第二章樣品的采集與預(yù)處理

第二章樣品的采集與預(yù)處理第一頁，共四十四頁，2022年，8月28日

一、樣品的采集

采樣——從大量的分析對象中抽取有代表性的一部分作為分析材料（分析樣品），這項工作叫采樣。第一節(jié)樣品的采集

第二頁，共四十四頁，2022年，8月28日正確采樣的原則（1）采集的樣品要均勻、有代表性；能反映全部被檢食品的組成、質(zhì)量和衛(wèi)生狀況。（2）采樣方法要與分析目的一致。（3）采樣及樣品制備過程中要設(shè)法保持原有的理化指標，避免預(yù)測組分發(fā)生化學(xué)變化或丟失。（如水分、氣味、揮發(fā)性酸等）。（4）防止帶入雜質(zhì)或污染。（5）采樣方法要盡量簡單，處理裝置尺寸適當。第三頁，共四十四頁，2022年，8月28日檢樣由整批食物的各個部分采取的少量樣品，稱為檢樣。原始樣品把許多份檢樣綜合在一起稱為原始樣品。平均樣品原始樣品經(jīng)過處理再抽取其中一部分作檢驗用者稱為平均樣品。應(yīng)一式三份,分別供檢驗、復(fù)驗及備查使用。每份樣品數(shù)量一般不少于0.5公斤。二、樣品的分類第四頁，共四十四頁，2022年，8月28日三、采樣的一般方法第一種采集方法是隨機抽樣。均衡地、不加選擇地從全部產(chǎn)品的各個部分取樣。但隨機≠隨意。隨機——要保證所有物料各個部分被抽到的可能性均等。第五頁，共四十四頁，2022年，8月28日第二種采集方法是代表性抽樣：可按不同生產(chǎn)日期也可在流水線上按一定的時間間隔抽樣按分析的目的取樣第六頁，共四十四頁，2022年，8月28日

如：粘稠不好混勻的液體，從包裝內(nèi)上、中、下分別取樣。蔬菜的營養(yǎng)成分（全菜）要從莖、枝、葉分別取，粉碎后，混勻。測魚頭部分的成分就只取魚頭?？傊鶕?jù)測定的目的而定采樣方法。第七頁，共四十四頁，2022年，8月28日樣品的制備樣品的制備——指對樣品的粉碎、混勻、縮分等過程。四分法：第八頁，共四十四頁，2022年，8月28日樣品的制備方法因產(chǎn)品類型不同而異液體、漿體或懸浮液體搖勻，充分攪拌。互不相容的液體（如油與水的混合物）先分離，再分別取樣。固體樣品切細、粉碎、搗碎、研磨等。罐頭除核、去骨、去調(diào)味品、搗碎。第九頁，共四十四頁，2022年，8月28日樣品保存采取的樣品應(yīng)在短時間內(nèi)分析，否則應(yīng)妥善保管。放在密閉、潔凈容器內(nèi)，置于陰暗處保存。易腐敗變質(zhì)的放在0—5℃冰箱內(nèi)，保存時間也不能太長。易分解的要避光保存。特殊情況下，可加入不影響分析結(jié)果的防腐劑或冷凍干燥保存。第十頁，共四十四頁，2022年，8月28日第二節(jié)樣品的預(yù)處理目的：1、測定前排除干擾組分；2、對樣品進行濃縮。方法：主要有8種。原則：①消除干擾因素；②完整保留被測組分；③使被測組分濃縮；以便獲得可靠的分析結(jié)果。第十一頁，共四十四頁，2022年，8月28日一、粉碎法由于顆粒尺寸大，分析成分被包埋在顆粒內(nèi)部，沒有暴露出來，從而使得分析結(jié)果偏差。干樣品：谷物、飼料、油粕粉等；研缽、粉碎機、球磨機。濕樣品：禽肉、海產(chǎn)品、面糊等；絞肉機、組織磨碎機等。第十二頁，共四十四頁，2022年，8月28日二、滅酶法對于樣品含有成分含量已經(jīng)確定的，沒有必要滅酶，如果檢測糖、脂肪、蛋白質(zhì)等成分時，需要滅酶。常用滅酶手段是加熱。第十三頁，共四十四頁，2022年，8月28日三、有機物破壞法

測定食品中無機成分的含量，需要在測定前破壞有機結(jié)合體，如蛋白質(zhì)等。操作方法分為干法和濕法兩大類。1.干法灰化原理：將樣品至于電爐上加熱，使其中的有機物脫水、炭化、分解、氧化，在置高溫爐中灼燒灰化，直至殘灰為白色或灰色為止，所得殘渣即為無機成分。第十四頁，共四十四頁，2022年，8月28日

為了縮短灰化時間，促進灰化完全，防止有些元素的揮發(fā)損失，常常向樣品中加入硝酸、過氧化氫等灰化助劑，不增加殘灰質(zhì)量，可起到加速灰化的作用。有時可添加氧化鎂、碳酸鹽、硝酸鹽等助劑，可是碳粒不被覆蓋，但應(yīng)做空白試驗。第十五頁，共四十四頁，2022年，8月28日干法灰化方法特點①此法基本不加或加入很少的試劑，故空白值低。②因灰分體積很小，因而可處理較多的樣品，可富集被測組分。③有機物分解徹底，操作簡單。優(yōu)點①所需時間長。②因溫度高易造成易揮發(fā)元素的損失。③坩堝對被測組分有吸留作用，使測定結(jié)果和回收率降低。缺點第十六頁，共四十四頁，2022年，8月28日2.濕法消化原理：樣品中加入強氧化劑，并加熱消煮，使樣品中的有機物質(zhì)完全分解、氧化，呈氣態(tài)逸出，待測組分轉(zhuǎn)化為無機物狀態(tài)存在于消化液中。常用的強氧化劑有濃硝酸、濃硫酸、高氯酸、高錳酸鉀、過氧化氫等。第十七頁，共四十四頁，2022年，8月28日濕法消化的優(yōu)缺點①產(chǎn)生有害氣體，需在通風柜中進行。②初期易產(chǎn)生大量泡沫外溢。③試劑用量大，空白值偏高。優(yōu)點①有機物分解速度快，所需時間短。②由于加熱溫度低，可減少金屬揮發(fā)逸散的損失。缺點第十八頁，共四十四頁，2022年，8月28日3.紫外光分解法

高壓汞燈提供紫外光。85±5℃，加雙氧水。4.微波高壓消煮器。食品樣品最多只要10分鐘（2.5MPa);第十九頁，共四十四頁，2022年，8月28日四、蒸餾法利用液體混合物中各種組分揮發(fā)度的不同而將其分離。常壓蒸餾減壓蒸餾水蒸氣蒸餾掃集共蒸餾共沸蒸餾萃取精餾精餾第二十頁，共四十四頁，2022年，8月28日第二十一頁，共四十四頁，2022年，8月28日第二十二頁，共四十四頁，2022年，8月28日第二十三頁，共四十四頁，2022年，8月28日五、溶劑抽提法浸提法溶劑萃?。↙IE）超臨界萃?。⊿CFE）（SFE）固相萃?。⊿PE）微波萃?。∕AE）超聲波萃?。║E）利用混合物中各種組分在某種溶劑中溶解度的不同而是混合物分離的方法。第二十四頁，共四十四頁，2022年，8月28日（一）浸提法（從固體中萃取有效成分）用適當?shù)娜軇⒐腆w樣品中某種待測成分浸提出來，又稱“液——固萃取法”。1.提取劑的選擇由相似相溶原理選擇第二十五頁，共四十四頁，2022年，8月28日選溶劑沸點在45～80℃之間的，低，易揮發(fā)；高，不易提純，濃縮，溶劑與提取物不好分離。選穩(wěn)定性好的溶劑。

2.提取方法：1）振蕩浸漬法2）搗碎法3）索氏提取法第二十六頁，共四十四頁，2022年，8月28日

（二）溶劑萃取法（溶劑分層、液液萃取、抽提）1.原理:用一種溶劑把樣品溶液中的一種組分萃取出來，這種組分在原溶液中的溶解度小于在新溶劑中的溶解度，即分配系數(shù)不同。用于原溶液中各組分沸點非常相近或形成了共沸物，無法用一般蒸餾法分離的物質(zhì)。新溶劑——萃取劑（新溶劑+被溶解組分）——萃取相比重（原溶液+被溶解組分）——萃余相不同第二十七頁，共四十四頁，2022年，8月28日2.方法：

工業(yè)上用萃取塔

實驗室用分液漏斗3、關(guān)于萃取劑的選擇：（1）萃取劑與原溶劑不互溶且比重不同。（2）萃取劑與被測組分的溶解度要大于組分在原溶劑中的溶解度。對其它組分溶解度很小。（3）萃取相經(jīng)蒸餾可使萃取劑與被測組分分開，有時萃取相整體就是產(chǎn)品。第二十八頁，共四十四頁，2022年，8月28日（三）超臨界萃?。⊿FE）

利用超臨界流體SCF作為溶劑，用來有選擇性地溶解液體或固體混合物中的溶質(zhì)。對溶質(zhì)的溶解度大大增加。

超臨界流體——流體的溫度、壓力處于臨界狀態(tài)以上。常用CO2作為超臨界流體（臨界溫度為31.05℃，臨界壓力7.37Mpa）,不可燃、無毒、廉價易得、化學(xué)穩(wěn)定性好。第二十九頁，共四十四頁，2022年，8月28日溫度壓力固體液體氣體流體CTAB第三十頁，共四十四頁，2022年，8月28日六、色層分離法又稱色譜分離、色層分析、層析、層離法。色層分析——使多種組分混合物在不同的載體上進行分離。第三十一頁，共四十四頁，2022年，8月28日1906年，俄國植物學(xué)家茨威特分離植物葉綠體中色素而得名，玻璃管中裝CaCO3,石油醚溶解植物葉綠體倒入管內(nèi)，再用石油醚做淋洗劑，結(jié)果，柱子中被分成幾個不同顏色的譜帶。第三十二頁，共四十四頁，2022年，8月28日兩相物質(zhì)：固定相流動相樣品要制備成液體或氣體。按固定相材料及使用形式分類柱色譜——固定相裝在色譜柱中紙色譜——層析濾紙為支持劑，濾紙上結(jié)合水為固定相。薄層色譜（TLC）——將固定相粉末制成薄層。氣相色譜（GC）——流動相為氣體。液相色譜（HPLC）——流動相為液體。第三十三頁，共四十四頁，2022年，8月28日按不同的分離原理分：吸附層析分配層析離子交換層析凝膠層析（一）吸附色譜——利用吸附劑對不同組分的物理吸附性能的差異進行分離。吸附力相差越大分離效果越好。固定相——固體吸附劑流動相——氣體或液體第三十四頁，共四十四頁，2022年，8月28日（二）分配色譜

利用不同組分在兩相中的不同分配系數(shù)來進行分離。（溶解度的不同）固定相——固體支持劑（擔體）+固定液流動相——氣體或液體（與固定相不相溶）紙層析：紙是支持劑，結(jié)合水為固定相，溶劑作為流動相。第三十五頁，共四十四頁，2022年，8月28日

（三）離子交換色譜法——利用各組分與離子交換樹脂的親和力的不同來分離。陽離子交換：R—H+M+X-R—M+HX陰離子交換：R—OH+M+X-R—X+MOH第三十六頁，共四十四頁，2022年，8月28日七、化學(xué)分離法（一）磺化法和皂化法用來除去樣品中脂肪或處理油脂中其它成分，使本來憎水性油脂變成親水性化合物，從樣品中分離出去。第三十七頁，共四十四頁，2022年，8月28日1.硫酸磺化法（磺化法）用濃硫酸處理樣品，引進典型的極性官能團SO3使脂肪、色素、蠟質(zhì)等干擾物質(zhì)變成極性較大，能溶于水和酸的化合物，與那些溶于有機溶劑的待測成分分開。主要用于有機氯農(nóng)藥殘留物的測定。第三十八頁，共四十四頁，2022年，8月28日2.皂化法原理:酯+堿酸或脂肪酸鹽+醇（1）用于白酒中總酯的測定，用過量的NaOH將酯皂化掉，過量的堿再用酸滴定，最后由用堿量來計算總酯。（2）用于植物油的皂化價的測定。（皂化價高示含游離脂肪酸量大。常用堿為NaOH或KOH，NaOH直接用水配制，而KOH易溶于乙醇溶液。第三十九頁，共四十四頁，2022年，8月28日(二）沉淀分離法利用沉淀反應(yīng)進行分離。在試樣中加入適當?shù)某恋韯贡粶y組分沉淀下來或?qū)⒏蓴_組分沉淀下來，再經(jīng)過濾或離心把沉淀和母液分開。常用的沉淀劑：堿性硫酸銅、堿性醋酸鉛等。第四十頁，共四十四頁，2022年，8月28日例如，測冷飲中糖精鈉含量時，，加入堿性硫酸銅，將蛋白質(zhì)及其它干擾物、雜質(zhì)沉淀出來，而糖精鈉留在試液中，取濾液進行分析。（三）掩蔽法向樣品中加入一種掩蔽劑使干擾成分仍在溶液中，而失去了干擾作用，多用于絡(luò)合滴定中。第四十一頁，共四十四頁，2022年，8月28日八、濃縮為了提高待測組分的濃度，常對樣品提