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關(guān)于熒光PCR檢測原理第一頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三一、熒光信號的檢測第二頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三
熒光標(biāo)記信號的產(chǎn)生
熒光標(biāo)記基團(tuán)在某波長的激發(fā)光刺激下,產(chǎn)生一個更長波長的發(fā)射光第三頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三FRET?
某熒光標(biāo)記基團(tuán)在激發(fā)光刺激下生成某波長的發(fā)射光,當(dāng)另一屏蔽基團(tuán)與其距離合適時,原發(fā)射光將會被屏蔽基團(tuán)所吸收,并轉(zhuǎn)化為其他波長的發(fā)射光或熱能,稱之為FRET。第四頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三熒光信號熒光染料SYBRgreen——特異性結(jié)合雙鏈,釋放熒光信號特異性熒光探針Taqman雙熒光標(biāo)記探針molecularBeacon熒光標(biāo)記探針熒光標(biāo)記雜交雙探針第五頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三Taqman特異性熒光雙標(biāo)記探針Taqman5’→3’外切酶活性第六頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三Molecular
beacon第七頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三熒光標(biāo)記雜交雙探針第八頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三二、典型的熒光PCR擴(kuò)增曲線陽性標(biāo)本擴(kuò)增曲線陰性標(biāo)本擴(kuò)增曲線第九頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三Bio-radiCycler擴(kuò)增曲線第十頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三PE-5700擴(kuò)增曲線第十一頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三PE-7700擴(kuò)增曲線第十二頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三RocheLightCycler擴(kuò)增曲線第十三頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三三、Ct值樣本擴(kuò)增曲線與閾值線交叉點的循環(huán)數(shù)Ct值第十四頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三四、熒光PCR定量的原理第十五頁,共十七頁,編輯于2023年,星期三Unknown未知樣本拷貝數(shù)的確定第十六頁,共
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