食品衛(wèi)生微生物學檢驗金黃色葡萄球菌檢驗

食品衛(wèi)生微生物學檢驗

金黃色葡萄球菌檢驗金黃色葡萄球菌的生物學特性金黃色葡萄球菌的抗原構(gòu)造及分型簡介金黃色葡萄球菌的致病性金黃色葡萄球菌的流行病學金黃色葡萄球菌的檢驗方法金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測金黃色葡萄球菌的快速檢測方法金黃色葡萄球菌污染的控制一、金黃色葡萄球菌的生物學特性1、形態(tài)與染色：(staphylococcusaureus)

金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛，大多數(shù)無莢膜。典型的金黃色葡萄球菌為球型，直徑0.8

mm左右，顯微鏡下排列成葡萄串狀。革蘭氏染色陽性。

附：金黃色葡萄球菌的顯微照片

金黃色葡萄球菌的染色照片

金黃色葡萄球菌的掃描電鏡照片

金黃色葡萄球菌的透射電鏡照片

金黃色葡萄球菌革蘭氏染色顯微照片

金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛，大多數(shù)無莢膜。革蘭氏染色陽性。

金黃色葡萄球菌的掃描電鏡照片StaphylococcusaureusEnhancedsemw:7.9micron

金黃色葡萄球菌的透射電鏡照片Temx12000digitizedStaphylococcusaureus

3、生化特性：可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。甲基紅反應陽性，VP反應弱陽性。許多菌株可分解精氨酸，水解尿素，還原硝酸鹽，液化明膠。金黃色葡萄球菌具有較強的抵抗力，對磺胺類藥物敏感性低，但對青霉素、紅霉素等高度敏感。金黃色葡萄球菌的抗原構(gòu)造和分型

對分型進行簡單的了解。１、血清學分型：金黃色葡萄球菌水解，獲得兩種抗原成分：蛋白抗原和多糖抗原。蛋白抗原主要為葡萄球菌A蛋白（SPA)，是一種表面抗原，90%以上金黃色葡萄球菌有此抗原，無特異性。多糖抗原為半抗原，有型特異性。２、噬菌體分型。３、根據(jù)腸毒素分型。４、根據(jù)血漿凝固酶分型。

＊＊＊當金黃色葡萄球菌污染了含淀粉及水分較多的食品，如牛奶和乳制品、肉、蛋等，在溫度條件適宜時，經(jīng)過8～10小時即可產(chǎn)生相當數(shù)量的腸毒素，腸毒素可耐受100℃煮沸30分鐘而不被破壞。人攝食該菌污染的食物2～3小時后可引起中毒癥狀，它引起的食物中毒癥狀是嘔吐和腹瀉。此外，金黃色葡萄球菌還產(chǎn)生溶表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。金黃色葡萄球菌的流行病學金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在，空氣、水、灰塵及人和動物的排泄物中都可找到。作為人和動物的常見病原菌，其主要存在于人和動物的鼻腔、咽喉、頭發(fā)上，50%以上健康人的皮膚上都有金黃色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的機會很多。金黃色葡萄球菌的流行病學近年來，美國疾病控制中心報告，由金黃色葡萄球菌引起的感染占第二位，僅次于大腸桿菌。金黃色葡萄球菌的流行病學一般說，金黃色葡萄球菌可通過以下途徑污染食品：食品加工人員、炊事員或銷售人員帶菌，造成食品污染；食品在加工前本身帶菌，或在加工過程中受到了污染，產(chǎn)生了腸毒素，引起食物中毒；熟食制品包裝不嚴，運輸過程受到污染；奶?；蓟撔匀橄傺谆蚯菪缶植炕摃r，對肉體其他部位的污染。

*金黃色葡萄球菌腸毒素是個世界性衛(wèi)生問題，在美國由金黃色葡萄球菌腸毒素引起的食物中毒占整個細菌性食物中毒的33%，加拿大則更多，占45%，我國每年發(fā)生的此類中毒事件也非常多。腸毒素形成條件：存放溫度，在37℃內(nèi)，溫度越高，產(chǎn)毒時間越短；存放地點，通風不良氧分壓低易形成腸毒素；食物種類，含蛋白質(zhì)豐富，水分多，同時含一定量淀粉的食物，腸毒素易生成。金黃色葡萄球菌的檢驗1、樣品制備按無菌操作取檢樣25g（mL），加入225mL滅菌生理鹽水，固體樣品研磨或置均質(zhì)器中制成1:10樣品混懸液。

供計數(shù)檢驗時，可按十進位遞增稀釋法將樣品勻液再進行適當稀釋。血平板上金黃色葡萄球菌菌落形態(tài)

金黃色葡萄球球菌的單個菌落在血平板上呈金黃色，有時也為白色，大而突出、圓形、不透明、表面光滑，周圍有溶血圈。

金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落形態(tài)

在Baird-Parker瓊脂平板上菌落呈圓形，表面光滑、凸起、濕潤，直徑2～3mm?；液谏梁谏?，有光澤，常有淺色（非白色）的邊緣，周圍繞以不透明圈（沉淀），其外常有一清晰帶。當用接種針觸及菌落時具有黃油樣粘稠感。有時可見到不分解脂肪的菌株，除沒有不透明圈和清晰帶外，其他外觀基本相同。從長期貯存的冷凍或脫水食品中分離的菌落，其黑色常較典型菌落淺些，且外觀可能較粗糙，質(zhì)地較干燥。金黃色葡萄球菌在甘露醇鹽平板上的菌落

Staphylococcusaureusonmannitolsaltsagar

3、血漿凝固酶試驗：

吸取1:4新鮮兔血漿0.5mL，放入小試管中，再加入培養(yǎng)24h的金黃色葡萄球菌肉浸液肉湯培養(yǎng)物0.5mL，振蕩搖勻，置36±1℃溫箱或水浴內(nèi)，每半小時觀察一次，觀察6h，如呈現(xiàn)凝固,即將試管倒置或傾斜時，呈現(xiàn)凝塊者，被認為陽性結(jié)果。同時以已知陽性和陰性葡萄球菌株及肉湯作為對照。金黃色葡萄球菌快速檢測方法目前，隨著研究的深入，一些快速和采用現(xiàn)代技術(shù)的檢測方法不斷出現(xiàn)，這些新的快速方法，一般都縮短了傳統(tǒng)檢測方法的時間，能夠較快地得到檢測結(jié)果，并且操作相對簡單。比如：法國梅里埃公司生產(chǎn)的RPF培養(yǎng)基、API檢測系統(tǒng)等。梅里埃公司生產(chǎn)的miniVIDAS利用熒光免疫的方法檢測葡萄球菌腸毒素，在儀器上45min可以得到結(jié)果。法國梅里埃公司生產(chǎn)的RPF培養(yǎng)基凝固酶陽性葡萄球菌:菌落周圍形成沉淀圈(例)金黃色葡萄球菌

-+將兔血漿包括在培養(yǎng)基中作為直接確認菌落的手段金黃色葡萄球菌污染的控制防止食品污染防止帶菌人群對各種食物的污染：定期對生產(chǎn)加工人員進行健康檢查，患局部化膿性感染（如疥瘡、手指化膿等）、上呼吸道感染（如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等）的人員要暫時停止其工作或調(diào)換崗位。

金黃色葡萄球菌污染的控制防止食品污染防止金黃色葡萄球菌對奶及其制品的污染：如牛奶廠要定期檢查奶牛的乳房，不能擠用患化膿性乳腺炎的牛奶；奶擠出后，要迅速冷至-10℃以下，以防毒素生成、細菌繁殖。奶制品