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關(guān)于菊花的組織培養(yǎng)PPT第一頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三一、基礎(chǔ)知識(shí)1、植物的組織培養(yǎng)(1)細(xì)胞的分化①概念:在個(gè)體發(fā)育中,相同細(xì)胞的后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程.②過(guò)程:如:受精卵增殖、生長(zhǎng)、分化形成組織、器官、系統(tǒng).點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三③特點(diǎn):B.穩(wěn)定性:C.全能性:A.持久性:是一種持久性的變化,它發(fā)生在生物體的整個(gè)生命過(guò)程中,在胚胎期達(dá)到最大限度.細(xì)胞分化是穩(wěn)定的,一般是不可逆轉(zhuǎn)的.已分化的細(xì)胞,仍具有發(fā)育的潛能.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三⑤原因:基因在特定的時(shí)間和空間條件下的選擇性表達(dá)的結(jié)果.④結(jié)果:形成不同的細(xì)胞和組織(2)細(xì)胞的全能性①定義:生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能的特性.②原理:生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì),都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第四頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三高度特化的動(dòng)物細(xì)胞,從整個(gè)細(xì)胞來(lái)說(shuō),全能性受到限制。但它的細(xì)胞核仍然保持著全能性,這是因?yàn)榧?xì)胞核內(nèi)含有該物種遺傳性所需要的遺傳物質(zhì).已分化的植物細(xì)胞,仍具有全能性.③實(shí)例受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞④全能性的比較:點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第五頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第六頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三(3)植物組織培養(yǎng)細(xì)胞離體①必要條件:一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件②原理:細(xì)胞的全能性A.外植體:從活植物體上切下進(jìn)行培養(yǎng)的那部分細(xì)胞、組織或器官.③相關(guān)概念:點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第七頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三B.脫分化:由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程,又稱去分化。C.再分化:脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過(guò)程中重新分化根或芽等器官的過(guò)程D.愈傷組織:細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則,是高度液泡化的、成無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第八頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三人參的愈傷組織第九頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三菠蘿的愈傷組織第十頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十一頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十二頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三2、影響植物組織培養(yǎng)的因素(1)植物材料的選擇煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容易枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)比較難同一植物材料的年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果菊花的組織培養(yǎng)一般選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十三頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十四頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三(2)離體的植物組織和細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對(duì)特殊,需配置不同的培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基主要成分包括:A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有機(jī)物、植物激素點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十五頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三MS固體培養(yǎng)基成分及比例第十六頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三討論:你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎?同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?答:微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽;蔗糖提供碳源,同時(shí)能夠維持培養(yǎng)基的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng),無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。

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第十七頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三①常用的植物激素:生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素和赤霉素生長(zhǎng)素類:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)細(xì)胞分裂素類:激動(dòng)素(KT)、6-芐基嘌呤(6-BA)、玉米素(ZT)赤霉素類:赤霉酸(GA3)(3)植物激素的影響點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第十八頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三②生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素作用植物中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長(zhǎng)素存在的情況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但不利分化先使用細(xì)胞分裂素后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率高第十九頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素:>有利于根的分化生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素:<有利于芽的分化,抑制根的分化生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素:=促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)③生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素同時(shí)使用,用量的比例對(duì)植物細(xì)胞發(fā)育方向的影響(4)pH、溫度、光照pH控制在5.8左右,溫度控制在18-22。C,每日用日光燈照射12h.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三3、植物組織培養(yǎng)過(guò)程:離體組織或細(xì)胞植物體脫分化細(xì)胞分裂素≈生長(zhǎng)素愈傷組織芽根細(xì)胞分裂素>生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素<生長(zhǎng)素再分化植物細(xì)胞培養(yǎng)不需要光?需要光點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十一頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三植物組織培養(yǎng)的過(guò)程離體的植物組織或細(xì)胞愈傷組織根和芽完整的植物體脫分化再分化點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十二頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三(1)、培育無(wú)病毒植株(2)、培養(yǎng)紫草愈傷組織,提取紫草素(治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化妝品的原料)(4)、基因工程中亦需用到植物組織培養(yǎng)的方法4、植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用:(3)、誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu),包裹上人造種皮,制成人工種子,可以解決有些作物品種繁殖能力差,結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問(wèn)題.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十三頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三人工種子點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十四頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三同常規(guī)的無(wú)性繁殖方法相比,組織培養(yǎng)快速繁殖法主要具有以下優(yōu)點(diǎn):(1)快速。采用常規(guī)的方法如分株法,一棵花卉一年一般只能生產(chǎn)幾株或幾十株,但用組織培養(yǎng)的方法則每年可以繁殖出幾萬(wàn)甚至數(shù)百萬(wàn)的小植株。(2)周年生產(chǎn)?;ɑ芙M織培養(yǎng)快速繁殖是在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行,因條件可控,所以不受季節(jié)限制,可以全年進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)。而常規(guī)的無(wú)性繁殖則受季節(jié)限制,只能在花卉生長(zhǎng)季節(jié)進(jìn)行繁殖。(3)經(jīng)濟(jì)效益高?;ɑ芙M織培養(yǎng)快速繁殖所需要的空間小,在一個(gè)200平方米的培養(yǎng)室內(nèi)一年可生產(chǎn)試管苗上百萬(wàn)株。如按每株1元計(jì)算,每年產(chǎn)值上百萬(wàn)元。(4)以組織培養(yǎng)繁殖的種苗與母株有著相同的遺傳基因。所以使用這項(xiàng)技術(shù)可讓優(yōu)良的品種不斷地延續(xù)。組織培養(yǎng)與常規(guī)繁殖相比優(yōu)點(diǎn)眾多點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十五頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三二、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備MS固體培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基包括20多種營(yíng)養(yǎng)成分,實(shí)驗(yàn)室一般使用4。C保存配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備.1、配置各種母液點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十六頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三①無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮10倍,微量元素濃縮100倍,常溫保存.②激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液.③用母液配制培養(yǎng)基時(shí),需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù),計(jì)算用量.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十七頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三2、配置培養(yǎng)基分裝到錐形瓶中,每瓶分裝50ml或100ml.①配制培養(yǎng)液②調(diào)PH③培養(yǎng)基的分裝由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易,因此不必添加植物激素.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十八頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三3、滅菌分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌.1、選材:菊花莖段,取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝.(二)外植體消毒2、消毒①流水沖洗菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉,用軟刷輕輕刷洗,刷洗后在流水下沖洗20min左右.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第二十九頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三②酒精處理用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分,放入體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中搖動(dòng)2-3次,持續(xù)6-7s,立即將外植體取出,在無(wú)菌水中清洗.③消毒液處理取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分,放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中1-2min,取出后在無(wú)菌水中至少清洗3次,漂凈消毒液.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三(三)接種污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子,接種室消毒是至關(guān)重要的。用70%的酒精噴霧使空氣消毒,酒精或新潔爾滅搽洗工作臺(tái)并用紫外線照射20分鐘1、接種室消毒2、無(wú)菌操作要求操作要在酒精燈火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼燒滅菌,接種后立即蓋好瓶蓋。3、材料的切取和接種點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十一頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十二頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三4、接種注意事項(xiàng)①每接種一塊外植體前,鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精燈火焰上燒一遍,冷卻后再接種.②外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻,放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定,一般胡蘿卜3-4塊,菊的莖或葉6-8塊,也不要太少,以充分利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條件.③插入時(shí)應(yīng)注意方向,不要倒插。莖段、莖尖基部插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十三頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三思考:你打算做幾組重復(fù)?你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎?答:每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng),用以說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格,沒(méi)有被雜菌污染。點(diǎn)此播放教學(xué)視頻第三十四頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三(四)培養(yǎng)1、愈傷組織的培養(yǎng)從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過(guò)2周時(shí)間。2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長(zhǎng)出乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織。首次培養(yǎng)愈傷組織時(shí),恒溫箱的門(mén)應(yīng)該關(guān)閉不必見(jiàn)光,因?yàn)樵跓o(wú)光條件下愈傷組織長(zhǎng)的更快。2周后,培養(yǎng)基成分接近耗盡,必須更換培養(yǎng)基,進(jìn)行繼代培養(yǎng).點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十五頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三繼代培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)愈傷組織的相同,在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下,將愈傷組織連同原來(lái)的外植體一起移到新培養(yǎng)基上。愈傷組織的繼代培養(yǎng)一代為20d。如果延長(zhǎng)時(shí)間,培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少,外植體會(huì)分泌有毒物質(zhì),造成自身中毒。如果愈傷組織長(zhǎng)到直徑為1-1.5cm時(shí),就可以進(jìn)行試管苗培養(yǎng),否則還需進(jìn)行第二代繼代培養(yǎng).2、愈傷組織的繼代培養(yǎng)在愈傷組織繼代培養(yǎng)期間,將恒溫箱的門(mén)打開(kāi),讓愈傷組織見(jiàn)光,愈傷組織見(jiàn)光后顏色可以轉(zhuǎn)為綠色.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十六頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三3、試管苗的培養(yǎng)當(dāng)愈傷組織長(zhǎng)到一定大小后,可以更換培養(yǎng)基,進(jìn)行試管苗的見(jiàn)光培養(yǎng).(五)移栽移栽生根的菊花試管苗之前,應(yīng)先打開(kāi)培養(yǎng)瓶的封口膜,讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日.1、打開(kāi)封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移用流水清洗根部的培養(yǎng)基,將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十七頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三(六)栽培3、移栽珍珠巖:固體基質(zhì)型,含水量高、蓄水性強(qiáng)、透性好,適合栽培.幼苗長(zhǎng)壯后,移栽到土壤中.幼苗移栽后,每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況,適時(shí)澆水、施肥,直至開(kāi)花.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十八頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第三十九頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三三、課題延伸1、一般來(lái)說(shuō),容易進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物,也容易進(jìn)行組織培養(yǎng).2、實(shí)例:蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季.點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第四十頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三本課題內(nèi)容小結(jié)菊花組織培養(yǎng)基礎(chǔ)知識(shí)實(shí)驗(yàn)操作植物體的組織培養(yǎng)影響組織培養(yǎng)的因素細(xì)胞分化細(xì)胞全能性組織培養(yǎng)過(guò)程營(yíng)養(yǎng)激素環(huán)境條件MS固體培養(yǎng)基制備外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培點(diǎn)此播放教學(xué)視頻

第四十一頁(yè),共四十四頁(yè),編輯于2023年,星期三作業(yè):P36

1、在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,為什么要進(jìn)行一系列的消毒、滅菌,并且要求無(wú)菌操作。2、在選取菊花莖段是,為什么要選取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝?外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長(zhǎng),如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的

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