蛋白質(zhì)的性質(zhì)實驗

蛋白質(zhì)的性質(zhì)實驗第一頁，共十三頁，2022年，8月28日一、實驗目的1、了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)。2、學習測定蛋白質(zhì)等電點的一種方法。3、加深對蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定因素的認識。4、了解沉淀蛋白質(zhì)的幾種方法及其實用意義。5、了解蛋白質(zhì)變性與沉淀的關系。第二頁，共十三頁，2022年，8月28日二、實驗原理蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)蛋白質(zhì)等電點的概念

測蛋白質(zhì)溶解度最低時的溶液pH值為其等電點穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水膠體顆粒的因素蛋白質(zhì)沉淀反應的類型第三頁，共十三頁，2022年，8月28日蛋白質(zhì)是由AA組成的高分子化合物，具有許多游離的氨基、羧基、咪唑基、胍基、巰基、酚基等，因此與AA一樣，能象酸一樣解離，也能象堿一樣解離，也是兩性電解質(zhì)。蛋白質(zhì)的兩性電離性質(zhì)第四頁，共十三頁，2022年，8月28日蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)第五頁，共十三頁，2022年，8月28日當溶液在某一pH值時，蛋白質(zhì)所帶正、負電荷相等，即總凈電荷為零，此時溶液的pH稱該蛋白質(zhì)的等電點(isoelectricpoint)。蛋白質(zhì)的等電點第六頁，共十三頁，2022年，8月28日第七頁，共十三頁，2022年，8月28日穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水膠體顆粒的因素

第八頁，共十三頁，2022年，8月28日蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)的性質(zhì)與它們的結(jié)構(gòu)密切相關。某些物理或化學因素，能夠破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)狀態(tài)，引起蛋白質(zhì)理化性質(zhì)改變并導致其生理活性喪失。這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性(denaturation)。第九頁，共十三頁，2022年，8月28日蛋白質(zhì)的變性變性蛋白質(zhì)通常都是固體狀態(tài)物質(zhì)，不溶于水和其它溶劑，也不可能恢復原有蛋白質(zhì)所具有的性質(zhì)。所以，蛋白質(zhì)的變性通常都伴隨著不可逆沉淀。引起變性的主要因素是熱、紫外光、激烈的攪拌以及強酸和強堿等。第十頁，共十三頁，2022年，8月28日三、實驗操作

具體參見實驗指導書

蛋白質(zhì)的鹽析重金屬離子沉淀蛋白質(zhì)某些有機酸沉淀蛋白質(zhì)有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)乙醇引起的變性與沉淀第十一頁，共十三頁，2022年，8月28日四、結(jié)果處理用－、+、++、+++等符號表示各管的混濁度。根據(jù)混濁度判斷酪蛋白的等電點。最混濁的一管的pH值即為酪蛋白的等電點。五、注意事項緩沖液的pH值必須準確。第十二頁，共十三頁，2022年，8月28日六、思考題1、穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水膠體顆粒的因素有哪些？2、蛋白質(zhì)變性與沉淀的關系。3、解釋蛋白質(zhì)兩性反應中