微生物試驗室SOP文件

微生物實驗室SOP文件名目01試劑貯存和配制區(qū)工作制度02標(biāo)本處理區(qū)工作制度03細(xì)菌自動分析區(qū)工作制度04試劑貯存和配制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序05標(biāo)本處理區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序06細(xì)菌自動分析區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序07紫外消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序08消毒液配制使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序09一般冰箱使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序10超低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程11潔凈工作臺使用操作規(guī)程12丫皿￡鹿2型自動分析系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序13移液器使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序14高速離心機(jī)操作標(biāo)準(zhǔn)操作程序15冰箱愛護(hù)和保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序16電熱恒溫水浴箱操作程序17潔凈工作臺愛護(hù)和保養(yǎng)程序18可移動紫外消毒車使用操作程序19加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序20離心機(jī)愛護(hù)保養(yǎng)操作程序21溫度計校準(zhǔn)程序22試劑的質(zhì)檢操作程序23.微生物實驗室崗位職責(zé)（暫行）24臨床標(biāo)本的儲存程序25一般培養(yǎng)陰性操作程序26真菌培養(yǎng)陰性操作程序27苛養(yǎng)菌培養(yǎng)陰性操作程序28抗酸桿菌培養(yǎng)陰性操作程序29支原體培養(yǎng)檢驗操作程序30臨床檢驗及收費(fèi)程序31微生物檢驗收收費(fèi)價格01、標(biāo)本處理區(qū)工作制度進(jìn)入本區(qū)需穿工作服、工作鞋。本區(qū)只能進(jìn)行：臨床標(biāo)本的儲存，標(biāo)本接種、培養(yǎng)、及其菌株檢驗前處理、菌懸液制備、染色標(biāo)本檢查、非上機(jī)鑒定與藥敏試驗操作等危險操作，其它操作不得在此區(qū)進(jìn)行。在整個本區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套、口罩和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。工作終止后必須趕忙對工作區(qū)進(jìn)行清潔或消毒。非本實驗室工作人員未經(jīng)承諾不得進(jìn)入。02、試劑配制和無菌區(qū)工作制度進(jìn)入該區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。本區(qū)只能進(jìn)行貯存試劑的制備、試劑的分裝和平板的制備。在整個本區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。工作終止后必須趕忙對工作區(qū)進(jìn)行清潔和消毒。非本實驗室工作人員未經(jīng)承諾不得進(jìn)入。無菌室公能用于分裝培養(yǎng)管或倒制平板培養(yǎng)基操作。使用前以紫外燈消毒至少30分鐘，定期用乳酸熏蒸，完全消毒。無菌室僅限操作者進(jìn)入，操作時嚴(yán)格關(guān)門。室內(nèi)備有空調(diào)設(shè)備，以保證不因溫度而阻礙工作。03、試劑配制和無菌區(qū)工作制度進(jìn)入該區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。本區(qū)只能進(jìn)行貯存試劑的制備、試劑的分裝和平板的制備。在整個本區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。工作終止后必須趕忙對工作區(qū)進(jìn)行清潔和消毒。非本實驗室工作人員未經(jīng)承諾不得進(jìn)入。無菌室公能用于分裝培養(yǎng)管或倒制平板培養(yǎng)基操作。使用前以紫外燈消毒至少30分鐘，定期用乳酸熏蒸，完全消毒。無菌室僅限操作者進(jìn)入，操作時嚴(yán)格關(guān)門。室內(nèi)備有空調(diào)設(shè)備，以保證不因溫度而阻礙工作。04、儀器自動分析區(qū)工作制度進(jìn)入本區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。本區(qū)只能進(jìn)行：微生物上機(jī)鑒定與藥敏分析、血培養(yǎng)儀增菌培養(yǎng)、培養(yǎng)基溶解與保溫、相關(guān)實驗記錄與報告書寫、打印；其它操作不得在此區(qū)進(jìn)行。在整個本區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。工作終止后必須趕忙對工作區(qū)進(jìn)行清潔。非本實驗室工作人員未經(jīng)承諾不得進(jìn)入。05、試劑貯存和配制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序.目的：規(guī)定在本區(qū)進(jìn)行的工作，確保試劑正確貯存和制備。.適用范疇：試劑的貯存和制備。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并遵守本室相關(guān)SOP。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。程序：實驗人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用工作服。實驗中須戴手套、工作鞋。實驗室所購試劑體會收登記后，按說明書中的要求貯存。記錄溫濕度計讀數(shù)。記錄冰箱的溫度計讀數(shù)。依照當(dāng)天的標(biāo)本驗收登記表，取出當(dāng)天實驗須配制和使用的試劑放置于即用冰箱，其余試劑要趕忙收好放回貯藏冰箱內(nèi)。不同廠家的試劑勿混用，同廠家的不同檢測項目試劑盒中的相同試劑也不宜混用，除非廠家有專門說明。做好詳細(xì)實驗記錄。實驗完畢，清潔實驗臺面。每周一清點(diǎn)庫存試劑，看有無過期或?qū)⒔狡诘脑噭?，或作報廢處理或排列優(yōu)先使用，幸免白費(fèi)，然后記錄試劑的詳細(xì)儲存情形。.引用的文件及表格：項目SOP：實驗室清潔程序：冰箱溫度記錄表：溫濕度計記錄表：06、標(biāo)本處理區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序.目的：規(guī)定在標(biāo)本制備區(qū)內(nèi)所進(jìn)行的工作及其操作。.適用范疇：所有在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行的工作。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。4、標(biāo)準(zhǔn)操作：實驗人員進(jìn)入該區(qū)須穿本室專用工作服實驗中須使用一次性鞋套戴手手套手套需常更換每四小時換一次。從試劑貯存和預(yù)備區(qū)取出的試劑放入即用冰箱室試劑存放專區(qū)暫存。記錄溫濕度計讀數(shù)。記錄恒溫箱的溫度計讀數(shù)。臨床標(biāo)本的接收、儲存，細(xì)菌手工鑒定或上機(jī)前處理在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。標(biāo)本的接收處理和儲存按臨床標(biāo)本的治理程序進(jìn)行：不同檢測項目的樣本核酸的提取和儲存按相應(yīng)檢測項目的SOP進(jìn)行。標(biāo)本接種或涂片在本區(qū)的標(biāo)本處理臺內(nèi)進(jìn)行，接種后培養(yǎng)基按要求進(jìn)行培養(yǎng)。菌落觀看和處理在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。詳細(xì)做好實驗記錄和儀器使用記錄。保持室內(nèi)空氣流通，且在實驗完畢后，按實驗室清潔消毒程序進(jìn)行清潔、消毒工作。5.引用的文件及表格臨床標(biāo)本的治理程序進(jìn)行：項目SOP：實驗室清潔程序：恒溫箱溫度記錄表：溫濕度計記錄表：07、細(xì)菌自動分析區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序.目的：規(guī)定在本區(qū)進(jìn)行的工作，確保靶核酸擴(kuò)增的準(zhǔn)確性和有效性。.適用范疇：血培養(yǎng)、自動分析和報告簽發(fā)。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.標(biāo)準(zhǔn)操作：實驗人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)工作服。實驗中須戴手套、帽子，手套需常更換。本實驗室采取VITEK32微生物自動分析技術(shù)，因此，微生物自動鑒定和分析和肥達(dá)氏試驗、外菲氏試驗等均在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。鑒定板在標(biāo)本處理區(qū)預(yù)備后帶入該區(qū)，放入充液箱充填，充填菌懸液后加塞，余液連同試管放入消毒桶中消毒，由工人過后洗滌回收試管。每月必須進(jìn)行至少一次所有試卡的質(zhì)控，每新到的批號試劑要進(jìn)行質(zhì)控，過關(guān)方能投入使用。依據(jù)不同檢測項目SOP要求設(shè)定微生物檢驗工作程序，并記錄備案；未經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人承諾，不得隨意更換。檢測報告的簽發(fā)依據(jù)檢測結(jié)果報告程序：做好儀器和實驗記錄。保持室內(nèi)空氣流通，且在實驗完畢后，清潔、消毒工作臺面。.引用的文件：檢測結(jié)果報告程序：項目SOP：實驗室清潔程序：08、紫外消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序.目的：每天實驗后，下班后對工作區(qū)進(jìn)行必要的紫外線消毒一小時，保正實驗室的清潔。.適用范疇：適用于本室各工作區(qū)中按裝于天化板上的紫外線消毒燈。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.操作程序：實驗終止后先對實驗室進(jìn)行必要的清潔工作；依照需要設(shè)定時刻，通常為30分鐘，依照需要適當(dāng)延長時刻。關(guān)閉電源開關(guān)；整個紫外線消毒過程中，相關(guān)工作人員不能離開實驗室，以防火災(zāi)發(fā)生。09、消毒液配制使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序1、目的：配制消毒液，用消毒液擦拭實驗臺面、用具及浸泡實驗廢棄物。2、適用范疇：分子生物實驗室的工作人員。3、職責(zé)：實驗室工作人員應(yīng)及時配制消毒液，熟知并遵守本SOP，嚴(yán)防污染發(fā)生。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。4、工作程序：確定要配制消毒液的量。將36%的次氯酸鈉配制成10%的稀溶液。以1000毫升為例，取278毫升的36%的次氯酸鈉母液，加蒸餾水至1000毫升。消佳凈：20g加水4000ml,作用20-30分鐘。所配制的消毒液只限在當(dāng)天內(nèi)使用，隔夜如使用時應(yīng)依照本SOP重新配制。10、一般冰箱使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序.目的：確保冰箱的正常使用。.適用范疇：本SOP適用于本室各類用途使用的一般冰箱、冰柜。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.操作程序：開、關(guān)機(jī)：試劑冰箱按說明書要求放好后，插上電源線，冷藏室溫度開關(guān)置于4℃，冷凍室溫度開關(guān)置于-20℃，2小時后用溫度計確認(rèn)。系統(tǒng)進(jìn)入正常運(yùn)行狀態(tài)后即可正常使用。關(guān)機(jī)：若冰箱較長時刻不用或需要送修時需按以下步驟操作：（1）關(guān)閉冰箱電源，并拔下電源插頭。（2）清空冰箱內(nèi)的所有貯存物，并妥善放置到其它冰箱內(nèi)。打開冰箱門，等待冰箱內(nèi)的霜化完。（3）用肥皂水擦洗潔凈冰箱內(nèi)膽，后用10%次氯酸鈉液擦洗一次。（4）保持冰箱門打開待其自然干燥。.引用的表格冰箱溫度記錄表：11、超低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程.目的：確保低溫冰箱的正常使用。.適用范疇：本SOP適用于XXX公司的XXX型超低溫冰箱。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.操作程序接通電源，將冰箱的開關(guān)置ON位置，現(xiàn)在溫度顯示屏顯示冰箱的實際溫度，且數(shù)字不停地閃耀。溫度設(shè)定：以調(diào)劑冰箱溫度為-70℃為例說明，按SET鍵，溫度指示顯示-85℃,且“8”閃耀，按“產(chǎn)鍵直至”8”變?yōu)椤?"；按““，鍵，現(xiàn)在溫度指示為“-75℃”，“5”閃耀，按“產(chǎn)鍵直至”5"變?yōu)椤?”，按SET鍵，現(xiàn)在溫度指示“-70℃”，且不閃耀。設(shè)定溫度時應(yīng)注意，一樣應(yīng)以10℃遞減方式進(jìn)行，即每次設(shè)定的溫度低于冰箱實際溫度10℃,待冰箱達(dá)到設(shè)定溫度時再進(jìn)行調(diào)劑，直至達(dá)到所需溫度。如超低溫度遇較長時刻停電，其溫度顯示會不斷閃耀，且報警指示燈(ALARM)也閃耀，現(xiàn)在應(yīng)按上述方法調(diào)劑。由冰箱治理人或其托付人每工作日記錄冰箱溫度，冰箱溫度記錄表貼于冰箱門，每月更換1次，存檔。超低溫冰箱由專人保管，試劑和物品應(yīng)按指定位置存放。超低溫冰箱全室共用，若室外人員需存放試劑或標(biāo)本，須經(jīng)治理人同意。.引用的表格：冰箱溫度記錄表：12、潔凈工作臺使用操作規(guī)程.目的：正確使用潔凈工作臺。.本SOP適用于實驗室使用的所有國產(chǎn)醫(yī)用潔凈工作臺。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP,室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.操作程序：新安裝或長期未使用的工作臺，使用前必須用超凈真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的物品認(rèn)真進(jìn)行清潔工作。接通電源，使用前應(yīng)提早15?30分鐘同時開啟紫外燈和風(fēng)機(jī)組工作。當(dāng)需要調(diào)劑風(fēng)機(jī)風(fēng)速時，用工作臺操作面板上的風(fēng)速調(diào)劑鈕進(jìn)行調(diào)劑。風(fēng)機(jī)、照明均由批示燈指示其工作狀態(tài)，工作時，發(fā)光。工作臺面上禁止存放不必要的物品，以保持工作區(qū)的潔凈氣流不受干擾。禁止在工作臺面上記錄書寫，工作時應(yīng)盡量幸免作明顯擾動氣流的動作；禁止在預(yù)過濾進(jìn)風(fēng)口部位放置物品，以免擋住進(jìn)風(fēng)口造成進(jìn)風(fēng)量減少，降低凈化能力。使用終止后，用消毒液清理工作臺面后打開紫外燈，15?30分鐘后關(guān)閉紫外燈，關(guān)閉潔凈臺電源。長期不使用的工作臺請撥下電源插頭。13、移液器使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序.目的：正確使用移液器，確保移液的精確性。.適用范疇：本實驗室使用的可調(diào)式移液。.職責(zé)：實驗室工作人員必須嚴(yán)格按照本SOP進(jìn)行操作。.操作程序：轉(zhuǎn)動旋鈕設(shè)定移液量，設(shè)定的移液量不可超出該移液器規(guī)定的范疇。裝上配套的Tip。前進(jìn)移液法將按鈕壓至第一停點(diǎn)位置；將移液管管嘴浸入液面下2?3mm深處，然后慢慢松開按鈕吸入液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴撤出液面，擦掉管嘴外側(cè)的所有液滴。輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn)位置，放出液體。約1秒鐘后，連續(xù)將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn)位置。待管嘴液體放潔凈后，將管嘴貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出管嘴。松開按鈕使之回到起點(diǎn)位置。需要時，可更換管嘴連續(xù)移液操作。倒退移液法：適用于高粘度液體及/或易起泡沫液體的移液。將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn)位置。將移液管管嘴浸入試劑瓶液面下2?3mm深處，然后慢慢松開鈕吸入液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴撤出液面，擦掉管嘴外側(cè)的所有液滴。輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn)位置，放出液體。遺留在管嘴時的液體或者隨管嘴一起扔掉，或者放回原先的容器中。重復(fù)操作法：重復(fù)操作移液法能夠快速、簡便地重復(fù)轉(zhuǎn)移同體積的同種液體。將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn)位置。將移液管管嘴浸入液面下2?3mm深處，然后慢慢松開按鈕吸入液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn)位置，放出液體。待放完所需體積液體后，把按鈕停在第一停點(diǎn)位置，不包括在移液量之內(nèi)的少量液體仍留在管嘴內(nèi)，管嘴外的液滴則需包括在移液量之內(nèi)。將管嘴浸入試劑液面下不遠(yuǎn)處，然后慢慢松開按鈕使管嘴重新吸入液體。重復(fù)步序4.5.3和4.5.4連續(xù)移液操作，就可重復(fù)轉(zhuǎn)移相同體積液體。14、離心機(jī)操作標(biāo)準(zhǔn)操作程序.目的：使每個工作人員能正確地使用本儀器。.范疇：本SOP僅適用于各類一般離心機(jī)。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.操作：開機(jī)：接通電源，打開儀器電源開關(guān)，離心機(jī)自檢。按“0口?口”鍵，打開機(jī)蓋，旋開轉(zhuǎn)子蓋，平穩(wěn)放入離心管，旋緊轉(zhuǎn)子蓋，關(guān)上機(jī)蓋，現(xiàn)在“Open”鍵的指標(biāo)燈亮。（假如接通電源后，機(jī)蓋為開的狀態(tài)，則無需此步操作）。離心條件的設(shè)定：通過按“100口”、“5口00曠、“1加6”鍵的上下箭頭分別設(shè)定離心的溫度、速度和時刻。其中離心速度可分為每分鐘轉(zhuǎn)速（rpm）和離心力（?！?）兩種，可通過同時按下“5口0?d'鍵的上下鍵頭相互轉(zhuǎn)換。運(yùn)行：離心條件設(shè)定好后，按“5士2^/58口”鍵，離心機(jī)啟動，“Open”鍵的指標(biāo)燈滅。當(dāng)達(dá)到設(shè)定的時刻后，離心機(jī)自動停止，并發(fā)出提示音，“Open”鍵的指標(biāo)燈亮，按“。口?口”鍵，打開機(jī)蓋，旋開轉(zhuǎn)子蓋，取出離心管。*若進(jìn)行樣本的短暫離心，只需按"八。式”鍵數(shù)秒即可。*若需在離心過程中停止離心，則需再按一次"Start/Stop”鍵。關(guān)機(jī)：離心完畢后，應(yīng)及時用干的軟布拭去離心室的冷凝水，關(guān)閉離心機(jī)電源，并記錄離記機(jī)使用情形。15、冰箱愛護(hù)和保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序.目的：對冰箱進(jìn)行適當(dāng)?shù)膼圩o(hù)，以確保冰箱的正常使用。.適用冰箱范疇：本實驗室使用的各種品牌、型號的冰箱。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP,室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.操作方法冰箱應(yīng)放置于水平地面并留有一定的散熱空間。外接電源電壓必須匹配，并要求有良好的接地線。冰箱內(nèi)禁止存放與本實驗室無關(guān)的物品。放入冰箱內(nèi)的所有試劑、樣品、質(zhì)控品等必須密封儲存。保持冰箱出水口通暢；非自動除霜冰箱應(yīng)定期除霜；定期清潔冰箱，清潔時切斷電源，用軟布蘸水擦拭冰箱內(nèi)外，必要時可用中性洗滌劑。每日由專人負(fù)責(zé)觀看冰箱內(nèi)溫度并記錄于表中，記錄表貼于門上，每月一張，一年裝訂成冊存檔。若溫度超出規(guī)定范疇，調(diào)劑溫控使其回到正常范疇，并進(jìn)行記錄。若溫控調(diào)劑無效，報請設(shè)備科修理，修理后須驗收合格并簽字后方能正常使用。.引用的表格冰箱溫度記錄表：16、電熱恒溫水浴箱操作程序.目的：保證水浴箱工作溫度恒定。.該SOP變動程序：本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人。.適用水浴箱范疇：電熱恒溫水浴箱.標(biāo)準(zhǔn)操作：水浴箱應(yīng)置于牢固的水平臺上，電源電壓須匹配。在水浴箱內(nèi)注入清潔溫水至總高度1/2?1/3處。打開電源開關(guān)，把溫度操縱器的溫度調(diào)劑旋鈕至設(shè)定溫度。當(dāng)水槽內(nèi)測定溫度達(dá)到設(shè)定溫度時，加熱中斷、指示燈熄滅，溫度保持穩(wěn)固。在每次水浴箱使用前，放入標(biāo)準(zhǔn)溫度計同時監(jiān)測實際水溫，以校正溫度。水浴箱工作溫度波動范疇是：預(yù)設(shè)+2℃范疇。每天應(yīng)使用水銀溫度計水浴箱應(yīng)記錄每天溫度；如溫度超出正常范疇，該溫度應(yīng)劃上紅圈，并把修正操作記錄下來。水浴箱內(nèi)外應(yīng)保持清潔，外殼忌用腐蝕性溶液擦拭。儀器不用時，需套好防塵罩，以免溫度操縱器受潮阻礙使用。17、潔凈工作臺愛護(hù)和保養(yǎng)程序.目的：對潔凈工作臺進(jìn)行適當(dāng)愛護(hù)，以保證凈化能力。.適用范疇：本SOP適用于實驗室使用的醫(yī)用潔凈工作臺（BC1300型）。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP,室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.程序：依照環(huán)境潔凈程度，定期將預(yù)過濾器中的濾料拆下清洗，一樣間隔時刻為3~6個月。每次使用潔凈臺后，均需對潔凈臺進(jìn)行清潔。定期（一樣每半年1次）計測工作區(qū)風(fēng)速，如發(fā)覺不符合技術(shù)參數(shù)要求，則可調(diào)大風(fēng)機(jī)供電電壓。當(dāng)風(fēng)機(jī)組電壓調(diào)到最大時，工作區(qū)風(fēng)速仍達(dá)不到0.3m/s,則必須更換高效空氣過濾器。（由廠家或院儀器修理人員進(jìn)行）做好愛護(hù)記錄。.引用的表格：儀器設(shè)備愛護(hù)保養(yǎng)記錄表：18、可移動紫外消毒車使用操作程序.目的：正確使用紫外消毒車進(jìn)行消毒。.適用范疇：適用于本室使用的ZXC型紫外線消毒車（上海躍進(jìn)醫(yī)用光學(xué)器械廠生廠）。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP,室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.操作程序：打開愛護(hù)門；用手托住燈臂往上抬至需要位置；插上電源，打開帶燈開關(guān)；依照需要設(shè)定時刻；使用完畢將按鈕摁到底，同時另一手托住燈臂慢慢將燈管放進(jìn)燈箱內(nèi)關(guān)上愛護(hù)門。不同實驗區(qū)的紫外線消毒車勿混用。.引用的表格消毒記錄表：19、加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序.目的：保證加樣器加樣的準(zhǔn)確性。.加樣器范疇：各種品牌、型號的固定、可調(diào)和多通道加樣器。.職責(zé)：本SOP由室負(fù)責(zé)人執(zhí)行落實。.校準(zhǔn)程序校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求：室溫：20?25℃,測定中波動范疇不大于±0.5℃。電子天平：放置于無塵和震動阻礙的臺面上，房間盡可能有空調(diào)。稱量時為保證天平內(nèi)的濕度（相對濕度60?90%）,天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯。小燒杯：5?10ml體積。測定液體：溫度為20?25℃的去氣雙蒸水。選擇校準(zhǔn)體積：⑴擬校準(zhǔn)體積；⑵加樣器標(biāo)定體積的中間體積；⑶最小可調(diào)體積（不小于擬校準(zhǔn)體積的1%）。（4）如為固定體積加樣器，則只有一種校準(zhǔn)體積。校準(zhǔn)步驟：將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積，選擇合適的吸頭；調(diào)劑好天平；來回吸吹蒸餾水3次，以使吸頭潮濕，用紗布拭干吸頭；垂直握住加樣器，將吸頭浸入液面2?3mm處，緩慢（1?3秒）一致的吸取蒸餾水；將吸頭離開液面，靠在管壁，去掉吸頭外部的液體；將加樣器以30℃角放入稱量燒杯中，緩慢一致地將加樣器壓至第一檔，等待1?3秒，再壓致第二檔，使吸頭里的液體完全排出；記錄稱量值；擦干吸頭別處；按上述步驟稱量10次；取10次稱量值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量，按附表I所列蒸餾水Z因子運(yùn)算體積：體積二重量/Z因子按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)劑加樣器.新購的合格的移液器出廠前通過廠家校準(zhǔn)，使用前無需校準(zhǔn)。每年移液器進(jìn)行校準(zhǔn)一次，自校或由廠家有關(guān)部門校準(zhǔn)。做好校準(zhǔn)記錄。.引用的表格儀器設(shè)備校準(zhǔn)記錄表：20、離心機(jī)愛護(hù)保養(yǎng)操作程序.目的：對離心機(jī)進(jìn)行正確的愛護(hù)，以保證儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)。.適用范疇：本SOP僅適用于本室使用的離心機(jī)。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.操作程序：離心室的清潔：為了幸免樣本等殘留物的污染，應(yīng)經(jīng)常對離心機(jī)外殼和離心室進(jìn)行清潔處理。對離心室清潔，應(yīng)先打開離心機(jī)蓋，撥掉電源線，用專用設(shè)備將離心機(jī)轉(zhuǎn)子旋下，再用中性去污劑（70%的異丙醇/水混合物或乙醇去污染）清潔離心室；離心室內(nèi)的橡膠密封圈經(jīng)去污劑處理后，用水沖洗，再用甘油潤滑。轉(zhuǎn)子的清潔：轉(zhuǎn)子會被樣本殘留物污染，也可能會被某些化學(xué)試劑腐蝕，因此應(yīng)對轉(zhuǎn)子每月進(jìn)行清潔愛護(hù)。每月用中性的清潔劑清潔轉(zhuǎn)子一次，并在儀器使用記錄本上作好記錄，以延長轉(zhuǎn)子的壽命。離心完畢后，應(yīng)及時用干的軟布拭去離心室的冷凝水。（此步僅適用于冷凍離心機(jī)）離心終止后，使離心機(jī)蓋打開，然后關(guān)機(jī)。21、溫度計校準(zhǔn)程序.目的：保證溫度計的精確性。.適用范疇：適用于本實驗室所使用的溫度計。.職責(zé)：本SOP由室負(fù)責(zé)人落實。.程序—由設(shè)備科人員送質(zhì)檢局對溫度計進(jìn)行校準(zhǔn)。每年進(jìn)行1次。經(jīng)校準(zhǔn)過的溫度計可作為微量恒溫器溫度校溫的參照。.引用表格：儀器設(shè)備校準(zhǔn)記錄：22、臨床非培養(yǎng)標(biāo)本的采集及處理操作程序.目的：規(guī)范臨床待檢標(biāo)本的正確采集、送檢和處理。.適用范疇：微生物檢驗實驗室的所有臨床檢測標(biāo)本。.職責(zé)：所有采集標(biāo)本的人員均需按本SOP操作，實驗室工作人員有責(zé)任向臨床大夫、護(hù)士或病人宣教。本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.操作程序本實驗室檢測標(biāo)本為：血清或血漿、痰、生殖道拭子標(biāo)本、尿液及腦脊液和胸腹水。做好標(biāo)本簽收，核對檢驗單與標(biāo)本標(biāo)簽是否清晰無誤，送檢標(biāo)本是否正確、合格，給所有標(biāo)本按順序編號，按如下操作規(guī)程操作。查找抗酸菌操作:將標(biāo)本置于水浴蒸箱加溫殺菌30分鐘，取標(biāo)本殘留物或沉淀物加溫涂布玻片，液性標(biāo)本以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，取標(biāo)本殘留物或沉淀物加溫涂布玻片并標(biāo)注編號后固定，行抗酸染色，先滴加抗酸染色第一液加溫（用酒精燈在玻片下來回加溫置染色液冒熱氣，但無氣泡產(chǎn)生為宜）染色10分鐘，自來水沖洗凈染液，以硫酸美蘭復(fù)染2分鐘，水洗涼干。鏡檢與報告：油鏡下查找分枝、不規(guī)則紅色桿菌，按如下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果報告。1）、鏡檢100-300個視野（時刻許多于4分鐘）未發(fā)覺抗酸菌，連續(xù)觀看至300個視野仍未發(fā)覺抗酸菌者報告抗酸菌（一）；2）、鏡檢100個視野找到抗酸菌1-2條者，報告抗酸菌可疑（土），或重涂片或重送標(biāo)本檢查；3）、鏡檢100個視野找到抗酸菌3-9條者，報告抗酸桿菌陽性（+）；4）、鏡檢10個視野找到抗酸菌1-9條者，報告抗酸桿菌陽性（2+）；5）、鏡檢每個視野找到抗酸菌1-9條者，報告抗酸桿菌陽性（3+）；6）、鏡檢每個視野找到抗酸菌多于9條者，報告抗酸桿菌陽性（4+）。查找一般細(xì)菌操作：液性標(biāo)本取離心沉淀物涂片，拭子或膿性標(biāo)本直截了當(dāng)涂布玻片并標(biāo)注編號后固定。同時取大腸標(biāo)準(zhǔn)株（ATCC25922）和金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)株（ATCC25922）涂片，一起行革蘭氏染色，先滴加第一液染色1分鐘，水洗，加第二液媒染1分鐘，水洗潔凈；以95%酒精脫色30秒鐘后趕忙水洗，再加第四液復(fù)染30秒鐘，水洗后涼干。油鏡下查找菌體并觀看球桿比例；觀看質(zhì)控菌是否合格。墨汁染色查找隱球菌：液性標(biāo)本離心取沉淀物涂片，膿性或拭子標(biāo)本直截了當(dāng)涂片并寫號，以無菌接種環(huán)粘取少量印度墨汁與玻片上標(biāo)本混勻，壓蓋玻片，先低倍鏡下找到視野再轉(zhuǎn)離倍鏡觀看。若找到透亮，圓形強(qiáng)折光，有厚莢膜的菌體報告墨汁染色陽性；否則報告陰性。白帶常規(guī)檢查：鹽水管直截了當(dāng)將棉簽點(diǎn)至玻片后以高倍鏡檢有無滴蟲；涂片標(biāo)注編號后固定，行革蘭氏染色，先滴加第一液染色1分鐘，水洗，加第二液媒染1分鐘，水洗潔凈；以95%酒精脫色30秒鐘后趕忙水洗，再加第四液復(fù)染30秒鐘，水洗涼干后鏡檢查找革蘭氏陰性雙球菌、霉菌或陽性球菌、線索細(xì)胞等。陰道清潔度的按如下判定標(biāo)準(zhǔn)報告：I度：陰道桿菌為主，并可見大量上皮細(xì)胞。II度：有部份陰道桿菌，但亦有部份膿細(xì)胞和雜菌，上皮細(xì)胞少見。III度：僅見少量陰道桿菌和上皮細(xì)胞，有大量膿細(xì)胞和雜菌。W度：鏡下無陰道桿菌，除少量上皮細(xì)胞外，要緊的幾乎全是膿細(xì)胞和大量雜菌。4.7肥達(dá)試驗：標(biāo)本標(biāo)明編號，以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘；取試管架，按每標(biāo)本排5排試管，每排5支;各標(biāo)本用加樣器取100H1血清置于一支稀釋用試管（注明檢驗號）中，加入1.9ml0.9%生理鹽水混勻，第一排加入1：20倍稀釋血清各0.2ml,成1：40倍；后稀釋管再加入1.0ml0.9%生理鹽水，成1：40倍稀釋，加入第二排試管各0.2ml。同樣方法對倍稀釋至第四排試管，第五排各加入0.21^0.9%生理鹽水作陰性對比。從冰箱中拿出肥達(dá)反應(yīng)試驗稀釋菌懸液，第一列各加入H診斷菌液0.2ml,第二列各加入O診斷菌液0.2m1,第三列各加入甲型診斷菌液0.2ml,第四列各加入乙型診斷菌液0.2ml,第五列各加入丙型診斷菌液0.2ml,混勻，置37℃水浴箱18-24小時。結(jié)果判定：菌體沉淀至試管底成圓點(diǎn)為陰性管，顯現(xiàn)散在顆粒狀凝集為陽性管。以最高稀釋管顯現(xiàn)散在顆粒狀凝集為報告滴度。若陰性對比顯現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗。外菲氏試驗：標(biāo)本標(biāo)明編號，以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘；取試管架，按每標(biāo)本排3排試管，每排5支；各標(biāo)本用加樣器取100口1血清置于一支稀釋用試管（注明檢驗號）中，加入1.9ml0.9%生理鹽水混勻，第一排加入1：20倍稀釋血清各0.2ml,成1：40倍；稀釋管留1.0ml再加入1.0ml0.9%生理鹽水，成1：40倍稀釋，加入第二排試管各0.2ml。同樣方法對倍稀釋至第四排試管，第五排各加入0.2ml0.9%生理鹽水作陰性對比。從冰箱中拿出外菲氏反應(yīng)試驗稀釋菌懸液，第一列各加入OX19診斷菌液0.2ml,第二列各加入OX2診斷菌液0.2ml,第三列各加入OXK診斷菌液0.2ml,混勻，置37℃水浴箱18-24小時。結(jié)果判定：菌體沉淀至試管底成圓點(diǎn)為陰性管，顯現(xiàn)散在顆粒狀凝集為陽性管。以最高稀釋管顯現(xiàn)散在顆粒狀凝集為報告滴度。若陰性對比顯現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗。.引用表格：拒收標(biāo)本記錄表：23、臨床標(biāo)本的儲存程序.目的：臨床標(biāo)本正確儲存，以便必要是復(fù)查。.適用范疇：微生物檢驗實驗室的所有臨床檢測標(biāo)本。.職責(zé)：實驗室工作人員必須熟知并遵守本SOP,室負(fù)責(zé)人監(jiān)督治理。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.程序：未檢測的標(biāo)本經(jīng)預(yù)處理后及時置-20℃儲存。標(biāo)本當(dāng)天檢測可置4℃儲存，如當(dāng)天不檢測應(yīng)置-20℃儲存。報告發(fā)出后丟棄。原始樣本在報告發(fā)出前均需置4℃儲存，不得丟棄。報告發(fā)出后儲存2天，以備查。儲存2天后標(biāo)本由室負(fù)責(zé)人酌情處理。24、實驗室崗位職責(zé)運(yùn)行程序（暫行）.目的：確保日常工作的順利進(jìn)行。.適用范疇：本實驗室工作人員。.職責(zé)：實驗室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。.為更好的使日常工作有序進(jìn)行，盡可能以負(fù)責(zé)的態(tài)度，連續(xù)地完成每一個檢驗的發(fā)報，保證結(jié)果的可靠性，每日盡可能安排兩個工作人員上班，分為兩個崗位，各自的工作崗位職責(zé)如下。1崗位班、2崗位班采納輪轉(zhuǎn)制。如遇有當(dāng)班同事休息或值班，第3人就頂上其所上的班。4.1崗位1班（負(fù)責(zé)樣本接收、核對、接種以及上日進(jìn)行的鑒定和藥敏結(jié)果進(jìn)行分析、發(fā)報等工作）。上班后檢查細(xì)菌自動分析儀、血液自動培養(yǎng)儀工作是否正常，并做好記錄。從冰箱內(nèi)取出當(dāng)天所需的各種平板：5%綿羊血平皿、中國藍(lán)培養(yǎng)皿、淋病奈瑟菌培養(yǎng)皿、麥康凱平皿等。負(fù)責(zé)對上日進(jìn)行的鑒定和藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。負(fù)責(zé)報告單的打印、核對、登記與錄入等工作，簽發(fā)已核對的所有報告。做好菌種的儲存，對一些難得的菌株、標(biāo)準(zhǔn)菌株等要注意儲存，并做好記錄。接收樣本：核對各樣本與化驗單名是否一致，核查各送檢樣本是否符合要求，否則趕忙與病房聯(lián)系以便作出相應(yīng)的處理，如退單或重送樣本等，并做好聯(lián)系情形的記錄。樣本編號：對合格的樣本作出編號。一般培養(yǎng)樣本的接種選擇：①痰液、咽拭子分別接種：血平皿、麥康凱平皿；②尿液接種：取100Hl接種血平皿、麥康凱平皿；③泌尿生殖道：血平板、麥康凱平板；④大便：SS或中國蘭、血平板；⑤各種無菌體液、腦脊液、膿液等標(biāo)本：血平皿、麥康凱平皿，用增菌肉湯增菌；⑥衣原體、支原體培養(yǎng)+藥敏，按說明書接種支原體專用培養(yǎng)基；⑦真菌培養(yǎng)，各種標(biāo)本均接種沙保弱平皿和真菌斜面培養(yǎng)基；⑧所有標(biāo)本在接種的同時應(yīng)進(jìn)行涂片或?qū)ζ涑猎M(jìn)行革蘭或抗酸染色，并做相應(yīng)的記錄。⑨規(guī)定：臨床申請單未明確注明培養(yǎng)目的時，一律按一般培養(yǎng)進(jìn)行處理。標(biāo)本送到實驗室后專門培養(yǎng)標(biāo)本需在1小時內(nèi)接種，一般培養(yǎng)標(biāo)本不得超過2小時。4.1.9培養(yǎng)：一樣標(biāo)本接種后，平板應(yīng)置于35OC培養(yǎng)箱培養(yǎng)，接種過腦脊液標(biāo)本、泌尿生殖道標(biāo)本的血平板還應(yīng)置于5%-10%C02環(huán)境中；結(jié)核培養(yǎng)置于37OC培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每星期檢查兩次有否可疑菌落生長。收到的一般血培養(yǎng)瓶（如AER）應(yīng)進(jìn)行瓶內(nèi)氣壓平穩(wěn)處理，厭氧培養(yǎng)瓶直截了當(dāng)放入培養(yǎng)箱中。對新到崗的實習(xí)或進(jìn)修人員應(yīng)認(rèn)真交代本崗位的一切事宜同時認(rèn)真作好帶教工作。厭氧培養(yǎng)應(yīng)接種血平皿或厭氧平皿置于厭氧袋中培養(yǎng)，同時接種BMP進(jìn)行一般培養(yǎng)。標(biāo)本培養(yǎng)處理后關(guān)心2班將需要的各種標(biāo)本收集并滅菌處理。負(fù)責(zé)配制培養(yǎng)基，并做好記錄。2班（負(fù)責(zé)菌株鑒定與藥敏的分析、涂片檢查標(biāo)本的報告、室內(nèi)質(zhì)控等）。5.1.1上班后第一核查各個培養(yǎng)箱、冰箱的工作溫度是否在設(shè)定的范疇內(nèi)，并做好記錄；檢查各種培養(yǎng)基及試劑的庫存量，做好需配制的培養(yǎng)基或需領(lǐng)出的試劑的記錄工作，對需購買的試劑、平板、培養(yǎng)基、染色液等應(yīng)及時記錄并告訴室組長，以便及時打算報主任批準(zhǔn)。做好室內(nèi)常用實驗試劑如觸酶、凝固酶、氧化酶或蛋白胨水的質(zhì)量操縱，并做好記錄。負(fù)責(zé)處理上日接種標(biāo)本的菌種鑒定與藥敏試驗，觀看血液增菌培養(yǎng)瓶，如發(fā)覺有細(xì)菌生長，應(yīng)按三級報告制度處理。觀看培養(yǎng)平板，分析、挑取可疑菌落涂片革蘭染色，能上機(jī)的做好觸酶、凝固酶、氧化酶或接種蛋白胨水等相應(yīng)的檢查后上機(jī)，還不能上機(jī)或手工試驗的則選用相應(yīng)的平板分純。用于鑒定或藥敏試驗的菌落應(yīng)選取培養(yǎng)18-24小時的純菌落進(jìn)行試驗。對一些不適合用儀器檢測的細(xì)菌，改用手工簽定或用標(biāo)準(zhǔn)的K-B法進(jìn)行藥敏。碰到專門的耐藥模式，如碰到耐萬古霉素的葡萄球菌、糞腸球菌，耐泰能的大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬等報告時一定要慎重。遇到可疑多重耐藥菌株時，加做專門的藥敏紙片關(guān)心鑒定。負(fù)責(zé)控感標(biāo)本的處理與報告，物體表面菌落計數(shù)標(biāo)本應(yīng)于收到標(biāo)本后2小時內(nèi)處理，消毒液標(biāo)本應(yīng)于4小時內(nèi)處理。處理方法按控感監(jiān)控標(biāo)本處理與報告進(jìn)行。涂片染色：①抗酸染色嚴(yán)格按照操作規(guī)程，胸腹水、尿液、腦脊液等標(biāo)本應(yīng)在5000轉(zhuǎn)/分高速離心10分鐘后，取沉淀涂厚片，自然干燥后固定，按要求染色后鏡檢。②G-雙球菌涂片，應(yīng)用滾動式涂片法從波片一端涂向另一端，反復(fù)幾次，火焰固定后進(jìn)行革蘭氏染色。③腦脊液隱球菌涂片，應(yīng)快速離心后倒去上清液，沉淀涂片、加相應(yīng)的優(yōu)質(zhì)墨汁混勻后鏡檢。對新到崗的實習(xí)或進(jìn)修人員應(yīng)認(rèn)真交代本崗位的一切事宜同時認(rèn)真作好帶教工作。6.注：崗位職責(zé)分開是相對的，同事間需要互相協(xié)作，互相關(guān)心，共同完成當(dāng)天的工作。如遇到三個人上班，則其中一個做好室內(nèi)日常記錄的檢查完善和操縱感染標(biāo)本的處理工作。如遇一個人上班，則擔(dān)負(fù)1崗位班、2崗位班的所有工作。25、一般培養(yǎng)陰性操作程序1、認(rèn)真查對標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗單查對正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗，否則查找緣故并在有關(guān)記錄本上記錄。2、標(biāo)本處理、檢驗與結(jié)果報告：1）拭子、分泌物標(biāo)本標(biāo)本涂于一般血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時觀看各平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出一般致病細(xì)菌。2）尿液標(biāo)本取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于一般血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱也關(guān)培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時觀看各平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出一般致病細(xì)菌。3）引流液標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于一般血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時觀看各平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出一般致病細(xì)菌。4）痰液或咽拭子標(biāo)本無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于一般血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時觀看各平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出一般致病細(xì)菌。5）糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本以無菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于一般血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時觀看各平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出一般致病細(xì)菌。6）留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本標(biāo)本置無菌管中，加入增菌液2ml,35℃溫箱培養(yǎng)48小時觀看培養(yǎng)液有無混濁，采樣涂于一般血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時觀看各平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出一般致病細(xì)菌。26、真菌培養(yǎng)陰性操作程序1、認(rèn)真查對標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗單查對正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗，否則查找緣故并在有關(guān)記錄本上記錄。2、標(biāo)本處理、檢驗與結(jié)果報告：1）拭子、分泌物標(biāo)本標(biāo)本涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀看平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。2）尿液標(biāo)本取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀看平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。3）引流液標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀看平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。4）痰液或咽拭子標(biāo)本無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀看平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。5）糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本以無菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀看平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。6）留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本標(biāo)本置無菌管中，加入增菌液2ml,35℃溫箱培養(yǎng)48小時觀看培養(yǎng)液有無混濁，采樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀看平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。27、苛養(yǎng)菌培養(yǎng)陰性操作程序1、認(rèn)真查對標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗單查對正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗，否則查找緣故并在有關(guān)記錄本上記錄。2、標(biāo)本處理、檢驗與結(jié)果報告：1）拭子、分泌物標(biāo)本標(biāo)本涂于一般血瓊脂平板、巧克力（含V、X因子）平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀看各平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。2）尿液標(biāo)本取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于一般血平板、巧克力（含V、X因子）平板成原始線，再畫線分離后置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀看各平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。3）引流液標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣畫線分離接種一般血平板、巧克力（含V、X因子）平板，置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀看各平板上有否顯現(xiàn)可疑菌落，若連續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出奈瑟