實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)一紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

紅細(xì)胞計(jì)數(shù)一、原理紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是取一定微量血液，經(jīng)等滲稀釋液稀釋后充入計(jì)數(shù)池內(nèi),在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)量,計(jì)算出每升血液內(nèi)所含紅細(xì)胞數(shù)目。二、器材及試劑：1、取血吸管：一次性定量采血管(20ul)2、計(jì)數(shù)板：是一塊厚玻璃制成，板上刻度分為9個(gè)大方格，每大方格體積為0.1mm3

。中央大方格用于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，被雙線等分成25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又劃分為16個(gè)小方格(見(jiàn)圖1－1)。計(jì)數(shù)板與蓋玻片組成計(jì)數(shù)池，計(jì)數(shù)池深度為0.1mm。3、顯微鏡4、蓋玻片5、刺血針6、小試管、2ml刻度吸管7、紅細(xì)胞稀釋液。8、75%酒精棉球及干棉球。三、操作:

1、先準(zhǔn)備一清潔小試管，加入紅細(xì)胞稀釋液1.99毫升，備用。2、選擇左手中指或無(wú)名指尖的側(cè)腹部(手指肚)，先用75%酒精棉球消毒局部皮膚，待酒精揮發(fā)或用消毒棉球擦干，用左手拇指和食指固定采血部位,以右手用消毒后的刺血針迅速刺入皮膚，深約2-3毫米，取出刺針，待血液從針孔流出，用棉花擦去第一滴血。3、如血流不暢，可于離刺孔較遠(yuǎn)的地方輕輕擠壓，使血液流出形成綠豆大小的血滴。操作者用右手平拿取血吸管尖端浸入血滴中，緩緩吸血恰至“10”刻度處為止。然后用干棉球擦凈吸管外沾附的血液。將取好的血液立即擠入紅細(xì)胞稀釋液底部，并來(lái)回吸取上層少量稀釋液數(shù)次，以便將殘余在吸管中的血液全部洗凈。4、用消毒干棉球按壓穿刺傷口。5、搖動(dòng)試管，充分混勻。此時(shí)血液被稀釋200倍。6、滴入計(jì)數(shù)池(充池)，(1)先將計(jì)數(shù)板及蓋玻片擦干凈，并將蓋玻片復(fù)蓋于計(jì)數(shù)池上面。(2)用吸管吸取己充分混勻的稀釋血液一滴，滴于蓋玻片的下方邊緣處，稀釋血液即充填入計(jì)數(shù)池中。注意勿發(fā)生氣泡或使稀釋血液流入計(jì)數(shù)池旁小槽內(nèi)。(3)靜置2－3分鐘，待紅細(xì)胞完全下沉穩(wěn)定后進(jìn)行計(jì)數(shù)。7、計(jì)數(shù)。(1)平放計(jì)數(shù)板于顯微鏡臺(tái)上，先用低倍鏡找到計(jì)數(shù)池的中央大方格。觀察紅細(xì)胞是否均勻，并調(diào)整至視野中間。(2)再轉(zhuǎn)換高倍鏡計(jì)數(shù)。鏡下紅細(xì)胞為園形或盤形略帶黃色的細(xì)胞。如將上側(cè)線和左側(cè)線上的紅細(xì)胞都計(jì)數(shù)在內(nèi)，則不要再將下側(cè)和右側(cè)線上的細(xì)胞計(jì)入(見(jiàn)圖1－2)。計(jì)數(shù)時(shí)必須按一定方向和順序，以免將紅細(xì)胞重復(fù)計(jì)數(shù)或漏數(shù)。圖1－2在中方格內(nèi)計(jì)教紅細(xì)胞的順序和方法

數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右(3)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格(即四角的及中央的中方格)紅細(xì)胞總共的個(gè)數(shù)。每升血液中紅細(xì)胞數(shù)目=五個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞個(gè)數(shù)×5(變?yōu)橐粋€(gè)大格)×10(變?yōu)?u1)×106(變?yōu)?L)×200(稀釋倍數(shù))=五個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞個(gè)數(shù)×1010

8、報(bào)告方式：*.**×1012/L四、正常值成人男性：(4.0－5.5)×1012/L

成人女性：(3.5－5.0)×1012/L新生兒：(6.0－7.0)×1012/L五、注意事項(xiàng)：1.局部皮膚不能在有水腫、炎癥、淤血等。2.所用吸管、試管、滴管及血細(xì)胞計(jì)數(shù)板須干凈無(wú)水。3.操作迅速，充池一次完成，不能有氣泡，外溢。4.紅細(xì)胞分布不均，每個(gè)中方格之間相差大于20個(gè)時(shí)要重新充池計(jì)數(shù)。5，一人一針，防止交叉感染。針刺深度適當(dāng)，使血