紫外可見分光光度法的原理及應(yīng)用-課件

紫外-可見分光光度法的原理及應(yīng)用

(Ultraviolet-VisibleSpectrophotometry)

紫外-可見分光光度法的原理

物質(zhì)對光的選擇吸收

當(dāng)一束光照射到某種物質(zhì)的固態(tài)物或溶液上時，一部分光會被吸收或被反射，不同的物質(zhì)對于照射它們的光束的吸收程度是不同的，對某個波長的光吸收強(qiáng)烈，對另外波長的光吸收很小或不吸收，我們把這種現(xiàn)象稱為光的選擇吸收。

一切物質(zhì)都會對可見和不可見光中的某些波長的光進(jìn)行吸收。

物質(zhì)呈現(xiàn)各種各樣顏色，就是它們對可見光中某些特定波長的光線選擇吸收的結(jié)果。

物質(zhì)顏色和吸收光顏色的關(guān)系

吸收光

物質(zhì)顏色

顏色波長(nm)

黃綠紫400~450

黃藍(lán)450~480

橙綠藍(lán)480~490

紅藍(lán)綠490~500

紫紅綠500~560

紫黃綠560~580

藍(lán)黃580~600

綠藍(lán)綠600~650

藍(lán)綠紅650~750紫外-可見分光光度法的原理

紫外-可見分光光度法是利用物質(zhì)對光的吸收光譜，對物質(zhì)進(jìn)行定性分析或定量分析的方法。按所吸收光的波長區(qū)域不同，分為紫外分光光度法和可見分光光度法，合稱為紫外-可見分光光度法。

0.01nm0.1nm800nm10μm500μm1cm

波長200nm400nm2.5μm25μm1m

光譜可

區(qū)域見

γ射線χ射線紫外光光紅外光微波無線電波

分析分光

方法χ射線紫外分

光度核磁共振

γ射線光譜法光譜法光光度法

法紅外光譜法微波光譜法光譜法

紫外-可見分光光度法的原理-定性分析不同結(jié)構(gòu)的物質(zhì)吸收光譜也不同，這是對物質(zhì)進(jìn)行定性分析的基礎(chǔ)：通過檢測吸收光譜來比對鑒定分析物質(zhì)。

波長范圍吸光度利用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定性分析

在相同條件下，測定未知物的吸收光譜，與標(biāo)準(zhǔn)物的吸收光譜進(jìn)行比較，如果兩吸收光譜的形狀和吸收峰的數(shù)目、位置、拐點(diǎn)等完全一致，就可初步判定未知物與標(biāo)準(zhǔn)物是同一種物質(zhì)。紫外-可見分光光度法的原理-定量分析Lambert–Beer光吸收定律：當(dāng)一束平行單色光通過均勻的樣品時，其吸光度與吸光組分的濃度、吸收池的厚度乘積成正比.入射光I0透射光ItLC吸光度的測量：紫外-可見分光光度計(jì)0.575光源單色器吸收池檢測器顯示在紫外可見分光光度計(jì)中，常用的光源有兩類：可見光光源，如鎢燈和鹵鎢燈；紫外光源，如氫燈和氘燈。

1光源

紫外-可見分光光度計(jì)的組成單色器以棱鏡或光柵分光，提供單色光。

2單色器吸收池又稱比色皿或比色杯，按材料可分為玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外區(qū)。

3吸收池紫外-可見分光光度計(jì)的組成4檢測器檢測器的作用是檢測光信號，并將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枴，F(xiàn)今使用的分光光度計(jì)大多采用光電管或光電倍增管作為檢測器。5信號顯示系統(tǒng)常用的信號顯示裝置有自動記錄和數(shù)字顯示裝置等。紫外-可見分光光度法的應(yīng)用范圍幾乎所有的無機(jī)元素和在紫外及可見光區(qū)有特征吸收的有機(jī)物或有機(jī)化合物都能用紫外/可見分光光度法進(jìn)行測定。目前，紫外可見分光光度計(jì)已成為全世界歷史最悠久、使用最多、覆蓋面最廣的常規(guī)分析儀器。紫外-可見分光光度法的應(yīng)用范圍紫外-可見分光光度法的應(yīng)用范圍涉及化學(xué)化工、醫(yī)療衛(wèi)生、冶金地質(zhì)、食品飲料、農(nóng)