系列藥物由近20種中藥組成,消腫止痛,活血化瘀,舒經(jīng)活絡(luò),化痞散結(jié).主要用于跌打損傷,風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,肩周炎,痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎,乳腺小葉增生.華而不實(shí)所含梔子苷具有鎮(zhèn)痛、抗炎、治療軟組織損傷等作用.梔子苷構(gòu)造簡單,穩(wěn)定性好,相對質(zhì)量分?jǐn)?shù)高,出峰峰形好,利于計(jì)算.因而,選梔子苷作為指標(biāo)成分.1儀器與試藥1.1儀器RYJ-6A型藥物頭皮擴(kuò)散試驗(yàn)儀(上海黃海藥檢儀器廠);PL203電子精致細(xì)密天平(上海梅特勒-托利多儀器有限公司);電熱恒溫水浴鍋(北京市光明醫(yī)療儀器廠);高效液相儀(Agilent1200,美國);超聲儀(HS6150D).1.2試藥金品腫痛搽劑(云南省藥物研究所自制);金品腫痛氣霧劑(云南省藥物研究所自制);桅子有對照品(批號:110703-200322,規(guī)格:20mg);甲醇(色譜純);無水乙醇(分析純);氯化鈉(分析純;上海國藥集團(tuán));乙腈(色譜純);蒸餾水為重蒸水.1.3動(dòng)物昆醫(yī)種雄性小鼠2實(shí)驗(yàn)方式方法2.1離體皮膚處理昆明種雄性小鼠斷頸處死后,用剪刀小心剪去小鼠腹部的絨毛后,用剃須刀刮凈,注意不能弄破皮膚.迅速剝離小鼠腹部皮膚,清理殘存余留的皮下組織和脂肪,侵入生理鹽水中,備用.2.2體外透皮試驗(yàn)條件本文中牽涉到的體外透皮試驗(yàn)裝置為改進(jìn)的Franz擴(kuò)散池;水浴溫度為(310.1)℃;接收液為30%乙醇生理鹽水;接收池體積為7mL;釋放面積為10.747cm.2.3體外透皮試驗(yàn)方式方法取6個(gè)Franz擴(kuò)散池,標(biāo)注為1、2、3、4、5、6號,分別覆于經(jīng)處理的雄性小鼠皮膚,在擴(kuò)散池內(nèi)注入接收液并充滿,第1組實(shí)驗(yàn)分別在1-6號皮膚角質(zhì)層側(cè)定量注入2mL腫痛搽劑,第二組實(shí)驗(yàn)分別在1~6號皮膚角質(zhì)層側(cè)定量噴入2mL腫痛氣霧劑,第3組實(shí)驗(yàn)分別在1-6號皮膚角質(zhì)層側(cè)定量注入2mL腫痛氣霧劑.向上排出氣泡后置水浴中加熱并計(jì)時(shí),分別于1、2、4、6、12、24、48、72h取樣,全部取出接收液,每次取樣后重新注滿接收液,并排除擴(kuò)散池中的氣泡.將1、2、4、6、12、24、48、72h取樣的接收液置于置于蒸發(fā)皿中,60℃水浴蒸干,1、2h樣品甲醇定容至1mL,制成供試品溶液;4、6、12h樣品甲醇定容至2mL,制成供試品溶液;24、48、72h樣品甲醇定容至5mL,制成供試品溶液.2.4接收液中梔子苷的HPLC測定方式方法.2.4.1色譜條件色譜柱Phenomenex(4.6mm250mm,5m),流動(dòng)相為乙腈-水(15∶85);流速1mL/min;檢測波長238nm;柱溫30℃.進(jìn)樣量:10L,運(yùn)行時(shí)間為25min,甲醇為空白對照.此條件下梔子苷能很好分離,見圖1~3.2.4.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精致細(xì)密稱取枯燥后的梔子苷對照品12.5mg于容量瓶中,加甲醇定容到50mL,制成對照品溶液.分別精致細(xì)密量取0.2、0.5、0.7、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL置于10mL容量瓶中,加甲醇定容.0.45m濾膜過濾,按2.4.1項(xiàng)下色譜條件測定,記錄峰面積.以濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為:Y=15.354X+1.6115(R2=0.9999),線性范圍0.05~2.5mg.2.4.3精致細(xì)密度試驗(yàn)①日內(nèi)精致細(xì)密度試驗(yàn):取標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)品溶液,按上述色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次,測定梔子苷峰面積,RSD值為0.15%.②日間精致細(xì)密度試驗(yàn):取標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)品溶液,按上述色譜條件每日重復(fù)進(jìn)樣3次,連續(xù)3d.測定梔子苷峰面積,RSD值為1.65%.2.4.4重復(fù)性試驗(yàn)取同一時(shí)間點(diǎn)的接收液6份,分別置于蒸發(fā)皿中,60℃水浴蒸干,甲醇定容至5mL.經(jīng)0.45m濾膜過濾,按上述色譜條件,測定梔子苷峰面積,RSD值為1.11%.2.4.5穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一份體外經(jīng)皮浸透液,于蒸發(fā)皿中,60℃水浴蒸干,甲醇定容至10mL,分別放置0h、2h、4h、6h、24h、72h定量進(jìn)樣,測定梔子總皂苷峰面積,RSD值為1.47%.2.4.6加樣回收率試驗(yàn)將同一時(shí)間點(diǎn)的9份接收液,分別參加高、中、低3個(gè)濃度的梔子苷對照品溶液,分別置于60℃水浴蒸干,甲醇定容至.按上述色譜條件,測定梔子苷峰面積.計(jì)算回收率,高、中、低3個(gè)濃度的回收率分別為100.93%,98.60%,100.19%,平均回收率為99.91%.3結(jié)果3.1金品腫痛搽劑(涂搽給藥)的累積透過曲線測定將上述第1組實(shí)驗(yàn)結(jié)果,1~72h的1~6號各接收液按要求制成供試品,經(jīng)上述色譜條件測定.根據(jù)計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)的累積透過量,繪制體外經(jīng)皮浸透曲線圖,結(jié)果見表1.以t0.5為橫坐標(biāo),以Q為縱坐標(biāo),繪制累積透過曲線,進(jìn)行擬合.結(jié)果見圖4.3.2金品腫痛氣霧劑(噴射給藥)的累積透過曲線測定將上述第2組實(shí)驗(yàn)結(jié)果,1~72h的1~6號各接收液按要求制成供試品,經(jīng)上述色譜條件測定.根據(jù)計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)的累積透過量,繪制體外經(jīng)皮浸透曲線圖,結(jié)果見表2.以t0.5為橫坐標(biāo),以Q為縱坐標(biāo),繪制累積透過曲線,進(jìn)行擬合.結(jié)果見圖5.3.3腫痛氣霧劑(涂搽給藥)的累積透過曲線測定將上述第3組實(shí)驗(yàn)結(jié)果,1~72h的1~6號各接收液按要求制成供試品,經(jīng)上述色譜條件測定.根據(jù)計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)的累積透過量,繪制體外經(jīng)皮浸透曲線圖,結(jié)果見表3.以t0.5為橫坐標(biāo),以Q為縱坐標(biāo),繪制累積透過曲線,進(jìn)行擬合.結(jié)果見圖6.4結(jié)果金品腫痛搽劑(涂搽給藥)體外24h累積透過量為57.3082g/cm穩(wěn)態(tài)透皮速率(J)為11.96g/cm金品腫痛氣霧劑(噴射給藥)體外24h累積透過量為52.1414g/cm穩(wěn)態(tài)透皮速率(J)為7.444g/cm金品腫痛氣霧劑(涂搽給藥)體外24h累積透過量為38.1809g/cm穩(wěn)態(tài)透皮速率(J)為9.737g/cm.5結(jié)論由以上結(jié)果可知:金品腫痛氣霧劑采用噴射給藥方式時(shí)在0~2h有明顯快速釋放經(jīng)過,隨后釋放趨勢逐步減緩,至72h釋放量已較微弱.證明金品腫痛氣霧劑是速釋制劑,急性使用時(shí)能發(fā)揮快速、明顯的藥效.金品腫痛搽劑在6~24h釋放量最高,且能在24h有最高的累積透過量(57.3082g/cm),適宜作為長效制劑長期給藥.同一制劑采用噴射給藥能使藥物快速經(jīng)皮浸透,采用涂搽給藥釋藥較均勻平穩(wěn),但釋放周期過長(72h仍有較高浸透量),可作為進(jìn)一步劑型開發(fā)的基礎(chǔ).6討論金品腫痛系列藥物的體外透皮試驗(yàn)證明,該系列藥物作為經(jīng)皮給藥制劑,不經(jīng)過胃腸道系統(tǒng),能夠避免胃腸道的毀壞作用和肝臟的首過效應(yīng),提高藥物的生物利用度,能比擬持續(xù)穩(wěn)定的發(fā)揮療效,降低不良反響.臨床使用中,可針對用藥需求對氣霧劑和搽劑進(jìn)行選擇,能更合理的指導(dǎo)用藥,減少浪費(fèi),提高療效.本文中采用的梔子苷檢測方式方法為藥典方式方法,同時(shí)也是金品腫痛系列產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的梔子苷含量檢測方式方法,但體外皮膚浸透實(shí)驗(yàn)未用過此方式方法,經(jīng)方式方法學(xué)驗(yàn)證,此檢測條件可用做金品腫痛系列藥物體外透皮實(shí)驗(yàn)接收液的梔子苷檢測.以下為參考文獻(xiàn)[1]劉怡,陳磊,張留記.不同產(chǎn)地梔子皮和梔子仁中有效成分的含量比擬[J].中藥新藥與臨床藥理,2020,1,23(1):81-83.[2]呂慧英,劉